【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种克隆载体，尤其是一种方便基因克隆工作的载体。
技术介绍
目前分子生物学领域常用的克隆载体分为两种；一种是有大量多克隆位点的环状克隆载体，一种是没有多克隆位点的线性T载体。但是他们均有一定的使用限制。有多克隆位点的环状克隆载体，以pUC57为例，它的多克隆位点中包含有EcoRI, HindIII等常用酶切位点，但毕竟不能包含所有的酶切位点，比如常用的Notl，XhoI等，而往往插入的目的基因要使用这些没有的酶切位点，因此双酶切克隆就受到了一定的限制，除非在目的基因两端额外增加酶切位点。倘若使用平端克隆的话，有时候目的基因上又有载体上本身的酶切位点，这就造成了最终构建的重组质粒中有多个酶切位点，酶切位点的唯一性受到影响，会对后续的实验造成一定的影响。线性T载体克隆，以pMD18-T simple为例，T载体只能克隆有A尾巴的PCR产物，而现今高保真酶(如PFU)的使用越来越普及，而用PFU扩增的产物均是平末端的，这给TA克隆带来了一定的麻烦。同时线性载体无法大量复制，因此技术和费用上往往受限于生产厂家，不能做到自给自足。另外，这个载体并不是去掉了全...
【技术保护点】
一种改造的克隆载体，为环状克隆载体，为将pUC57载体的多克隆位点采用EcoRV、SmaI和StuI三个平端克隆位点替代，并去掉pUC57载体中LacZ下游的NdeI酶切位点获得，所述改造的克隆载体仅有EcoRV、SmaI和StuI三个克隆位点。
【技术特征摘要】
1.种改造的克隆载体，为环状克隆载体，为将PUC57载体的多克隆位点采用EcoRV、SmaI和StuI三个平端克隆位点替代，并去掉pUC57载体中LacZ下游的NdeI酶切位点获得，所述改造的克隆载体仅有EcoRV、SmaI和StuI三个克隆位点。2.权利要求1所述改造的克隆载体，其特征在于，所述改造的克隆载体中，将PUC57载体中序列为SEQ ID N0.2的LacZ序列及其互补序列替换为序列为SEQ ID N0.3的LacZ序列及其互补序列。3.权利要求1所述改造的克隆载体，其特征在于，所述去掉PUC57载体中LacZ...
【专利技术属性】
技术研发人员：孔凡静，王素莲，王乾，庄慧忠，
申请(专利权)人：生工生物工程上海股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
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