蛋白酶体抑制剂MLN9708的合成方法技术

本发明专利技术提供一种蛋白酶体抑制剂MLN9708的合成方法。此方法以2，5-二氯苯甲酸为起始原料，经缩合、皂化制得N-(2，5-二氯苯甲酰)甘氨酸；然后与L-亮氨酸硼酸频哪醇酯盐酸盐对接；其产物通过与二乙醇胺形成络合物的方法纯化、水解脱保护得到对应的游离硼酸；最后，与柠檬酸反应得到MLN9708。本发明专利技术方法原料价廉易得，操作简便，反应条件温和，易于工业生产。

Synthesis method of proteasome inhibitor MLN9708

The invention provides a synthesis method of proteasome inhibitor MLN9708. This method to 5- 2, two chloro benzoic acid as starting materials by condensation, saponification of N- (2, 5- two - formyl) glycine; then with L- leucine acid pinacol ester hydrochloride docking; its product deprotection to free the boric acid purified by method, forming a complex with two ethanol. Hydrolysis; finally, citric acid and MLN9708. The method has the advantages of low cost, easy operation, mild reaction conditions and easy industrial production.

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及制药工艺，具体涉及蛋白酶体抑制剂MLN9708的合成方法。
技术介绍
MLN9708是一个可口服利用的二肽硼酸类蛋白酶体抑制剂，可用于多发性骨髓瘤和其他恶性肿瘤的治疗，现正处于临床III期研究阶段。MLN9708作为一个前药，在体内迅速水解为活性结构MLN2238发挥药理活性。MLN9708当前的专利WO2009154737合成路线如下：专利合成路线由2，5-二氯苯甲酰氯为起始原料，经4步反应得到最终产物MLN9708。该合成路线具有如下几个缺点：1)使用2，5-二氯苯甲酰氯作为起始原料，价格较贵，不易操作；2)使用的关键原料氨基硼酸为蒎烷二醇保护的氨基硼酸，该原料合成方法如下：合成过程复杂，成本高昂。3)采用异丁基硼酸脱除蒎烷二醇保护基，首先异丁基硼酸价格较贵，而且该反应需要使用多当量的异丁基硼酸，导致成本更高。而且由于这种置换脱除法反应不完全，导致下一步原料中含有杂质，使终产物的纯化比较困难。
技术实现思路
根据专利CN103030656A报道，α-氨基硼酸频那醇酯可由下列简便方法制备。专利WO2012177835报道了游离硼酸MLN2238的纯化方法：本专利技术将专利CN103030656A和WO2012177835拼合，并经过改进，研发出了一种合成MLN9708的新方法，避免了传统合成方法中的诸多弊端。本方法包括如下步骤：a)以2，5-二氯苯甲酸为起始原料，与甘氨酸甲酯通过缩合、皂化得到式(II)；缩合反应采用的缩合剂为DCC和HOBT、TBTU、EDC和HOBT、HBTU、HCTU、TCTU、HATU或PyBOP，反应溶剂为二氯甲烷、四氢呋喃、甲苯、苯、乙腈、二氧六环或N，N-二甲基甲酰胺，或者以上的混合溶剂如二氯甲烷和N，N-二甲基甲酰胺，所用的有机碱为NMM、TEA或DIPEA，反应温度为-20℃至80℃。其中优选缩合剂为DCC和HOBT，溶剂为二氯甲烷，有机碱为DIPEA，反应温度为20-30℃。皂化反应采用LiOH、NaOH或KOH作为碱，反应溶剂为甲醇、四氢呋喃、丙酮或乙醇与水的混合溶剂。优选LiOH作为碱，溶剂为四氢呋喃与水。b)式(II)与频哪醇保护的氨基硼酸缩合得到式(III)；缩合反应采用EDC和HOBT、TBTU、DCC和HOBT、HBTU、HCTU、TCTU、HATU或PyBOP为脱水缩合剂，采用NMM、TEA或DIPEA作为碱，反应溶剂为二氯甲烷、四氢呋喃、甲苯、苯、乙腈、二氧六环或N，N-二甲基甲酰胺，或者以上混合形成的溶剂，在-20-50℃温度下进行。优选缩合剂为DCC和HOBT，溶剂为二氯甲烷，有机碱为DIPEA，反应温度为-10-30℃。c)式(III)与二乙醇胺络合生成硼酸络合物，经重结晶得到式(IV)；反应溶剂包括乙酸乙酯、甲基叔丁基醚、四氢呋喃、乙腈、乙醇、异丙醇、丙酮，也可采用上述溶剂的混合溶剂。优选溶剂为乙酸乙酯或者乙腈。用于重结晶的溶剂包括乙酸乙酯、甲基叔丁基醚、四氢呋喃、乙腈、乙醇、异丙醇、甲醇、丙酮、水，也可采用上述溶剂的混合溶剂。重结晶降温至-20℃-20℃使产物充分析出。优选重结晶溶剂为乙醇，降温至2-6℃。d)式(IV)经水解后即得到式(V)；所用溶剂为乙酸乙酯/水，采用盐酸使硼酸络合物式(IV)脱除保护基生成式(V)。e)式(V)与柠檬酸络合得到式(I)化合物；反应的溶剂包括乙酸乙酯、乙腈、四氢呋喃、二氯甲烷、丙酮或乙醇，反应温度为10℃-100℃。优选反应溶剂为乙酸乙酯，反应温度为60-80℃。本专利技术提供的方法合成蛋白酶体抑制剂MLN9708，采用2，5-二氯苯甲酸作为起始原料，接肽过程均采用工业上常用的DCC作为缩合剂，关键原料氨基硼酸采用合成简便成本低廉的频哪醇保护的氨基硼酸，将文献中纯化MLN2238的方法直接应用至合成过程当中，避免了异丁基硼酸的使用。简化了操作、降低了成本，提高了产品质量。缩略语EDC：1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺HOBT：1-羟基苯并三唑TBTU：0-苯并三氮唑-N，N，N’，N’-四甲基脲四氟硼酸盐DCC：二环己基碳二亚胺HBTU：苯并三氮唑-N，N，N’，N’-四甲基脲六氟磷酸盐HCTU：6-氯苯并三氮唑-1，1，3，3-四甲基脲六氟磷酸酯TCTU：0-(6-氯苯并三氮唑-1-基)-N，N，N’，N’-四甲基脲四氟硼酸盐HATU：2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N，N，N’，N’-四甲基脲六氟磷酸酯PyBOP：六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷基NMM：N-甲基吗啉NEA：三乙胺DIPEA：N，N-二异丙基乙胺具体实施方式N-(2，5-二氯苯甲酰)甘氨酸(II)向30ml二氯甲烷中依次加入2，5-二氯苯甲酸(1.91g，10mmol)，HOBT(1.49g，11mmol)，DCC(2.47g，12mmol)。反应液搅拌30min后，加入甘氨酸甲酯盐酸盐(1.26g，10mmol)及DIEA(2.09ml，12mmol)。室温反应12h，减压蒸除溶剂，加入50ml乙酸乙酯，抽滤除去不溶物N，N’-二环己基脲(DCU)；滤液依次用5％NaHCO3溶液、饱和食盐水洗；乙酸乙酯层无水硫酸钠干燥，过滤、减压蒸除溶剂得粗品N-(2，5-二氯苯甲酰)甘氨酸甲酯；不经纯化直接投下一步。将粗品N-(2，5-二氯苯甲酰)甘氨酸甲酯溶于THF(10ml)中，滤除少量不溶物DCU；依次向滤液中加入10ml水、、3N氢氧化锂水溶液(5ml)；室温搅拌反应30min，TLC检测(GF254板，乙酸乙酯∶石油醚＝1∶1)已反应完全。减压蒸除THF，滤除不溶物；滤液用盐酸调pH值至2左右，产生大量白色固体，抽滤，所得固体经水重结晶得白色晶体；收率50-80％。Mp.172-174℃。1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.70(s，1H)，8.89(t，J＝6.0Hz，1H)，7.55(d，J＝1.5Hz，2H)，7.48(t，J＝1.5Hz，1H)，3.93(d，J＝5.9Hz，2H).13CNMR(101MHz，DMSO)δ170.76，165.29，137.63，131.60，131.59，130.83，128.97，128.71，41.00.(R)-[N-(2，5-二氯苯甲酰)甘氨酰]亮氨酸硼酸频哪醇酯(III)向30ml二氯甲烷中依次加入II(0.99g，4mmol)、HOBT(0.59g，4.4mmol)及DCC(0，99g，4.8mmol)；搅拌反应40min后加入(R)-3-甲基-1-频哪醇二酯硼基-1-丁基胺盐酸盐(1.0g，4mmol)及DIEA(0.84ml，4.8mmol)，室温反应过夜。减压蒸除二氯甲烷，加入50ml乙酸乙酯，抽滤除去DCU，滤液依次用5％NaHCO3溶液、饱和食盐水洗，有机层无水硫酸钠干燥。过滤，减压蒸除溶剂得黄色泡沫状固体，直接用于下一步。(R)-[N-(2，5-二氯苯甲酰)甘氨酰]亮氨酸硼酸二乙醇胺酯(IV)将上步得到的III溶于20ml乙酸乙酯中，滤除少量不溶物DCU，加入二乙醇胺(0.43ml，4.4mmol)，室温反应12h，产生大量白色固体。抽滤，所得粗品经乙醇重结晶得白色固体，收率40-70％。Mp.217-219℃。1HNMR(40本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种合成MLN9708(I)的方法，其特征在于包括如下步骤：a)以2，5‑二氯苯甲酸为起始原料，与甘氨酸甲酯通过缩合、皂化得到式(II)；b)式(II)与频哪醇保护的氨基硼酸缩合得到式(III)；c)式(III)与二乙醇胺络合生成硼酸络合物，经重结晶得式(IV)；d)式(IV)经水解后即得到式(V)；e)式(V)与柠檬酸络合得到式(I)化合物。

