【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于分子生物学与生物医药
具体涉及一种针对PKCy基因RNA干扰 的重组慢病毒载体及其构建方法，并将这种病毒载体用于制备治疗慢性神经病理性疼痛的 药物。
技术介绍
(1) PKCY基因是慢性神经病理性疼痛治疗重要的分子靶。慢性疼痛不仅是医学界的一个难题，而且已成为社会经济的一大负担，据统计，全世 界有三亿二千多万人受到慢性疼痛的困扰。神经病理性疼痛(Neuropathic Pain)是与多种 周围神经障碍相关联的一组共同表现的症状，包括与糖尿病、甲状腺功能低下、尿毒症、 营养缺乏和化疗药物(长春新碱、顺铂等)相关的神经障碍；也包括格-巴二氏综合征、 带状疱疹后神经痛、进行性神经病性肌萎縮病、复合性局部疼痛综合征I型和缺血性神经 病变等(Gregory T， 2001)。国际疼痛研究会(IASP, 1994)将这种由于外周或中枢神经系 统的直接损伤功能紊乱引起的疼痛称为神经病理性疼痛。神经病理性疼痛是医学领域的挑 战性研究课题，目前发病机制不清，尚缺乏有效的治疗措施。近年来，对外周神经损伤所 致的神经病理性疼痛的分子、细胞机制，特别是在初级感觉神...
【技术保护点】
一种针对ＰＫＣγ基因ＲＮＡ干扰的重组慢病毒载体，是自身失活的第三代慢病毒载体ＳＩＮ，其特征在于，所述的载体ＳＩＮ含有ｐＧＣＳＩＬ－ＧＦＰ／Ｕ６－Ｓｈ ＰＫＣγ重组载体，所述的ｐＧＣＳＩＬ－ＧＦＰ／Ｕ６－Ｓｈ ＰＫＣγ重组载体是在ｐＧＣＳＩＬ－ＧＦＰ载体的ＭＣＳ中连接了针对ＳｈＲＮＡ的双链ＤＮＡ片段；所述的双链ＤＮＡ片段为以下序列中的一种： ＰＳＣＳＩ６２５： ５’－ＣＣＧＧＣＡＧＡＡＧＡＣＡＡＡＧＡＣＣＧＴＧＡＡＡＴＴＣＡＡＧＡＧＡＴＴＴＣＡＣＧＧＴＣＴＴＴＧＴＣＴＴＣＴＧＴＴＴＴＴＧ－３’ ３’－ＧＴＣＴＴＣＴＧＴＴＴＣＴＧＧＣＡＣＴＴＴＡＡＧＴＴＣＴＣＴＡＡＡＧＴＧＣＣ...
【技术特征摘要】
1、一种针对PKCγ基因RNA干扰的重组慢病毒载体，是自身失活的第三代慢病毒载体SIN，其特征在于，所述的载体SIN含有pGCSIL-GFP/U6-Sh PKCγ重组载体，所述的pGCSIL-GFP/U6-Sh PKCγ重组载体是在pGCSIL-GFP载体的MCS中连接了针对ShRNA的双链DNA片段；所述的双链DNA片段为以下序列中的一种PSCSI6255’-CCGGCAGAAGACAAAGACCGTGAAATTCAAGAGATTTCACGGTCTTTGTCTTCTGTTTTTG-3’3’-GTCTTCTGTTTCTGGCACTTTAAGTTCTCTAAAGTGCCAGAAACAGAAGACAAAAACTTAA-5’PSCSI6265’-CCGGGAAGTTTGAGGCCTGTAATTATTCAAGAGATAATTACAGGCCTCAAACTTCTTTTTG-3’3’-CTTCAAACTCCGGACATTAATAAGTTCTCTATTAATGTCCGGAGTTTGAAGAAAAACTTAA-5’PSCSI6275’-CCGGAACTCTATGCCATCAAGATACTTCAAGAGAGTATCTTGATGGCATAGAGTTTTTTTG-3’3’-TTGAGATACGGTAGTTCTATGAAGTTCTCTCATAGAACTACCGTATCTCAAAAAAACTTAA-5’PSCSI6285’-CCGGCAGACTACATAGCACCTGAGATTCAAGAGATCTCAGGTGCTATGTAGTCTGTTTTTG-3’3’-GTCTGATGTATCGTGGACTCTAAGTTCTCTAGAGTCCACGATACATCAGACAAAAACTTAA-5’。2、权利要求1所述的针对PKC Y基因RNA干扰的重组慢病毒载体的制备方法，其特征 在于，根据PKCYmRNA序列，设计合成了针对ShRNA的双链DNA片段，所述的双链DNA片 段为以下序列中的一种 PSCSI625:正义链5' -CCGGCAGMGACAAAGACCGTGMATTCMGAGATTTCACGGTCTTTGTCTTCTGTTTTTG-3' 反义链 3' — GT...
【专利技术属性】
技术研发人员：邹望远，郭曲练，宋宗斌，张重，刘畅，赵媛，
申请(专利权)人：邹望远，郭曲练，宋宗斌，张重，刘畅，赵媛，
类型：发明
国别省市：43
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