抗人CD4和抗人CD184单克隆抗体作为标志物的应用制造技术

本发明专利技术公开了抗人CD4单克隆抗体和抗人CD184单克隆抗体的组合作为标志物的应用，具体地，用作诊断结缔组织病相关间质性肺炎的标志物，用于制备诊断结缔组织病相关间质性肺炎的试剂或试剂盒；或用于制备判定结缔组织病相关间质性肺炎严重程度、转归或预后的试剂或试剂盒。本发明专利技术还提供相应的试剂盒。

【技术实现步骤摘要】
抗人CD4和抗人CD184单克隆抗体作为标志物的应用
本专利技术涉及医学领域，具体涉及一种可用于检测结缔组织病相关间质性肺炎的标记物及其用途。
技术介绍
结缔组织病是一组以自身结缔组织损害为特点的自身免疫性疾病。结缔组织病(Connectivetissuedisease,CTD)有许多具体类型,如系统性红斑狼疮(SLE)、类风湿关节炎(RA)、系统性硬化症(SSc)、干燥综合征(pSS)、多发性肌炎和皮肌炎(PM/DM，如无肌病性皮肌炎ADM)、混合性结缔组织病(MCTD)、脊柱关节病(SpA)等。结缔组织病(ConnectiveTissueDisease，CTD)临床表现复杂多变，累及多器官组织，其中肺受累最为常见，也是严重威胁患者生命的高致死率疾病，是CTD急性期死亡的重要原因之一。以上各种CTD均可并发间质性肺炎,称为结缔组织病相关间质性肺炎(ConnectiveTissueDiseaseAssocitatedwithInterstitialLungDisease,CTD-ILD)。根据文献报道，约15％-25％的间质性肺炎病人患有基础CTD疾病。CTD-ILD最常见于PM/DM/ADM、RA及SSc。在CTD中，ILD既可以是CTD的首发表现，也可为CTD的远期并发症。目前临床上对于ILD诊断的生物标记物尚缺乏，较为特异的血清学标记物为酶联免疫分析检测KL-6，但此指标在我国并未大规模应用于临床，且ELISA检测法本身结果不稳定，阳性率偏高，且现有报道称，KL-6与疾病的活动度并无明显相关关系，且对于CTD-ILD并无特定诊断价值。目前，本领域尚需针对临床CTD-ILD诊断以及疾病严重程度和转归等的判断进行深入研究。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供抗人CD4单克隆抗体和抗人CD184(又名CXCR4)单克隆抗体双抗联合的用途和相应的检测试剂盒。本专利技术的第一方面，提供抗人CD4单克隆抗体和抗人CD184单克隆抗体组合的用途，(a)用于制备诊断结缔组织病相关间质性肺炎的试剂或试剂盒；(b)用于制备判定结缔组织病相关间质性肺炎严重程度的试剂或试剂盒；(c)用于制备判定结缔组织病相关间质性肺炎转归的试剂或试剂盒；(d)用于制备判定结缔组织病相关间质性肺炎预后的试剂或试剂盒。在另一优选例中，所述抗人CD4单克隆抗体和/或所述抗人CD184单克隆抗体有可检测标记。在另一优选例中，所述可检测标记选自下组：生色团、化学发光基团、荧光团、同位素或酶。在另一优选例中，所述诊断或所述判定是基于外周血进行诊断或判定。在另一优选例中，所述诊断或所述判定是基于外周血单个核细胞PBMC进行诊断或判定。本专利技术的第二方面，提供试剂盒，所述试剂盒含有一容器，所述容器中含有抗人CD4单克隆抗体和抗人CD184单克隆抗体；以及标签或说明书，所述标签或说明书注明所述试剂盒用于诊断结缔组织病相关间质性肺炎；和/或判定结缔组织病相关间质性肺炎严重程度、转归和/或预后。在另一优选例中，所述抗人CD4单克隆抗体和/或所述抗人CD184单克隆抗体有可检测标记。在另一优选例中，所述可检测标记选自下组：生色团、化学发光基团、荧光团、同位素或酶。在另一优选例中，所述标签或说明书注明基于外周血或外周血单个核细胞PBMC进行诊断或判定。本专利技术的第三方面，提供抗人CD4单克隆抗体和抗人CD184单克隆抗体组合的用途，用作(a)诊断结缔组织病相关间质性肺炎的标志物；(b)判定结缔组织病相关间质性肺炎严重程度的标志物；(c)判定结缔组织病相关间质性肺炎转归的标志物；(d)判定结缔组织病相关间质性肺炎预后的标志物。应理解，在本专利技术范围内中，本专利技术的上述各技术特征和在下文(如实施例)中具体描述的各技术特征之间都可以互相组合，从而构成新的或优选的技术方案。限于篇幅，在此不再一一累述。附图说明图1为外周血单个核细胞PBMC中CD4+CD184+T细胞比例、CD8+CD184+T细胞比例、CD19+CD184+T细胞比例以及CD14+CD184+T细胞比例检测结果图，其中NC为正常体检组，Pneumonia为肺炎，IPF为特发性肺纤维化。CTD为结缔组织病，CDT-ILD为结缔组织病相关性间质性肺炎。图2为单病种患者的外周血单个核细胞PBMC中CD4+CD184+T细胞、CD8+CD184+T细胞比例、CD19+CD184+T细胞比例以及CD14+CD184+T细胞比例比例检测结果图，其中NC为正常体检组，PM/DM/ADM为多发性肌炎/皮肌炎/无肌病性皮肌炎，PM/DM/ADM+ILD为多发性肌炎/皮肌炎/无肌病性皮肌炎相关间质性肺炎，RA为类风湿关节炎，RA+ILD为类风湿关节炎相关间质性肺炎，SSc为系统性硬化症，SSc+ILD为系统性硬化症相关间质性肺炎，SLE为系统性红斑狼疮，SLE+ILD为系统性红斑狼疮相关间质性肺炎。图3为CTD-ILD患者的外周血单个核细胞PBMC中CD4+CD184+T细胞比例与疾病严重程度(患者肺功能及HRCT评分)的相关性分析图，其中，FVC为用力肺活量，DLCOSB/VA为肺弥散功能检查。图4为CTD-ILD患者的外周血单个核细胞PBMC中CD4+CD184+T细胞比例，与KL-6相比，其诊断效能ROC曲线。图5为CTD-ILD患者的外周血单个核细胞PBMC中CD4+CD184+T细胞比例与患者生存率的相关性分析。结果提示，CD4+CD184+T细胞比例大于45％时，预后差。各附图中，CXCR4表示CD184。具体实施方式本专利技术人经过广泛而深入地研究，发现CTD-ILD外周血PBMC中CD4+CD184+T细胞比例(以CD4+T细胞为100％)明显高于正常对照组、肺炎病人及单纯CTD病人组，且CD4+CD184+T细胞比例与CTD-ILD患者肺功能呈负相关，与HRCT评分(评分越高，肺功能越差)呈现明显的正相关关系。因此，CD4+CD184+T细胞比例可以作为CTD-ILD患者临床诊断及评价疾病严重程度、转归及预后的有效指标(或辅助指标)。抗人CD4单克隆抗体和抗人CD184单克隆抗体的组合可以用作诊断结缔组织病相关间质性肺炎的标志物。在此基础上，完成了本专利技术。T细胞T淋巴细胞(或T细胞)是免疫系统中具有具有免疫活性的一类细胞。T细胞的细胞膜上有许多不同的标志，主要是表面抗原和表面受体。CD4蛋白在本专利技术中，术语“CD4蛋白”、“CD4多肽”、“CD4抗原”可互换使用，都指在哺乳动物(如人)淋巴细胞表面的一种蛋白。CD4主要表达于辅助T(Th)细胞，是Th细胞TCR识别抗原的供受体，与MHCⅡ类分子的非多肽区结合，参与Th细胞TCR识别抗原的信号传导。CD184蛋白在本专利技术中，术语“CD184蛋白”、“CD184多肽”、“CD184抗原”可互换使用，都指在哺乳动物(如人)淋巴细胞表面的蛋白CD184。CD184是一种存在细胞表面的受体，也称为C-X-Cchemokinereceptortype4或CXCR-4)。抗CD4特异性抗体在本专利技术中，术语“本专利技术抗体”和“抗CD4的特异性抗体”可互换使用。本专利技术还包括对人CD4多肽具有特异性的多克隆抗体和单克隆抗体，尤其是单克隆抗体。这里，“特异性”是指抗体能结合于人CD4基因本文档来自技高网...

