一种大豆蛋白酶抑制剂的纯化方法技术

本发明专利技术公开了一种大豆蛋白酶抑制剂的纯化方法。本发明专利技术的技术方案是将制得的蛋白酶抑制剂先用活性炭吸附除去较高分子量、未水解的大豆蛋白质及色素等物质，然后用超滤除去不溶底物、分子量较大的大豆蛋白质和肽类，获得合理的氨基酸和多肽，再用凝胶排阻色谱分离柱将混合物通过多孔的凝胶床而达到更好的分离效果。此方法设备简单，重复性好，得到的大豆蛋白酶抑制剂回收率很高，活力不受破坏。

Purification method of soybean protease inhibitor

The invention discloses a purification method of soybean protease inhibitor. The technical scheme of the invention is a protease inhibitor prepared first using activated carbon adsorption to remove high molecular weight, non hydrolyzed soy protein and pigment and other substances, and then use the ultrafiltration to remove the insoluble substrate, the larger molecular weight of soybean proteins and peptides, amino acids and peptides was reasonable, and gel exclusion chromatography separation column the separation effect of mixture by gel porous bed and achieve better. The method has the advantages of simple equipment and good repeatability, and the recovery rate of the soybean protease inhibitor is high and the viability of the soybean protease inhibitor is not destroyed.

【技术实现步骤摘要】
一种大豆蛋白酶抑制剂的纯化方法
本专利技术公开了一种大豆蛋白酶抑制剂的纯化方法。本专利技术的技术方案是将制得的蛋白酶抑制剂先用活性炭吸附除去较高分子量、未水解的大豆蛋白质及色素等物质，然后用超滤除去不溶底物、分子量较大的大豆蛋白质和肽类，获得合理的氨基酸和多肽，再用凝胶排阻色谱分离柱将混合物通过多孔的凝胶床而达到更好的分离效果。此方法设备简单，重复性好，得到的大豆蛋白酶抑制剂回收率很高，活力不受破坏。
技术介绍
我国是世界大豆的生产国之一，栽培历史悠久，分布广，种植面积大，大豆年产约640万吨，约占世界总产量的10％，位居第三。我国大豆品种蛋白质含量高，籽粒中蛋白质含量可高达48％-50％。大豆作为一种重要的农作物，价格低廉，氨基酸含量平衡，是一种重要的优质植物蛋白资源，具有诸多的生理功能。但由于它的低溶解性、不易消化吸收，高浓度状态下粘度大等缺点限制了其应用于食品及医药等行业。近代研究表明，人类摄入的蛋白质经消化酶作用后，不是像以前认为的那样仅以氨基酸的形式吸收，更多的是以小肽的形式吸收小分子肽具有良好的溶解性，人体消化时不被水解，而且可以直接被小肠绒毛上皮细胞快速吸收，并具有各种本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种大豆蛋白酶抑制剂的纯化方法，其特征在于：该方法包括如下步骤：（1）活性炭吸附脱色过程：将一定量的活性炭加入水解液，在40℃～60℃下搅拌1.5h～2.5h后过滤离心，去除活性炭；（2）超滤：料液用4kDa～2kDa 的超滤膜于40℃～60℃， 0.lMPa～0.2MPa 对料液超滤30min～50min ；（3）凝胶排阻色谱分离1）凝胶层析柱的制备称取10g Sephadex LH‑20用250mL洗脱液在沸水浴中加热搅拌3h，加热过程中需不断补充洗脱液，静置过夜，充分溶涨，得到凝胶悬浮液；先在层析柱内加入约1／3柱高的洗脱液，关闭出口，在搅拌下将凝胶悬浮液LH‑20缓慢注入柱子中，待自然...

【技术特征摘要】
1.一种大豆蛋白酶抑制剂的纯化方法，其特征在于：该方法包括如下步骤：（1）活性炭吸附脱色过程：将一定量的活性炭加入水解液，在40℃～60℃下搅拌1.5h～2.5h后过滤离心，去除活性炭；（2）超滤：料液用4kDa～2kDa的超滤膜于40℃～60℃，0.lMPa～0.2MPa对料液超滤30min～50min；（3）凝胶排阻色谱分离1）凝胶层析柱的制备称取10gSephadexLH-20用250mL洗脱液在沸水浴中加热搅拌3h，加热过程中需不断补充洗脱液，静置过夜，充分溶涨，得到凝胶悬浮液；先在层析柱内加入约1／3柱高的洗脱液，关闭出口，在搅拌下将凝胶悬浮液LH-20缓慢注入柱子中，待自然沉降1-2cm后，打开出口，继续加入凝胶悬浮液加到所需高度为止，并在胶面上加一片有机膜以保护胶面，最终柱体积为2*30cm；2）上柱：将一定体积的大豆蛋白水解上清液以3.0ml／min速度通过交联羟...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘乃山，宋立明，夏衬来，
申请(专利权)人：青岛冠龙生物制药有限公司，
类型：发明
国别省市：山东,37