一种银杏内酯B原料及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种银杏内酯Ｂ原料，其特征在于该银杏内酯Ｂ原料是通过以下方法制备得到的：取银杏叶或银杏叶提取物，在盐酸溶液中浸煮，浸煮液过滤后采用有机溶剂萃取，得到的萃取液浓缩后添加１００～２００目硅胶混合干燥，采用硅胶柱层析法收集富含银杏内酯Ｂ的洗脱液，经结晶得到银杏内酯Ｂ原料；其中，银杏内酯Ｂ原料中银杏内酯Ｂ含量≥９０％。采用该方法制得的银杏内酯Ｂ原料，银杏内酯Ｂ纯度高；制备工艺过程简单、转移率高、成本低、适用工业大生产。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于中药制药领域，具体涉及一种银杏内酯B原料及其制备方法。
技术介绍
银杏内酯是目前强有力的特异性血小板活化因子(PAF)受体阻断剂之一，银杏内脂 B是银杏内酯中对PAF受体阻断作用最强的，可剂量依赖性的消除PAF所引起的血小板聚 集作用，从而防止血栓的形成，而对由二磷酸腺苷、花生四烯酸、胶原和肾上腺素诱导的 血小板聚集无作用。最新药理研究表明银杏内酯B具有抗过敏、抗炎症、抗休克作用，对 缺血损伤及器官移植的排斥反应也有保护作用。银杏内酯B在银杏叶和银杏叶提取物中含量很低，目前市场上出现的银杏类制剂主要 以银杏总内酯和总黄酮为有效部位，尚未出现单体的银杏类制剂，目前银杏内酯B单体的 获取主要通过液相制备，并且转移率很低，难以形成产业化。经文献査阅公开的专利CN101054384A工艺中需要经过两次柱层析，而且最终的转移 率还不到2%,整个工艺的效率和最终的得率低，导致单位重量的银杏内酯B成本比较高。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种成本低、银杏内酯B纯度高、工艺简单且适用于工业产的 银杏内酯B原料。本专利技术的另一目的在于提供该银杏内酯B原料的制备方法。一种银杏内酯B原料，其特征在于该银杏内酯B原料是通过以下方法制备得到的 取银杏叶或银杏叶提取物，在盐酸溶液中浸煮，浸煮液过滤后采用有机溶剂萃取，得到的萃取液浓縮后添加100 200目硅胶混合干燥，以100 200目硅胶作为层析填料，采用硅胶柱层析法收集富含银杏内酯B的洗脱液，经结晶得到银杏内酯B原料；其中，银杏内酯B原料中银杏内酯B含量》90%。上述盐酸溶液的质量浓度为0.1 1%，用量为银杏叶或银杏叶提取物质量的5~50倍(每lkg加入5-50L)，银杏叶或银杏叶提取物在盐酸溶液中浸煮时间30 180min;所述的有机溶剂为乙酸乙酯、丙酮、正丁醇中的一种，用量为浸煮液体积的2 5倍(L/L);硅胶柱层 析时00~200目硅胶的用量与银杏叶或银杏叶提取物的质量比为1: 0.5~1: 10;硅胶柱层 析时使用的流动相为乙酸乙酯、正丁醇、石油醚、环己烷、丙酮中的两种或两种以上混合溶剂。柱层析时流动相的流速控制在每公斤银杏叶或银杏叶提取物18 360ml/min。上述银杏内酯B原料在制备治疗瘀血阻络引起的胸痹、心痛、缺血性脑中风的药物中 应用。一种银杏内酯B原料的制备方法，可按照以下步骤制备 .取银杏叶或银杏叶提取物，在盐酸溶液中浸煮30 180min，浸煮液过滤后采用有机溶 剂萃取，得到的萃取液浓縮后添加100 200目硅胶混合干燥，采用硅胶柱层析法收集富含 银杏内酯B的洗脱液，经结晶得到银杏内酯B原料。其中，所述盐酸溶液的质量浓度为 0.1~1%，用量为原料质量的5 50倍；所述的有机溶剂为乙酸乙酯、丙酮、正丁醇中的一 种，用量为浸煮液体积的2 5倍；所述的100 200目硅胶的用量与原料的质量比为1:0.5 1:10;硅胶柱层析时使用的流动相为乙酸乙酯、正丁醇、石油醚、环己垸、丙酮中的两种或两种以上混合溶剂。柱层析时流动相的流速控制在每公斤银杏叶或银杏叶提取物18~360ml/min。本专利技术的有益效果(1) 本专利技术银杏内酯B原料提取该工艺包括提取、层析、结晶，具有过程简单、成本低、银杏内酯B纯度高、适用工业大生产的特点。(2) 选用盐酸溶液浸煮提取，有效保证有效成分提出；通过使用硅胶柱层析的方法， 有效地将银杏内酯B与其他物质分离，使得银杏内酯B在最终转移率达到15%以上，为工 业化生产节约成本。试验例银杏内酯B原料对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型的影响地点山东大学目的观察银杏内酯B原料对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用，探讨其治疗 缺血性脑病及脑血栓的疗效。