一种针对PD-L1的单克隆抗体或抗体片段制造技术

本发明专利技术公开了一种针对PD‑L1的单克隆抗体或抗体片段，该抗体或抗体片段包含：重链和轻链。重链和轻链包括可变区，可变区包括互补决定区。重链的互补决定区CDR1、CDR2和CDR3分别用HCDR1、HCDR2和HCDR3表示。轻链的互补决定区CDR1、CDR2和CDR3分别用LCDR1、LCDR2和LCDR3表示。HCDR1的氨基酸序列包括SEQ ID NO：3，HCDR2的氨基酸序列包括SEQ ID NO：4，HCDR3的氨基酸序列包括SEQ ID NO：5，LCDR1的氨基酸序列包括SEQ ID NO：6，LCDR2的氨基酸序列包括SEQ ID NO：7，LCDR3的氨基酸序列包括SEQ ID NO：8。本发明专利技术的抗体或抗体片段能够增强免疫系统，提高淋巴细胞分泌白细胞介素‑2，具有作为制备抗肿瘤、抗炎症和抗传染病的药物的用途。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种人类程序性死亡受体配体1（PD-L1）的抗体，具体涉及一种针PD-L1的单克隆抗体或抗体片段。
技术介绍
程序性死亡配体1（PD-L1）在慢性传染病，怀孕，组织移植，自身免疫性疾病和癌症的过程中起着免疫抑制的作用。PD-L1通过与程序性死亡受体1（PD-1）相结合来调控免疫系统的应答。PD-1主要表达在T细胞，B细胞和单核细胞的表面。PD-L1也可以通过与它的另外的受体B7-1相互作用来下调T细胞的功能。PD-L1/PD-1信号通路的激活能下调T细胞的活性和细胞因子的分泌，抑制免疫系统的抗癌活性。PD-L1在很多癌症组织中都有很高的表达，比如膀胱癌，乳腺癌，结肠癌，肺癌，黑色素瘤，卵巢癌，唾液腺癌，胃癌，甲状腺癌等。PD-L1在癌细胞中的过表达有可能与加速癌细胞的侵袭和很低的预后有关。抗人的PD-L1单克隆抗体可以有效的与人的PD-L1结合，阻断PD-L1介导的信号通路，从而激活人体的免疫系统，达到治疗癌症或者其他相关疾病的目的。目前针对PD-L1受体PD-1的单抗药，如Keytruda（默沙东研发的药物，第一个被FDA批准的PD-1抑制剂）、Opdivo（百时美施贵宝研发的药物，PD-1抑制剂）和Atezolizumab（罗氏研发的药物，PD-L1抑制剂）已经上市，并且在多种癌症的治疗中表现出了显著的治疗效果。
技术实现思路
本专利技术提供一种针对PD-L1的单克隆抗体或抗体片段，该抗体或抗原与其结合片段能够高特异性的与人PD-L1结合，能够提高淋巴细胞分泌白细胞介素-2（IL-2），增强免疫系统。为了达到上述目的，本专利技术提供了一种针对PD-L1的单克隆抗体或抗体片段，该抗体或抗体片段包含：重链和轻链，所述的抗体片段为抗原与所述的抗体结合的片段。其中，所述的重链和轻链包括可变区，所述的可变区包括互补决定区。其中，所述重链的互补决定区CDR1、CDR2和CDR3分别用HCDR1、HCDR2和HCDR3表示；所述轻链的互补决定区CDR1、CDR2和CDR3分别用LCDR1、LCDR2和LCDR3表示。其中，所述的HCDR1的氨基酸序列包括SEQIDNO：3或该序列内一个或少数几个氨基酸被其他氨基酸简单置换的SEQIDNO：3。