【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及人信号转导与转录激活因子(Signal Transducton and Activators of Transcription STATs)家族成员，更具体的说，本专利技术涉及人STAT3基因SiRNA慢病毒载体的构建方法。
技术介绍
信号转导和转录活化因子STATs家族是一种存在于细胞胞浆并在激活后能够转入细胞核内与DNA结合的蛋白家族，具有信号转导和转录调控的双重功能。已发现的STATs 家族成员有STATl、STAT2、STAT3、STAT4、STAT5a、STAT5b和STAT6七种，分别由不同的基因编码，广泛参与细胞生长、增殖、分化和凋亡等多种生理功能的调控，并与炎症、肿瘤和免疫反应关系密切。在这些STATs蛋白当中，STAT3与肿瘤的关系最为密切，相当多的证据表明STAT3 在细胞恶变的过程中起关键性作用。正常情况下，STAT3的激活对细胞的增殖和分化起着重要的调控作用，但STAT3的异常活化常伴随有细胞的生长失调/增殖失控。在多种人类恶性肿瘤，如白血病、乳腺癌、前列腺癌、胃癌、结肠癌、甲状腺癌中都发现有STAT3的持续性过度激活。研究...
【技术保护点】
１．一种人ＳＴＡＴ３基因ＳｉＲＮＡ慢病毒载体，包括：一段核苷酸序列和慢病毒载体ｐＬｅｎｔｉ６．３／Ｖ５－ＤＥＳＴ，所述核苷酸序列含有针对人ＳＴＡＴ３基因ｍＲＮＡ序列的干扰靶序列ＳｉＲＮＡ，所述人ＳＴＡＴ３基因ｍＲＮＡ序列的Ｇｅｎｅ ｂａｎｋ登录号为ＮＭ＿１３９２７６；其特征在于，所述干扰靶序列ＳｉＲＮＡ选自：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１，或ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２，或ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３，或ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４。
【技术特征摘要】
1.一种人STAT3基因SiRNA慢病毒载体，包括一段核苷酸序列和慢病毒载体 pLenti6. 3/V5-DEST，所述核苷酸序列含有针对人STAT3基因mRNA序列的干扰靶序列 SiRNA，所述人STAT3基因mRNA序列的Gene bank登录号为NM_139276 ；其特征在于，所述干扰靶序列 SiRNA 选自SEQ ID NO :1，或 SEQ ID NO :2，或 SEQ ID NO :3，或 SEQ ID NO :4。2.如权利要求1所述的人STAT3基因SiRNA慢病毒载体，其特征在于，所述人STAT3基因SiRNA慢病毒载体包括含有所述干扰靶序列SiRNA的寡核苷酸序列，所述寡核苷酸序列选自SEQ ID NO :6，或 SEQ ID NO :8，或 SEQ ID NO: 10，或 SEQ ID NO :12。3.—种人STAT3基因SiRNA慢病毒载体的构建方法，其特征在于，包括步骤1 针对选自人STAT3基因mRNA序列的干扰靶序列SiRNA，所述人STAT3基因mRNA 序列的Gene bank登录号为NM 139276，设计并合成含有干扰靶序列SiRNA的双链寡核苷酸序列，所述双链寡核苷酸序列选自 1# SEQ ID NO 5 与 SEQ ID NO :6，或 2# SEQ ID NO 7 与 SEQ ID NO :8，或 3# SEQ ID NO 9 与 SEQ ID NO :10，或 4# SEQ ID NO 11 与 SEQ ID NO :12。其中，所述干扰靶序列SiRNA分别对应于SEQ ID NO :1、SEQ ID NO :2、SEQ ID NO :3、SEQ ID NO 4 ；步骤2:将步骤1中设计并合成的所述双链寡核苷酸序列退火后形成含有干扰靶序列SiRNA的双链DNA，将所述含有干扰靶序列SiRNA的双链DNA插入到表达载体 pcDNATM6. 2-Gff/EmGFPmiR中，...
【专利技术属性】
技术研发人员：马玲娣，文世宏，倪诚，夏蕾，蒋丽佳，
申请(专利权)人：马玲娣，
类型：发明
国别省市：32
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