【技术特征摘要】
1.一种合成MLN9708(I)的方法，其特征在于包括如下步骤：a)以2，5-二氯苯甲酸为起始原料，与甘氨酸甲酯通过缩合、皂化得到式(II)；b)式(II)与频哪醇保护的氨基硼酸缩合得到式(III)；c)式(III)与二乙醇胺络合生成硼酸络合物，经重结晶得式(IV)；d)式(IV)经水解后即得到式(V)；e)式(V)与柠檬酸络合得到式(I)化合物。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：a)步缩合反应采用的缩合剂为DCC和HOBT、TBTU、EDC和HOBT、HBTU、HCTU、TCTU、HATU或PyBOP；反应溶剂为二氯甲烷、四氢呋喃、甲苯、苯、乙腈、二氧六环或N，N-二甲基甲酰胺，或者以上的混合溶剂如二氯甲烷和N，N-二甲基甲酰胺；所用的有机碱为NMM、TEA或DIPEA；反应温度为-20-80℃；皂化反应采用LiOH、NaOH或KOH作为碱，反应溶剂为甲醇、四氢呋喃、丙酮或乙醇与水的混合溶剂。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：b)步反应...

【专利技术属性】
技术研发人员：李润涛，葛泽梅，程青，韩利强，王欣，程铁明，
申请(专利权)人：北京大学，
类型：发明
国别省市：北京;11