肠膜明串珠菌肠膜亚种、制备方法和应用技术

本发明专利技术揭示了一种肠膜明串珠菌肠膜亚种(Leuconostoc mesenteroides subsp.Mesenteroides)、制备方法及其应用，该肠膜明串珠菌肠膜亚种(Leuconostoc mesenteroides subsp.mesenteroides)其在中国典型培养物保藏中心的保藏编号为CCTCC NO：M 2018129。该肠膜明串珠菌肠膜亚种(Leuconostoc mesenteroides subsp.Mesenteroides)CCTCC NO：M 2018129具有高产酸能力和降解亚硝酸盐能力，且耐盐和耐酸碱，能提高产品营养品质的同时又能够延长产品贮藏期，开发了乳酸菌资源，有利于泡菜产业的发展，具有广阔的市场前景。

Enteric membrane subspecies of Rosa, enteric membrane, preparation method and Application

An enteric membrane subcona enteral membrane subspecies (Leuconostoc mesenteroides subsp.Mesenteroides), preparation method and its application are disclosed. The intestinal membrane subconcononus enteric membrane subspecies (Leuconostoc mesenteroides subsp.mesenteroides) is named CCTCC NO:M 2018129 in the Preservation Center of typical Chinese culture. The enteric membrane subspecies (Leuconostoc mesenteroides subsp.Mesenteroides) CCTCC NO:M 2018129 has high acid ability and degradation of nitrite, salt tolerance and acid-base resistance, which can improve the quality of the product and prolong the storage period of the product, open the resources of lactic acid bacteria and be beneficial to the pickle industry. Development has a broad market prospect.

