本发明专利技术的目的是提供用于将多核苷酸疫苗输送到哺乳动物皮肤细胞中的方法和装置，以增加Ｔ细胞应答并减少由于长电波的施加以及由于肌肉收缩而导致的疼痛和不舒适。该方法包括（ａ）将多核苷酸疫苗送药到送药点处的皮肤中，（ｂ）对送药点附近的皮肤施加针电极，（ｃ）施加一系列至少三个单个的、操作员控制的、独立编程的、具有少于１００毫秒脉冲间隔的窄间隔电波，以通过电击将１５多核苷酸疫苗输送到皮肤细胞中。
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术一般地涉及用于向哺乳动物皮肤细胞输送多核苷酸疫苗的方法和装置。更具体地，本专利技术提供用于使用电波和电击(electroporation)来将多核苷酸疫苗输送到哺乳动物皮肤细胞中的方法和装置。
技术介绍
为了本公开的目的，术语“脉冲间隔”意味着从一个脉冲的开始到下一脉冲的开始的时间。 以下讨论以下公开物 美国专利No.6010613； 美国专利No.6603998； 美国专利No.6713291； “Enhancement of Cellular Immune Response to a Prostate Cancer DNAVaccine by Intradermal Electroporation”，Roos等人，在《分子理论》中，第13卷，No.2，2006年2月，320-327页(在此称为Roos等人)； “The Effect of pulse repetition frequency on the uptake intoelectropermeabilized cells in vitro with possible applications inelectrochemotherapy”，Pucihar等人的在Bioelectrochemistry 57(2002)，第167-172页(在此称为Pucihar等人)； Vernhes MC，Cabanes PA，Tessie J.Chinease Hamster ovary cells sensitivityto localized electrical stress，Bioelectrochemistry and Bioenergetics.1999，4817-25； Daskalov I，Mudrov N，Peycheva E.Exploring new instrumentation.Parameters for electrochemotherapy.Attacking tumors with bursts of biphasicpulses instead of single pulses.1999，IEEE Eng.Med.Biol 62-66； Chang DC，Cell poration and cell fusion using an oscillating electric field.1989 Biophys J.56641-652；以及 Tekle E，Astumian RD，Chock PB.Electroporation by using bipolaroscillating electric fieldAn improved method for DNA transfection of NIH 3T3cells.1991Proc.Natl.Acad.Sci.884230-4234。 在此通过参考并入的美国专利No.6010613公开了使用诸如由Cyto Pulse公司、810Cromwell Park Drive，Suite T，Glen Burnie，MD 21061的PA-4000系统(在此称为PulseAgile)提供的具有宽的间隔电波的电击。更具体地，美国专利No.6010613公开了向材料施加一系列至少三个单个、操作员控制的独立编程的DC电脉冲，其中，该一系列至少三个DC电脉冲具有以下特征中的一个、两个或三个(1)至少三个脉冲中的至少两个在脉冲幅度上彼此不同；(2)至少三个脉冲中的至少两个在脉冲宽度上彼此不同；以及(3)至少三个脉冲中的第一组两个脉冲的第一脉冲间隔不同于该至少三个脉冲中的第二组两个脉冲的第二脉冲间隔。 为了在此讨论和公开的目的，上述向物质施加具有特征(1)、(2)和(3)的一系列至少三个单个、操作员控制的独立编程的DC电脉冲，在此被称为“PulseAgile”。 在美国专利No.6010613中公开的说明书和与PulseAgile系统相关的文档提供了脉冲间隔等于或大于0.1秒，即100毫秒。以下，将具有等于或大于100毫秒脉冲间隔的PulseAgile生成的电波称为“宽间隔PulseAgile电波”或“慢PulseAgile电波”。 在美国专利No.6010613中，没有呈现具体证据来证明，所送药的疫苗成功地从基因表达出该疫苗，或提供改进的T细胞应答，包括由于该疫苗的成功基因表达而引起的好蛋白质的分泌得到改善。 