其中，所述的HCDR2的氨基酸序列包括SEQIDNO：4或该序列内一个或少数几个氨基酸被其他氨基酸简单置换的SEQIDNO：4。其中，所述的HCDR3的氨基酸序列包括SEQIDNO：5或该序列内一个或少数几个氨基酸被其他氨基酸简单置换的SEQIDNO：5。其中，所述的LCDR1的氨基酸序列包括SEQIDNO：6或该序列内一个或少数几个氨基酸被其他氨基酸简单置换的SEQIDNO：6。其中，所述的LCDR2的氨基酸序列包括SEQIDNO：7或该序列内一个或少数几个氨基酸被其他氨基酸简单置换的SEQIDNO：7。其中，所述的LCDR3的氨基酸序列包括SEQIDNO：8或该序列内一个或少数几个氨基酸被其他氨基酸简单置换的SEQIDNO：8。所述的重链可变区氨基酸序列包括SEQIDNO：1或选自SEQIDNO：1中的氨基酸组成的至少80%同源性的氨基酸序列。所述的轻链可变区氨基酸序列包括SEQIDNO：2或选自SEQIDNO：2中的氨基酸组成的至少80%同源性的氨基酸序列。所述的抗体或抗体片段以2×10-9M或更低的KD与人PD-L1结合，并且与人PD-L2结合不显著或不结合。所述的抗体或抗体片段为：嵌合抗体，人源化抗体，全人源抗体，或选自以下的抗体片段：Fab、F（ab’）2、Fv、dAb和scFv。所述的全人源抗体为IgG1、IgG2或IgG4全长抗体中的任意一种。所述的抗体或抗体片段的重链可变区由选自SEQIDNO：9中的核苷酸序列编码；所述的抗体或抗体片段的轻链可变区由选自SEQIDNO：10中的核苷酸序列编码。一种含有所述的核苷酸序列的表达载体。一种含有所述的表达载体的宿主细胞。所述的针对PD-L1的全人源单克隆抗体或抗体片段在制备免疫偶联物或其组合物中的用途，所述的免疫偶联物由治疗剂与所述的抗体或抗原与其结合片段共价结合；所述的组合物由所述的免疫偶联物和药学上可用载体组合。所述的治疗剂包括：细胞毒剂、放射性同位素或免疫抑制剂。所述的针对PD-L1的全人源单克隆抗体或抗体片段在制备抗肿瘤药物或其组合物中的用途。所述的肿瘤包括：骨癌，肺癌，皮肤癌，头颈癌，乳腺癌，子宫癌，卵巢癌，输卵管癌，子宫内膜癌，宫颈癌，阴道癌，前列腺癌，睾丸癌，阴茎癌，膀胱癌，输尿管癌，肾癌，肾盂癌，结肠癌，直肠癌，胃癌，食道癌，胰腺癌，小肠癌，甲状腺癌，甲状旁腺癌，肾上腺癌，淋巴瘤，软组织肉瘤，恶性黑色素瘤，慢性或急性白血病，中枢神经系统肿瘤中的任意一种或两种以上；所述的皮肤癌为鳞状细胞癌；所述的淋巴瘤为霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤或T细胞淋巴瘤；所述的慢性或急性白血病为急性髓细胞淋巴癌，慢性髓细胞淋巴癌，急性淋巴细胞癌或慢性淋巴细胞癌；所述的中枢神经系统肿瘤为神经胶质瘤或垂体腺瘤。所述的针对PD-L1的全人源单克隆抗体或抗体片段在制备抗传染病的药物或其组合物中的用途，所述的传染病包括：由病毒、细菌、真菌或寄生虫中任意一种或两种以上引起的传染病；其中，所述的病毒包括：HIV、肝炎病毒、流感病毒、疱疹病毒、腺病毒、虫媒病毒、埃可病毒、鼻病毒、柯萨奇病毒、冠状病毒、呼吸道合胞病毒、流行性腮腺炎病毒、轮状病毒、麻疹病毒、风疹病毒、细小病毒、痘苗病毒、人类嗜T细胞病毒、登革热病毒、乳头瘤病毒、软疣病毒、脊髓灰质炎病毒、狂犬病毒、JC病毒和虫媒病毒脑炎病毒中的任意一种或两种以上。