【技术实现步骤摘要】
肠膜明串珠菌肠膜亚种、制备方法和应用
本专利技术涉及微生物领域，具体涉及一种肠膜明串珠菌肠膜亚种、其制备方法和应用。
技术介绍
明串珠菌是乳酸菌的一个属，是一类异型乳酸发酵的革兰氏阳性细菌，存在于植物的表面和根部，是乳或植物材料的自然发酵食品中的优势细菌。发酵能够代谢产生有机酸、醇类和双乙酰等多种芳香化合物，提高产品风味；生成葡聚糖可以作为血液增稠剂、舒展剂和稳定剂；生成甘露醇可作为低热量甜味剂；产生细菌素可作为生物防腐剂；生成低聚糖可维持人体肠道正常菌群的生态平衡，具有益生效果，明串珠菌有望成为新的微生态制剂。肠膜明串珠菌是明串珠菌属的重要菌种，是一类无芽孢革兰氏染色阳性细菌的总称，肠膜明串珠菌对人和动物均无毒性和致病作用，尤其是肠膜明串珠菌肠膜亚种已被我国卫生部(2012年第8号公告)与美国食品药品监督管理局(FDA)列为可食用菌种之一。肠膜明串珠菌肠膜亚种具有调节肠道菌群平衡，促进营养物质吸，改善产品风味，同时也具有抗氧化能力和拮抗致病菌能力。因其能够产生特殊风味物质，在乳和泡菜等食品领域广泛应用。泡菜是一种有着悠久历史的传统食品，目前世界上流行的泡菜按产地及口味主要分为中国泡菜、韩国泡菜和日本泡菜，日本泡菜属于非发酵型，中国泡菜和韩国泡菜是发酵型。朝鲜族泡菜是极具民族特色的中国泡菜之一，品种繁多，选料广泛，依原料、制法、用法和时间的不同，口味各异，具有独特浓厚的风味且富含乳酸菌活性和乳酸。樱菜是朝鲜族人种植的特色蔬菜，生长期短且具有季节性，营养丰富，味道适合大众口味。目前从河南林州泡菜、四川泡菜、辣白菜中分离出明串珠菌属的居多，但在朝鲜族传统发酵樱菜中尚未发现分离肠膜明串珠菌。同种微生物因菌源、分离和培养方法不同，其特性及功能性存在一定差异。在传统的发酵食品中，如泡菜，其在发酵过程中由于乳酸菌的生长缓慢或降解亚硝酸盐的能力较弱导致某些发酵食品中生成许多杂菌影响了泡菜的保质期，且泡菜中会生产生亚硝酸盐，亚硝酸盐是一种对人体非常有害的物质，过多或长期食用容易致癌。因此需要一种能够解决此类问题的菌。
技术实现思路
本专利技术的目的在于克服现有技术的缺陷，提供一种肠膜明串珠菌肠膜亚种及其制备方法和应用，该肠膜明串珠菌肠膜亚种具有高产酸能力和降解亚硝酸盐能力，且耐盐和耐酸碱，通过该肠膜明串珠菌肠膜亚种能够在泡菜的发酵中降解亚硝酸盐，且高产酸能力能够抑制有害菌的繁殖，延长泡菜的保质期。为实现上述目的，本专利技术提出第一方面的技术方案：一种肠膜明串珠菌肠膜亚种(Leuconostocmesenteroidessubsp.mesenteroides)，其保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏号为：CCTCCNO：M2018129。从吉林延边朝鲜族的樱菜泡菜中分离而得，获得所述的肠膜明串珠菌肠膜亚种(Leuconostocmesenteroidessubsp.Mesenteroides)。对该菌株进行鉴定，结果为肠膜明串珠菌肠膜亚种(Leuconostocmesenteroidessubsp.mesenteroides)。该菌株已于2018年3月14日保藏于中国典型培养物保藏中心（地址：中国武汉武汉大学），并收到保藏中心登记入册，编号CCTCCNO：M2018129，并于2018年3月28日确定检测结果为存活。本专利技术提出第二方面的技术方案：一种肠膜明串珠菌肠膜亚种肠膜明串珠菌肠膜亚种(Leuconostocmesenteroidessubsp.Mesenteroides)CCTCCNO：M2018129的制备方法，包括以下的步骤：以泡菜为菌源，优选地，泡菜为樱菜。在有氧条件下培养基中培养肠膜明串珠菌肠膜亚种(Leuconostocmesenteroidessubsp.Mesenteroides)CCTCCNO：M2018129。本专利技术的培养基为本领域常规的培养基，能够生长所述的肠膜明串珠菌肠膜亚种(Leuconostocmesenteroidessubsp.Mesenteroides)CCTCCNO：M2018129即可。优选地，培养基包括MRS液体培养基、LMM固体培养基和在含万古霉素的MRS固体培养基，优选地，万古霉素浓度为30ug/ml。采用该浓度的万古霉素时既能够保证获得最佳的肠膜明串珠菌肠膜亚种(Leuconostocmesenteroidessubsp.Mesenteroides)CCTCCNO：M2018129，而且其他菌在这个浓度无法生长，更有利于获得纯种的肠膜明串珠菌肠膜亚种JNZB003。具体的培养分离步骤依次为，首先，在MRS液体培养基中增殖培养肠膜明串珠菌肠膜亚种(Leuconostocmesenteroidessubsp.Mesenteroides)CCTCCNO：M2018129，其次，在LMM固体培养基上分离培养肠膜明串珠菌肠膜亚种(Leuconostocmesenteroidessubsp.Mesenteroides)CCTCCNO：M2018129，再次，在含万古霉素的MRS固体培养基中分离纯化培养肠膜明串珠菌肠膜亚种(Leuconostocmesenteroidessubsp.Mesenteroides)CCTCCNO：M2018129，其中，在固体培养基上分离培养采用平板划线法。所述培养的温度为本领域常规的温度和常规时间，以能够生长肠膜明串珠菌肠膜亚种(Leuconostocmesenteroidessubsp.Mesenteroides)CCTCCNO：M2018129，优选地，在MRS液体培养基中培养温度为25～36℃，培养时间为24～72h，进一步地，在MRS液体培养基中培养温度为30℃，培养条件为120-160r/min恒温震荡培养24～72h。最佳的，在MRS液体培养基中培养温度为30℃，培养条件为140r/min恒温震荡培养48h，该条件下能够获得性能更加优异的肠膜明串珠菌肠膜亚种(Leuconostocmesenteroidessubsp.Mesenteroides)CCTCCNO：M2018129。优选地，所述在LMM固体培养基中和在含万古霉素的MRS固体培养基中培养温度为25～36℃，培养时间为24～72h，进一步地，在LMM固体培养基中和在含万古霉素的MRS固体培养基中培养温度为30℃，培养条件为倒置恒温静置培养以获得性能最优的肠膜明串珠菌肠膜亚种(Leuconostocmesenteroidessubsp.Mesenteroides)CCTCCNO：M2018129。本专利技术提出第三方面的技术方案：肠膜明串珠菌肠膜亚种(Leuconostocmesenteroidessubsp.Mesenteroides)CCTCCNO：M2018129在泡菜生产中的应用。本专利技术的有益效果是：从朝鲜族传统发酵樱菜中分离的肠膜明串珠菌肠膜亚种肠膜亚种具有高产酸能力和降解亚硝酸盐能力，且耐盐和耐酸碱。能提高产品营养品质的同时又能够延长产品贮藏期，开发了乳酸菌资源。有利于泡菜产业的发展，具有广阔的市场前景。附图说明图1是本专利技术的菌株JNJB003在LMM培养基上分离的菌落形态图；图2是本专利技术的菌株JNJB003在MRS培养基上纯化的菌落形态图；图3是部分菌株革兰氏染色镜检照片；图4本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种肠膜明串珠菌肠膜亚种(Leuconostoc mesenteroides subsp.Mesenteroides)，其特征在于，其保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏号为：CCTCC NO：M 2018129。

【技术特征摘要】
1.一种肠膜明串珠菌肠膜亚种(Leuconostocmesenteroidessubsp.Mesenteroides)，其特征在于，其保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏号为：CCTCCNO：M2018129。2.一种肠膜明串珠菌肠膜亚种(Leuconostocmesenteroidessubsp.Mesenteroides)CCTCCNO：M2018129的制备方法，其特征在于，包括以下的步骤：以泡菜为菌源，在有氧条件下和培养基中培养肠膜明串珠菌肠膜亚种(Leuconostocmesenteroidessubsp.Mesenteroides)CCTCCNO：M2018129。3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述泡菜为樱菜。4.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述培养基中培养肠膜明串珠菌肠膜亚种(Leuconostocmesenteroidessubsp.Mesenteroides)CCTCCNO：M2018129包括在MRS液体培养基中增殖培养肠膜明串珠菌肠膜亚种(Leuconostocmesenteroidessubsp.Mesenteroides)CCTCCNO：M2018129，在LMM固体培养基上分离培养肠膜明串珠菌肠膜亚种(Leuconostocmese...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘笑笑，魏春雁，宋志峰，华晶忠，金永梅，李姝睿，段翠翠，樊慧梅，仇建飞，孟繁磊，张之鑫，马虹，杨建，王莹，王嵩，
申请(专利权)人：吉林省农业科学院，
类型：发明
国别省市：吉林,22