The present invention provides a mutant strain MN ZX1 and its application for transforming progesterone into 9 hydroxy progesterone, and its application. The preservation of the strain is CGMCC No.13901. The invention also provides a method for preparing 9 hydroxyhydroxyprogesterone based on the new Mycobacterium gold. Compared with the traditional transformation method, the invention has the advantages of simple technology, high yield, less by-products and no pollution to the environment. The strain MN ZX1 of the invention has the characteristics of stable high yield traits, and the strain is stable after 20 generations of generation.
【技术实现步骤摘要】
一种新金分枝杆菌及其在制备9-羟基黄体酮中的应用
本专利技术属于生物工程领域,涉及一种新金分枝杆菌及其在制备甾体化合物中间体9-羟基黄体酮中的用途。
技术介绍
甾体类药物是仅次于抗生素的全球第二大药物,生理活性多种多样、在现实生活中应用十分广泛。全球每年对甾体类药物有巨大需求量,可见对甾体类药物合成的研究可以产生巨大的经济效益。早年对甾体药物的合成多采用化学方法,但工艺复杂、成本高、产量低且污染大;近年来大多采用反应专一且高效、成本低、反应条件温和、污染小的微生物转化法获得所需的甾体药物。微生物可以选择性地修饰或改造甾体化合物分子结构,这是通过微生物产生的酶催化进行的。1952年,美国普强药厂的生物化学家D.H.彼得森和微生物学家H.C.默里发现少根根霉能使孕酮的11碳位羟基化,生成11α-羟基孕酮,科学家们又相继发现细菌、真菌、放线菌中的某些种,可以使一定结构的甾体化合物在一定的部位上发生分子结构的改变。这种酶促反应具有严格的底物特异性,一般能使底物分子上1个或2个基团起反应。至今已发现微生物转化甾体化合物的反应类型几乎包括任何已知的微生物酶促反应和已经发现的化 ...
【技术保护点】
1.一种新金分枝杆菌,该新金分枝杆菌的保藏编号为CGMCC No.13901。
【技术特征摘要】
1.一种新金分枝杆菌,该新金分枝杆菌的保藏编号为CGMCCNo.13901。2.根据权利要求1所述的新金分枝杆菌在制备9-羟基黄体酮中的用途。3.一种9-羟基黄体酮的制备方法,其特征在于,所述方法包括使用如权利要求1所述的新金分枝杆菌将黄体酮转化为9-羟基黄体酮。4.如权利要求3所述的方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤:1)将如权利要求1所述的新金分枝杆菌接种于种子培养基进行培养,得到种子培养物;2)在发酵罐中,在黄体酮的存在下,将步骤1)的种子培养物接种于转化培养基发酵培养;3)将步骤2)发酵培养后的发酵液离心,取沉淀溶于甲醇中,离心取上清液,将上清液蒸馏结晶,并将结晶置于水中,降温析晶,抽滤后减压干燥,既得。5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,在步骤1)中,所述种子培养的培养基为BPYG培养基;优选地,所述BPYG培养基包括以下组分:牛肉膏0.3g/L,蛋白胨1.0g/L,酵母粉0.3g/L,甘油1.5g/L,调节pH至7.0;优选地,所述种子培养为振荡培养,更优选地所述培养为在28-32℃下,优选地32℃下,以200-250转/分振荡培养36-60h,优选地48h。6.根据权利要求4或5所述的方法,其特征在于,在步骤2)中,所述转化培养基包括以下组分:大豆蛋白胨1~5g/L,酵母提取物0.5~2g/L,葡萄糖0.5~2g/L,柠檬酸0.1~0.3g/L,柠檬酸铁铵0.01~0.05g/L,K2HPO40.5~1.5g/L,MgSO4·7H2O0.01~0.1g/L,NH4NO30.1~0.5g/L,黄体酮0.1~1.5g/L;调节pH至6.5-7.5;优选地,所述转化培养基包括以下组分:大豆蛋白胨3g/L,酵母提取物1g/L,葡萄糖1.0g/L,柠檬酸0.2g/L,柠檬酸铁铵0.01g/L,K2HPO41.0g/L,MgSO4·7H2O0.05g/L,NH4NO30.3g/L,黄体酮1...
【专利技术属性】
技术研发人员:张驰,张鑫,隋靓,
申请(专利权)人:沈阳旺宁生物科技有限公司,
类型:发明
国别省市:辽宁,21
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