一组结核分枝杆菌蛋白及其编码基因与应用制造技术

本发明专利技术公开了一组结核分枝杆菌蛋白及其编码基因与应用。本发明专利技术公开一组蛋白，由如下(1)-(7)所示的蛋白组成：(1)SEQ ID No.1所示的蛋白；(2)SEQ ID No.3所示的蛋白；(3)SEQ ID No.5所示的蛋白；(4)SEQ ID No.7所示的蛋白；(5)SEQ ID No.9所示的蛋白；(6)SEQ ID No.11所示的蛋白；(7)SEQ ID No.13所示的蛋白。本发明专利技术公开的蛋白质芯片对有效诊断活动性肺结核、有效监控肺结核病人的康复过程具有重要意义。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一组蛋白及其编码基因与应用；特别涉及一组结核分枝杆菌蛋白及其编码基因与应用，属于生物医药领域。
技术介绍
多个世纪以来，结核病持续在全球成为一个不容忽视的公共卫生问题。目前全球已有三分之一的人口携带结核分枝杆菌，仅2010年一年就新增结核病病例880万，死亡145万，平均不到22秒即有一人死于肺结核病，结核病高居传染病死亡人数之首。而我国是全球22个结核病高负担国家之一，结核病患者人数高居全球第二位，受感染人数超过5亿，仅2010年一年就有新发病例90～120万，占据了全球总新增病例的约12％，如不及时采取有效措施，在未来十年内可能有3000万人发病，将会导致严重的公共卫生问题和社会问题，所以从国家战略层面必需尽快实现对肺结核的有效控制。科学表明由于活动性肺结核的极易传播性，对活动性肺结核的诊断及尽快消除传染源，结核病的治疗效果评估及控制结核病流行有非常重大的意义。然而肺结核的根治目前还不能完全做到，据研究表明活动性结核病患者经不同的短程化疗治愈后，有1％-9％的患者将会复发，而在一些特殊人群中，高达20％(HongKongChestService/BritishMedicalResearchCouncil.AmRevRespirDis,1991,143:700-706)，而且耐药性结核病进一步传播与复发未及时诊断的结核患者有很大的关系。所以关于结核治愈患者的活动性肺结核诊断对于防治结核的整体战略具有很大的意义。另外，从临床治疗角度看，结核病的常规治疗方案一般需要6个月的时间，而常规结核病的治疗药物有一定的毒副作用，病人的依从性并不好。由于个体间的差异，理论上不同病人实际需要的用药时间可能会有很大的不同，但对于如何细分病人，目前仍缺乏客观的判断指标。通过系统地比较活动性结核病病人和结核康复人群的血清，有可能发现一批可以准确区分这两类人群的生物标识物，这些标识物将可用于康复过程的监控，从而有可能指导活动性结核病病人的个体化用药，缩短用药周期，提高病人对治疗的依从性，降低治疗费用，提高最终的治疗效果。目前活动性判断应综合临床、X线表现和痰菌决定，而主要依据是痰菌和X线。痰涂片检查简便易行，准确性较高，是活动性肺结核确诊的金标准，但某些研究中其检出率甚至低于10％。基于核酸扩增的诊断方法，如实时定量PCR以及DNA芯片的优点是灵敏度高且耗时短，其问题在于特异性较难保证，容易导致假阳性结果。而基于抗原抗体反应的血清学诊断，由于其简便性、快速性，日益成为重要的活动性肺结核临床辅助性诊断手段，并且能满足区分结核康复人群与活动性肺结核的要求。因此，从长远角度综合来看，应致力于发现敏感性和特异性均较好的结核标志物。理想的结核诊断标志物应符合以下条件：(1)敏感性高；(2)特异性高；(3)存在于体液，特别是血液中，易于检测。