一种针对FLG基因RNA干扰的重组慢病毒载体及其制备制造技术

本发明专利技术涉及一种针对FLG基因RNA干扰的重组慢病毒载体及其制备。实验构建了针对FLG基因的shRNA的慢病毒载体，将合成的针对ShRNA的DNA片段通过慢病毒载体介导，还与pHelper1.0、pHelper2.0两种载体共转染293T细胞培养，获得重组慢病毒载体后，转染目的细胞，实现针对FLG基因的RNA干扰。采用的自身失活的第三代慢病毒载体，具有安全可靠、可感染非分裂细胞、目的基因整合至靶细胞基因组长时程表达、免疫反应小等优点，是一种理想载体。本发明专利技术的慢病毒载体，对人正常皮肤细胞HACAT干扰效果达75-95%，因此本发明专利技术重组慢病毒载体为有关FLG基因的进一步研究奠定良好实验基础，并能广泛用于体内基因治疗及基因功能研究。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属分子生物学，生物医药及基因工程
，主要涉及针对丝聚合蛋白 (filaggrin, FLG)基因的RNA干扰重组慢病毒载体(LV-sh-FLG)及其制备。
技术介绍
特应性皮炎(atopic dermatitis, AD),是一种与遗传有关的，复杂的、瘙痒性、慢性炎症性皮肤病。AD的病因和发病机制复杂，缺乏特效的治疗手段，严重影响婴幼儿及成年人的生活质量。目前认为AD的特征性临床表现是易感基因、环境因素、有缺陷的皮肤屏障功能、免疫学异常共同相互作用的结果。近年来，遗传学在AD的发病机理中的作用成为研究热点。有关的易感区域研究近年来取得了一定程度的进展。近来，很多研究发现丝聚合蛋白基因(filaggrin gene, FLG)突变和AD的发病有关。在有关寻常型鱼鳞病(IV)的基因研究中，表皮分化复合物(EDC)的染色体lq21已经被确认，并描绘出几个IV家系的在染色体lq21上的表皮分化复合物的绘制图，强化了 FLG可能是一个有潜在突变的可能致病的候补基因这一观点。在此基础上，2006年欧洲科学家发现FLG与AD发病的相关性，FLG也是AD的一个易感基因。并在今后的研本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：党宁宁，逄曙光，马晓丽，边红，初晶学，
申请(专利权)人：党宁宁，
类型：发明
国别省市：