其中，所述的细菌包括：分枝杆菌、葡萄球菌、链球菌、奈瑟氏菌、克雷伯氏菌、变形菌、沙雷氏菌、假单胞菌、军团杆菌、白喉杆菌、沙门氏菌、芽孢杆菌、霍乱菌、破伤风菌、肉毒杆菌和鼠疫杆菌中的任意一种或两种以上；所述的葡萄球菌为金黄色葡萄球菌，所述的链球菌为肺炎链球菌；所述的奈瑟氏菌为脑膜炎球菌或淋球菌，所述的假单胞菌为绿脓杆菌，所述的芽孢杆菌为炭疽杆菌。其中，所述的真菌包括：假丝酵母、新型隐球菌、曲霉属、毛霉属(如)、申克孢子丝菌、皮炎芽生菌、巴西副球孢子菌、粗球孢子菌和夹膜组织胞浆菌中的任意一种或两种以上；所述的假丝酵母为白假丝酵母、克鲁斯假丝酵母、光滑假丝酵母或热带假丝酵母，所述的曲霉属为烟曲霉或黑曲霉，所述的毛霉属为毛霉、犁头霉或根霉。其中，所述的寄生虫包括：溶组织内阿米巴、结肠小袋纤毛虫、福氏耐格里阿米巴、棘阿米巴、利什曼原虫、贾第虫、隐孢子虫、卡氏肺囊虫、疟原虫、果氏巴贝虫、布氏锥虫、克氏锥虫、杜氏利什曼原虫、鼠弓形体、巴西日圆线虫；所述的贾第虫为兰伯贾第虫，所述的疟原虫为间日疟原虫。所述的针对PD-L1的全人源单克隆抗体或抗体片段在制备抗炎症性疾病的药物或其组合物中的用途，所述的炎症性疾病指由于淋巴细胞免疫下调所导致的炎症性疾病。所述的炎症性疾病包括：扁平苔藓癣。本专利技术提供的一种针对PD-L1的单克隆抗体或抗原与其结合片段，具有以下优点：本专利技术的抗体和抗体片段与人PD-L1的高亲和力结合，而且与人PD-L2不结合或不显著结合，表明了本专利技术的抗体和抗体片段的特异性高；本专利技术的抗体和抗体片段在混合淋巴细胞反应中能增强IL-本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种针对PD‑L1的单克隆抗体或抗体片段，其特征在于，该抗体或抗体片段包含：重链和轻链，所述的抗体片段为抗原与所述的抗体结合的片段；所述的重链和轻链包括可变区，所述的可变区包括互补决定区；所述重链的互补决定区CDR1、CDR2和CDR3分别用HCDR1、HCDR2和HCDR3表示；所述轻链的互补决定区CDR1、CDR2和CDR3分别用LCDR1、LCDR2和LCDR3表示；所述的HCDR1的氨基酸序列包括SEQ ID NO：3或该序列内一个或少数几个氨基酸被其他氨基酸简单置换的SEQ ID NO：3；所述的HCDR2的氨基酸序列包括SEQ ID NO：4或该序列内一个或少数几个氨基酸被其他氨基酸简单置换的SEQ ID NO：4；所述的HCDR3的氨基酸序列包括SEQ ID NO：5 或该序列内一个或少数几个氨基酸被其他氨基酸简单置换的SEQ ID NO：5；所述的LCDR1的氨基酸序列包括SEQ ID NO：6 或该序列内一个或少数几个氨基酸被其他氨基酸简单置换的SEQ ID NO：6；所述的LCDR2的氨基酸序列包括SEQ ID NO：7或该序列内一个或少数几个氨基酸被其他氨基酸简单置换的SEQ ID NO：7；所述的LCDR3的氨基酸序列包括SEQ ID NO：8 或该序列内一个或少数几个氨基酸被其他氨基酸简单置换的SEQ ID NO：8。...