在此都通过引用附于此的美国专利No.6603998和美国专利No.6713291都公开了使用宽间隔PulseAgile电波或慢PulseAgile电波来向生物细胞输送多核苷酸疫苗。 Roos等公开了使用宽间隔PulseAgile电波或慢PulseAgile电波来将多核苷酸疫苗输送到哺乳动物皮肤细胞中。Roos等还公开了通过检测表达荧光素酶(luciferase)蛋白质的遗传标记来证实多核苷酸疫苗的成功的遗传表达。另外，Roos等公开了通过使用宽间隔PulseAgile电波或慢PulseAgile电波来将多核苷酸疫苗输送到哺乳动物皮肤细胞中，存在改进的T细胞应答，包括由于多核苷酸疫苗的成功的遗传表达而引起的好的蛋白质的分泌改善。在Roos等中，T细胞应答用产生PSA特异性IFN(γ)的CD8+T细胞来代表。 除了在Roos等的公开物中公开的有益结果以外，存在通过使用慢PulseAgile电波而观察到的两个不期望的结果。第一个不期望的结果是，每个慢PulseAgile电波送药过程花费大约3.5秒。由于使用刺到哺乳动物皮肤中的针来送药导致不舒适或疼痛，因此对于这3.5秒的送药过程哺乳动物将不得不忍受大约3.5秒的不舒适或疼痛。 在Roos等中公开的第二个不期望的结果是，每个慢PulseAgile电波导致能感知的肌肉收缩。肌肉收缩本身也可能导致不舒适或疼痛。通常，为运送多核苷酸疫苗，将向哺乳动物施加多个脉冲波形。因此，将伴随这这种慢PulseAgile电波而发生具有多次额外的肌肉不舒适或疼痛的多次肌肉收缩。 Pucihar等公开了在其2002年的公开日之前，已经结合化学疗法药剂使用电脉冲来治疗癌症细胞。早前的电脉冲具有1Hz的频率，从而每个脉冲产生一次相关的强直性收缩(肌肉收缩)。注意，1Hz意味着每个周期1000毫秒。所讨论的电脉冲规程是具有均匀的(uniform)脉冲幅度、均匀的脉冲宽度和均匀的脉冲间隔的脉冲的所有脉冲序列。化学疗法药剂包括小的不渗透的亲水分子。Pucihar等的研究涉及将癌变细胞用非渗透性亲水小分子荧光黄(LuciferYellow)处理后进行体外(而非体内)实验。Pucihar等发表的研究探索了各种脉冲重复频率以便超过强直性收缩的频率(以便使连续的肌肉收缩融入到平稳的运动中)。在Pucihar等中存在如下陈述通过40Hz或更快的刺激频率，使连续的肌肉收缩融入到平稳的运动中。该40Hz脉冲频率使用均匀脉冲幅度、均匀脉冲宽度和均匀脉冲间隔的脉冲。注意，40Hz意味着每个周期25毫秒。 Vernhes等人公开了CHO细胞在体外经0.5到100Hz的脉冲频率电击后，其活力和渗透性很高。 Daskalo本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种用于将多核苷酸疫苗输送到哺乳动物皮肤细胞中的方法，包括以下步骤：（ａ．）将多核苷酸疫苗送药到送药点处的皮肤中，（ｂ．）对送药点附近的皮肤施加针电极，（ｃ．）施加一系列至少三个单个的、操作员控制的、独立编程的、具有少于１００毫秒脉冲间隔的窄间隔电波，以通过电击将多核苷酸疫苗输送到皮肤细胞中，其中，该一系列至少三个波形具有以下特征中的一个、两个或三个特征：（１）该至少三个波形中的至少两个在波形幅度上彼此不同；（２）该至少三个波形中的至少两个在波形宽度上彼此不同；以及（３）该至少三个波形中的第一组两个波形的第一波形间隔不同于该至少三个波形中的第二组两个波形的第二波形间隔。
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】US 2007-5-21 60/924,9681.一种用于将多核苷酸疫苗输送到哺乳动物皮肤细胞中的方法，包括以下步骤(a.)将多核苷酸疫苗送药到送药点处的皮肤中，(b.)对送药点附近的皮肤施加针电极，(c.)施加一系列至少三个单个的、操作员控制的、独立编程的、具有少于100毫秒脉冲间隔的窄间隔电波，以通过电击将多核苷酸疫苗输送到皮肤细胞中，其中，该一系列至少三个波形具有以下特征中的一个、两个或三个特征(1)该至少三个波形中的至少两个在波形幅度上彼此不同；(2)该至少三个波形中的至少两个在波形宽度上彼此不同；以及(3)该至少三个波形中的第一组两个波形的第一波形间隔不同于该至少三个波形中的第二组两个波形的第二波形间隔。2.根据权利要求1的方法，其中，顺序地执行步骤(a.)和步骤(b.)。3.根据权利要求1的方法，其中，使用用多核苷酸疫苗预先涂覆的电极来同时进行步骤(a.)和步骤(b.)。4.一种用于将多核苷酸疫苗输送到哺乳动物皮肤细胞中的装置，包括窄间隔电波发生器，其能够施加一系列至少三个单个的、操作员控制的、独立编程的、具有少于100毫秒脉冲间隔的窄间隔电波，其中，该...
【专利技术属性】
技术研发人员：理查德E沃尔特斯，德林C沃尔特斯，艾伦D金，安娜卡林鲁斯，
申请(专利权)人：塞托帕尔斯科技公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。