一种植物乳杆菌定量检测方法及其检测试剂盒和应用技术

本发明专利技术公开了一种植物乳杆菌定量检测方法及其检测试剂盒和应用。该植物乳杆菌（Lactobacillus?plantarum）定量检测方法包括：（1）提取待检样品的总RNA；（2）将提取的总RNA反转录成cDNA；（3）采用特异性扩增植物乳杆菌的引物对，以所得cDNA为模板，进行荧光定量PCR扩增，其中上游引物序列如SEQ?ID?No:1所示；下游引物序列如SEQ?ID?No:2所示；（4）通过比较待检样品的Ct值和定量外标准品的标准曲线测定其中植物乳杆菌数量。本方法能够有效排除其他细菌，尤其是近缘菌的干扰，只检测样品中存活的植物乳杆菌数量。本发明专利技术所述植物乳杆菌定量检测试剂盒使用简便，检测效率高。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物工程领域，特别是涉及一种植物乳杆菌定量检测方法，所述植物乳杆菌定量检测方法是定量荧光PCR方法，一种植物乳杆菌定量检测试剂盒及其应用。
技术介绍
植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)是乳酸杆菌中的一种，与人类的生活关系密切，常存在于发酵的蔬菜和果汁中。植物乳杆菌作为人体胃肠道的益生菌群，具有维持肠道内菌群平衡、提高机体免疫力和促进营养物质吸收等多种功能，因而被广泛的作为·益生菌添加到功能性食品与保健品中。大量研究表明，只有产品中益生菌的活菌数达到I X IO6个/ML才能够发挥其应有的功效，因而益生菌活菌数量是评价益生菌制品质量的重要指标。然而目前对多菌复合产品中的植物乳杆菌的定性、定量检测方面缺乏科学、合理、快速的方法。传统生理生化方法易受选择培养基、培养条件、菌种特性等因素影响，检测效率有限，且耗时时间长，一般要2-3天；以16S rDNA序列同源性分析作为细菌系统发育和亲缘关系研究已被普遍应用于乳酸菌的分类鉴定中，但由于植物乳杆菌与戊糖乳杆菌、副植物乳杆菌等具有99%的相似性，利用该方法只能鉴定到属而无法准确到种。伴随着高通量测序技术本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种植物乳杆菌（Lactobacillus?plantarum）定量检测方法，其特征在于，所述植物乳杆菌定量检测方法包括以下步骤：（1）提取待检样品的总RNA；（2）将步骤（1）提取的总RNA反转录成cDNA；（3）采用特异性扩增植物乳杆菌的引物对，以步骤（2）所得cDNA为模板，进行荧光定量PCR扩增检测，其中所述特异性扩增植物乳杆菌的引物对为：上游检测引物，其序列如序列表中SEQ?ID?No:1所示；下游检测引物，其序列如序列表中SEQ?ID?No:2所示；（4）通过比较待检样品的Ct值和定量外标准品的标准曲线测定样品中植物乳杆菌的数量。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：陈臣，任婧，周方方，艾连中，
申请(专利权)人：光明乳业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：