但是目前肺结核分枝杆菌血清学诊断所针对的抗原如抗原5、38KD抗原、30/31KD抗原以及抗原60等，均存在阳性检出率低，与其它分支杆菌的交叉免疫性等问题，虽然在疗效监测、提示复发、判断预后和高危人群的普查中具有一定的价值，但目前仍不能用于活动性肺结核的确诊及对病人康复过程的监控。为了实现对活动性肺结核的高灵敏性，高特异性的诊断，及对康复过程的有效监控，急需在分子水平上寻找到更敏感、更特异的活动性肺结核生物标志物。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一组结核分枝杆菌蛋白及其编码基因与应用。本专利技术提供一组蛋白，由如下(1)-(7)所示的蛋白组成：(1)SEQIDNo.1所示的蛋白；(2)SEQIDNo.3所示的蛋白；(3)SEQIDNo.5所示的蛋白；(4)SEQIDNo.7所示的蛋白；(5)SEQIDNo.9所示的蛋白；(6)SEQIDNo.11所示的蛋白；(7)SEQIDNo.13所示的蛋白。上述蛋白是用于诊断或辅助诊断活动性肺结核的一组蛋白。上述蛋白的编码基因也属于本专利技术的保护范围。上述编码基因中，所述编码基因为如下(1)-(7)所示的DNA分子：(1)DNA分子1：1)SEQIDNo.2所示的DNA分子；2)在严格条件下与1)限定的DNA分子杂交且编码上述蛋白中SEQIDNo.1所示的蛋白的DNA分子；3)与1)或2)限定的DNA分子具有90％以上的同一性且编码上述蛋白中SEQIDNo.1所示的蛋白的DNA分子；(2)DNA分子2：1)SEQIDNo.4所示的DNA分子；2)在严格条件下与1)限定的DNA分子杂交且编码上述蛋白中SEQIDNo.3所示的蛋白的DNA分子；3)与1)或2)限定的DNA分子具有90％以上的同一性且编码上述蛋白中SEQIDNo.3所示的蛋白的DNA分子；(3)DNA分子3：1)SEQIDNo.6所示的DNA分子；2)在严格条件下与1)限定的DNA分子杂交且编码上述蛋白中SEQIDNo.5所示的蛋白的DNA分子；3)与1)或2)限定的DNA分子具有90％以上的同一性且编码上述蛋白中SEQIDNo.5所示的蛋白的DNA分子；(4)DNA分子4：1)SEQIDNo.8所示的DNA分子；2)在严格条件下与1)限定的DNA分子杂交且编码上述蛋白中SEQIDNo.7所示的蛋白的DNA分子；3)与1)或2)限定的DNA分子具有90％以上的同一性且编码上述蛋白中SEQIDNo.7所示的蛋白的DNA分子；(5)DNA分子5：1)SEQIDNo.10所示的DNA分子；2)在严格条件下与1)限定的DNA分子杂交且编码上述蛋白中SEQIDNo.9所示的蛋白的DNA分子；3)与1)或2)限定的DNA分子具有90％以上的同一性且编码上述蛋白中SEQIDNo.9所示的蛋白的DNA分子；(6)DNA分子6：1)SEQIDNo.12所示的DNA分子；2)在严格条件下与1)限定的DNA分子杂交且编码上述蛋白中SEQIDNo.11所示的蛋白的DNA分子；3)与1)或2)限定的DNA分子具有90％以上的同一性且编码上述蛋白中SEQIDNo.11所示的蛋白的DNA分子；(7)DNA分子7：1)SEQIDNo.14所示的DNA分子；2)在严格条件下与1)限定的DNA分子杂交且编码上述蛋白中SEQIDNo.13所示的蛋白的DNA分子；3)与1)或2)限定的DNA分子具有90％以上的同一性且编码上述蛋白中SEQIDNo.13所示的蛋白的DNA分子；...