【技术特征摘要】
1.一种针对PD-L1的单克隆抗体或抗体片段，其特征在于，该抗体或抗体片段包含：重链和轻链，所述的抗体片段为抗原与所述的抗体结合的片段；所述的重链和轻链包括可变区，所述的可变区包括互补决定区；所述重链的互补决定区CDR1、CDR2和CDR3分别用HCDR1、HCDR2和HCDR3表示；所述轻链的互补决定区CDR1、CDR2和CDR3分别用LCDR1、LCDR2和LCDR3表示；所述的HCDR1的氨基酸序列包括SEQIDNO：3或该序列内一个或少数几个氨基酸被其他氨基酸简单置换的SEQIDNO：3；所述的HCDR2的氨基酸序列包括SEQIDNO：4或该序列内一个或少数几个氨基酸被其他氨基酸简单置换的SEQIDNO：4；所述的HCDR3的氨基酸序列包括SEQIDNO：5或该序列内一个或少数几个氨基酸被其他氨基酸简单置换的SEQIDNO：5；所述的LCDR1的氨基酸序列包括SEQIDNO：6或该序列内一个或少数几个氨基酸被其他氨基酸简单置换的SEQIDNO：6；所述的LCDR2的氨基酸序列包括SEQIDNO：7或该序列内一个或少数几个氨基酸被其他氨基酸简单置换的SEQIDNO：7；所述的LCDR3的氨基酸序列包括SEQIDNO：8或该序列内一个或少数几个氨基酸被其他氨基酸简单置换的SEQIDNO：8。2.根据权利要求1所述的针对PD-L1的单克隆抗体或抗体片段，其特征在于，所述的重链可变区氨基酸序列包括SEQIDNO：1或选自SEQIDNO：1中的氨基酸组成的至少80%同源性的氨基酸序列。3.根据权利要求2所述的针对PD-L1的单克隆抗体或抗体片段，其特征在于，所述的轻链可变区氨基酸序列包括SEQIDNO：2或选自SEQIDNO：2中的氨基酸组成的至少80%同源性的氨基酸序列。4.根据权利要求3所述的针对PD-L1的单克隆抗体或抗体片段，其特征在于，所述的抗体或抗体片段以2×10-9M或更低的KD与人PD-L1结合，并且与人PD-L2结合不显著或不结合。5.根据权利要求4所述的针对PD-L1的单克隆抗体或抗体片段，其特征在于，所述的抗体或抗体片段为：嵌合抗体，人源化抗体，全人源抗体，或选自以下的抗体片段：Fab、F（ab’）2、Fv、dAb和scFv。6.根据权利要求5所述的针对PD-L1的单克隆抗体或抗体片段，其特征在于，所述的全人源抗体为IgG1、IgG2或IgG4全长抗体中的任意一种。7.根据权利要求1-6中任意一项所述的针对PD-L1的单克隆抗体或抗体片段，其特征在于，所述的抗体或抗体片段的重链可变区由选自SEQIDNO：9中的核苷酸序列编码；所述的抗体或抗体片段的轻链可变区由选自SEQIDNO：10中的核苷酸序列编码。8.一种含有如权利要求7所述的核苷酸序列的表达载体。9.一种含有如权利要求8所述的表达载体的宿主细胞。10.一种根据权利要求1-6中任意一项所述的针对PD-L1的全人源单克隆抗体或抗体片段在制备免疫偶联物或其组合物中的用途，其特征在于，所述的免疫偶联物由治疗剂与所述的抗体或抗原与其结合片段共价结合；所述的组合物由所述的免疫偶联物和药学上可用载体组合。11.根据权利要求10所述的在制备免疫偶联物或其组合物中的...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐强，徐圣涛，
申请(专利权)人：常州费洛斯药业科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32