The invention discloses a specific transgenic maize gene of plasmid pPZ, the blank carrier for plasmid pMD19-T vector containing phyA2 gene specific sequence of phytase maize and maize endogenous gene sequence, as shown in the sequence list 1. The construction method is as follows: firstly, the design of specific PCR primers from genomic DNA of maize phytase gene was amplified, then using molecular cloning technique this fragment cloned into pMD19-T vector, plasmid pPZ molecules. Plasmid pPZ of the invention, can be used as a phytase corn standard substitute for qualitative and quantitative detection of phytase transgenic maize, strong adaptability, good stability, accurate comparison of actual sample analysis results, a good solution to the strains tested positive in the process of the problem of the lack of standard material the application value and market prospect, has the extremely high.
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及植酸酶玉米phyA2基因质粒分子PPZ的构建及其在转基因玉米定量检测中的应用，属于分子生物学领域。
技术介绍
植酸酶(phytase)，是催化植酸和植酸盐水解成肌醇和磷酸(或盐)的一类酶的总称，系统名称为肌醇六磷酸酶，属于磷酸单脂水解酶，是一类特殊的酸性磷酸酶，能水解植酸最终释放出无机磷。在植物来源的动物饲料中，大部分磷酸盐是以植酸的形式存在的。而单胃动物例如猪和家禽缺少分解植酸的酶。在动物饲料中添加异种植酸酶可以改良磷酸盐的生物利用度，消除植酸的抗营养作用；减少磷在环境中的排泄，由此降低了农业生态的负担，并减缓了水生环境的富营养化；同时也减少了动物饲料中无机磷的添加，后者是一种不可再生的资源。利用植物生物反应器生产植酸酶的研究由来已久，比如来源于WT烟曲霉的植酸酶和经过改造的热稳定植酸酶已经在小麦和大麦中成功表达；来源于无花果曲霉的植酸酶也已在烟草，苜蓿和马铃薯叶片中成功表达。我国科学家通过分离来自黑曲霉的植酸酶基因phyA2并构建到玉米特异表达载体上，得到了 27个表达植酸酶并能稳定遗传的转基因玉米纯合系。其种子中植酸酶活性均在1000U / ...
【技术保护点】
植酸酶玉米phyA2基因质粒分子pPZ，其特征在于：该质粒分子的序列如下：CCAATTTCACCGCCACGTTCGTCCCCTCCATTCGTCAACGTCTGGAGAACGACCTG?TCCGGTGTGACTCTCACAGACACAGAAGTGACCTACCTCATGGACATGTGCTCCTTCGA?CACCATCTCCACCAGCACCGTCGACACCAAGCTGTCCCCCTTCTGTGACCTGTTCACCC?ATGACGAATGGATCAACTACGACTACCTCCAGTCCTTGAAAAAGTATTACGGCCATGGTG?CAGGTAACCTGAAGC...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：路兴波，张广远，李凡，高瑞，徐晓辉，杨淑珂，孙红炜，
申请(专利权)人：山东省农业科学院植物保护研究所，
类型：发明
国别省市：
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