【技术保护点】
一组蛋白，由如下(1)‑(7)所示的蛋白组成： (1)SEQ ID No.1所示的蛋白； (2)SEQ ID No.3所示的蛋白； (3)SEQ ID No.5所示的蛋白； (4)SEQ ID No.7所示的蛋白； (5)SEQ ID No.9所示的蛋白； (6)SEQ ID No.11所示的蛋白； (7)SEQ ID No.13所示的蛋白。

【技术特征摘要】
1.一组蛋白，由如下(1)-(7)所示的蛋白组成：
(1)SEQIDNo.1所示的蛋白；
(2)SEQIDNo.3所示的蛋白；
(3)SEQIDNo.5所示的蛋白；
(4)SEQIDNo.7所示的蛋白；
(5)SEQIDNo.9所示的蛋白；
(6)SEQIDNo.11所示的蛋白；
(7)SEQIDNo.13所示的蛋白。
2.权利要求1所述蛋白的编码基因。
3.根据权利要求2所述的编码基因，其特征在于：所述编码基因为如下(1)-(7)所示的DNA分子：
(1)DNA分子1：
1)SEQIDNo.2所示的DNA分子；
2)在严格条件下与1)限定的DNA分子杂交且编码权利要求1中SEQIDNo.1所示的蛋白的DNA分子；
3)与1)或2)限定的DNA分子具有90％以上的同一性且编码权利要求1中SEQIDNo.1所示的蛋白的DNA分子；
(2)DNA分子2：
1)SEQIDNo.4所示的DNA分子；
2)在严格条件下与1)限定的DNA分子杂交且编码权利要求1中SEQIDNo.3所示的蛋白的DNA分子；
3)与1)或2)限定的DNA分子具有90％以上的同一性且编码权利要求1中SEQIDNo.3所示的蛋白的DNA分子；
(3)DNA分子3：
1)SEQIDNo.6所示的DNA分子；
2)在严格条件下与1)限定的DNA分子杂交且编码权利要求1中SEQIDNo.5所示的蛋白的DNA分子；
3)与1)或2)限定的DNA分子具有90％以上的同一性且编码权利要求1中SEQIDNo.5所示的蛋白的DNA分子；
(4)DNA分子4：
1)SEQIDNo.8所示的DNA分子；
2)在严格条件下与1)限定的DNA分子杂交且编码权利要求1中SEQIDNo.7所示的蛋白的DNA分子；
3)与1)或2)限定的DNA分子具有90％以上的同一性且编码权利要求1中SEQIDNo.7所示的蛋白的DNA分子；
(5)DNA分子5：
1)SEQIDNo.10所示的DNA分子；
2)在严格条件下与1)限定的DNA分子杂交且编码权利要求1中SEQIDNo.9所示的蛋白的DNA分子；
3)与1)或2)限定的DNA分子具有90％以上的同一性且编码权利要求1中SEQIDNo.9所示的蛋白的DNA分子；
(6)DNA分子6：
1)SEQIDNo.12所示的DNA分子；
2)在严格条件下与1)限定的DNA分子杂交且编码权利要求1中SEQIDNo.11所示的蛋白的DNA分子；
3)与1)或2)限定的DNA分子具有90％以上的同一性且编码权利要求1中SEQIDNo.11所示的蛋白的DNA分子；
(7)DNA分子7：
1)SEQIDNo.14所示的DNA分子；
2)在严格条件下与1)限定的DNA分子杂交且编码权利要求1中SEQIDNo.13所示的蛋白的DNA分子；
3)与1)或2)限定的DNA分子具有90％以上的同一性且编码权利要求1中SEQIDNo.13所示的蛋白的DNA分子。
4.含有权利要求2或3所述编码基因的重组载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌。
5.一种蛋白质芯片，包括基片和与其连接的权利要求1所述的蛋白质；且每种蛋白单独成立一个检测点。
6.根据权利要求5所述的蛋白质芯片，其特征在于：所述基片为载体玻片。
7.含有权利要求1所述蛋白的试剂盒。
8.含有权利要求5或6所述蛋白质芯片的试剂盒。
9.根据权利要求8所述的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒还包含使用说明书，说明书中记载内容如下：
1)将待检血清点样于权利要求5或6所述的蛋白质芯片进行检测，并用Cy5标记的抗人二抗进行显色，将蛋白质芯片在Cy5荧光的发射波长下进行检测，得到各检测点的信噪比，记作SNR；
所述SNR的计算公式为所述公式中，...

【专利技术属性】
技术研发人员：张先恩，陶生策，朱国峰，毕利军，邓教宇，张治平，江何伟，周盈，谷晶，郭书娟，张鸿泰，王绪德，邓瑞萍，王宗秀，刘钟慧，顾佳，李阳，李文娟，
申请(专利权)人：中国科学院生物物理研究所，上海交通大学，中国科学院武汉病毒研究所，广东体必康生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：北京;11