方法取健康雄性Wistar大鼠，适应性喂养一周后进行试验。设假手术组、模型组、 银杏内酯B原料低、中、高剂量组和金纳多注射液阳性对照组，共9组。采用改进的Zea Longa，s大脑中动脉内栓线阻断法(MCAO)制备大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型，并于 缺血1.5h后进行再灌注。除银杏内酯B给药组外，其余各组分别于脑缺血即刻尾静脉注射 (iv)相应药物，假手术组和模型组给予相应体积0.9%氯化钠注射液，银杏内酯B原料低、中、高剂量组于缺血实验前0.5h灌胃(ig)给予相应体积药物。金纳多注射液阳性对照组 给药剂量为3 ml kg—'，空白对照组给予等体积0. 9%氯化钠注射液，银杏内酯B原料低、 中、高剂量分别ig给予15、 30和60 mg kg—'银杏内酯B原料。脑缺血1.5h再灌注24 h后，各组动物进行神经病学检査，继而取脑进行TTC染色， 拍照后测定缺血侧脑梗死体积。实验过程中，MCAO手术失败、造模不成功及24h内死 亡的动物均弃之不用，不足预定数额者按照随机抽样原则补齐动物并重新造模。结果见表 1和表2表1银杏内酯B原料对大鼠神经行为学改变的影响(n = 10)<table>table see original document page 5</column></row><table>'尸<0. 05， **尸<0.01，与模型对照组比较；Af<0.05， "<0.01，与金纳多组比较。结果(1)神经行为学的影响大鼠缺血1.5h再灌注24h后，假手术组无明显神经功能缺 损，神经功能学评分均为0。模型组则出现不同程度的神经功能缺损体征，银杏内酯B原 料和金纳多注射液组神经功能缺损症状有明显改善。缺血1.5h再灌注24h后，各用药组 祌经功能评分与模型组相比，银杏内酯B原料中、高剂量组具有显著统计学差异(P0.01)， 金纳多注射液组有明显统计学差异(P<0.05)。(2)脑大体形态学变化大鼠缺血1.5h再灌注24h后，假手术组大鼠大脑外观光洁，颜 色、形态正常，无苍白、水肿、充血等变化，双侧脑组织结构对称；模型组缺血侧大脑半 球明显水肿，体积较对侧明显增大，中线向右侧偏移。缺血侧大脑半球顶叶呈脂肪样苍白 色，脑组织软化易碎，脑膜血管高度充血；各用药组缺血侧大脑半球水肿减轻或明显减轻， 脑膜血管充血减轻，梗死体积较模型组有明显减小。具体实施方式以下通过实施例，对本专利技术作进一步说明，下述实施例对本专利技术没有限制。 实施例1称取银杏叶10kg，加入500Ll。/。的盐酸浸煮30min，过滤，得到浸煮液480L，用2400L 正丁醇萃取，将萃取液浓缩到适量，加入适量100-200目硅胶，混匀烘干，上硅胶柱(径 高比为1: 1，硅胶用量3kg)，以乙酸乙酯丙酮为4: 6的比例配制流动相，控制流速180ml/min，收集含银杏内酯B的40L流出液，浓縮干得到6g干膏，力卩180ml 95%乙醇结 晶，得到2.3g银杏内酯B原料，其中，银杏内酯B含量为91.5%。实施例2称取银杏叶20kg，加入700L0.5。/。的盐酸浸煮150min，过滤，得到滤液650L，用1300L 丙酮萃取，将萃取液浓縮到适量，加入适量100~200目硅胶，混匀烘干，上硅胶柱(径高比为l: 1，硅胶用量5.7kg)，以乙酸乙酯石油醚为7: 3的比例配制流动相，控制流速410ml/min，收集70L流出液，本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种银杏内酯Ｂ原料，其特征在于该银杏内酯Ｂ原料是通过以下方法制备得到的：　　　　取银杏叶或银杏叶提取物，在盐酸溶液中浸煮，浸煮液过滤后采用有机溶剂萃取，得到的萃取液浓缩后添加１００～２００目硅胶混合干燥，采用硅胶柱层析法收集富含银杏内酯Ｂ的洗脱液，经结晶得到银杏内酯Ｂ原料；其中，银杏内酯Ｂ原料中银杏内酯Ｂ含量≥９０％。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：许益清，徐林，张朝波，朱敬，
申请(专利权)人：南京海陵中药制药工艺技术研究有限公司，扬子江药业集团有限公司，扬子江药业集团南京海陵药业有限公司，
类型：发明
国别省市：84[中国|南京]