一种新克隆载体pAT3733制造技术

本发明专利技术涉及一个同时具有氨苄青霉素和四环素抗性基因标记的插入失活型克隆载体pAT3733。该载体是通过双酶切去除pBR322上的Rop基因，补平末端后自连而获得。pAT3733不仅保留了pBR322的插入失活筛选标记，而且分子量更小，稳定性更高，质粒拷贝数提高3倍以上，便于基因克隆操作，工作效率更高。可替代目前广泛使用的pBR322质粒，成为通用的高效克隆载体。

【技术实现步骤摘要】
—种新克隆载体PAT3733
本专利技术涉及生物工程
，具体涉及一种克隆载体质粒。
技术介绍
质粒PBR322是最早用人工方法构建成功的一种较理想的克隆载体，至今仍是基因工程中最常用和最具代表性的质粒，被广泛地用于基因工程，有“万能载体”之称。它是由博利瓦(Bolivar)等人于1977年构建而成的，是一个典型的人工质粒载体。它具有较小的相对分子质量，因而装载较大量的外源DNA ;它具有较高的拷贝数，这就为重组体DNA的制备提供了极大的方便；它还具有两种抗菌素抗性基因，即氨苄青霉素抗性基因和四环素抗性基因。这为检测重组体质粒提供了方便。但pBR322质粒中的R0P(Repressor Of Primer)因子控制了 PBR322质粒的拷贝数，从而降低了其质粒的复制能力，一般只能有15~20个拷贝。目前，虽然从PBR322中已经开发研制出了诸如pUC序列等许多应用广泛的质粒，但由于PBR322同时含有氨苄青霉素和四环素两种抗性筛选基因，非常便于筛选克隆，依然是许多研究者的首选克隆载体。在PBR322中，由于沿设基因的存在，质粒DNA复制受到严重影响，DNA的拷贝数低本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种克隆载体质粒，由一个四环素抗性基因和一个氨苄青霉素抗性基因，以及一个复制子构成，其特征是在四环素抗性基因和氨苄青霉素抗性基因之间只有一个复制子序列，不含有Rop基因序列。

【技术特征摘要】
1.一种克隆载体质粒，由一个四环素抗性基因和一个氨苄青霉素抗性基因，以及一个复制子构成，其特征是在四环素抗性基因和氨...

【专利技术属性】
技术研发人员：韦建福，
申请(专利权)人：云南农业大学，
类型：发明
国别省市：