【技术保护点】
抗人CD4单克隆抗体和抗人CD184单克隆抗体组合的用途，其特征在于，(a)用于制备诊断结缔组织病相关间质性肺炎的试剂或试剂盒；(b)用于制备判定结缔组织病相关间质性肺炎严重程度的试剂或试剂盒；(c)用于制备判定结缔组织病相关间质性肺炎转归的试剂或试剂盒；(d)用于制备判定结缔组织病相关间质性肺炎预后的试剂或试剂盒。

【技术特征摘要】
1.抗人CD4单克隆抗体和抗人CD184单克隆抗体组合的用途，其特征在于，(a)用于制备诊断结缔组织病相关间质性肺炎的试剂或试剂盒；(b)用于制备判定结缔组织病相关间质性肺炎严重程度的试剂或试剂盒；(c)用于制备判定结缔组织病相关间质性肺炎转归的试剂或试剂盒；(d)用于制备判定结缔组织病相关间质性肺炎预后的试剂或试剂盒。2.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述抗人CD4单克隆抗体和/或所述抗人CD184单克隆抗体有可检测标记。3.如权利要求2所述的用途，其特征在于，所述可检测标记选自下组：生色团、化学发光基团、荧光团、同位素或酶。4.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述诊断或所述判定是基于外周血进行诊断或判定。5.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述诊断或所述判定是基于外周血单个核细胞PBMC进行诊断或判定。6.一种试剂盒，其特征在于，所述试剂盒含有一容器，所述容器中含有抗...

【专利技术属性】
技术研发人员：庄磊靓，
申请(专利权)人：庄磊靓，
类型：发明
国别省市：上海,31