一种白果内酯、银杏内酯A、银杏内酯B和银杏内酯C的制备方法技术

本发明专利技术提供了一种白果内酯、银杏内酯A、银杏内酯B和银杏内酯C的制备方法，包括：将银杏叶进行处理，得到银杏总内酯粗品；将所述银杏总内酯粗品和硅胶混合，得到样品硅胶；将样品硅胶在真空液相色谱分离装置中进行梯度洗脱，所述梯度洗脱过程中弱极性溶剂A和强极性溶剂B的洗脱比例为(8.2～7.8)：(1.8～2.2)，得到白果内酯；洗脱比例为(7.2～6.8)：(3.2～2.8)，得到银杏内酯C；洗脱比例为(6.2～5.8)：(4.2～3.8)，得到银杏内酯A；洗脱比例为1：(0.5～1.5)，得到银杏内酯B。本发明专利技术提供的方法制备得到的白果内酯、银杏内酯A、银杏内酯B和银杏内酯C的收率和纯度均较高。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及银杏
，尤其涉及一种白果内酯、银杏内酯A、银杏内酯B和银杏内酯C的制备方法。
技术介绍
银杏内酯(英文名：ginkgolide)化合物属于萜类化合物，由倍半萜内酯和二萜内酯组成，是银杏叶中一类重要的活性成分。白果内酯(bilobalide；BB)属倍半萜内酯，是目前从银杏叶中发现的唯一的一个倍半萜内酯化合物。银杏内酯A(ginkgolideA；GA)、银杏内酯B(ginkgolideB；GB)、银杏内酯C(ginkgolideC；GC)、银杏内脂M(ginkgolideM；GM)、银杏内脂J(ginkgolideJ；GJ)为二萜类化合物，其差别在于含有的羟基数目和羟基连接的位置不同。银杏内酯分子具有独特的十二碳骨架结构，嵌有一个叔丁基和六个五元环，包括一个螺壬烷、一个四氢呋喃环和三个内酯环。银杏内酯对血小板活化因子(PAF)受体有强大的特异性抑制作用，其中银杏内酯的抗PAF活性最高。PAF是血小板多种炎症组织分泌产生的一种内源性磷脂，是迄今发现的最有效的血小板聚集诱导剂，它与许多疾病的产生、发展密切相关。而银杏内酯目前被认为是最有临床应用前景的天然PAF受体拮抗剂。申请号为201310624971.9的中国专利公开了一种银杏内酯A与银杏内酯B的精制方法，包括：取银杏叶提取物浸膏1000g，用水溶液稀释至0.5g生药/mL，加入1000mL乙酸乙酯进行萃取，共萃取3次，合并乙酸乙酯萃取液，>于45℃减压浓缩至无溶剂，加入10％的乙醇使浓缩液浓度为0.5g/mL，湿法装柱，使药液通过MCI树脂，先用30％的乙醇洗脱树脂除杂，以除去水溶性和大极性杂质，共洗脱3BV，洗脱速度为1BV/h，再用40％的乙醇以同样的流速洗脱树脂，分别收集前2BV洗脱液和后2BV洗脱液，分别于45℃减压浓缩至1g/mL浸膏，加入500mL80％乙醇，70℃加热至溶解，4℃冰箱静置24小时析晶，析出晶体后抽滤，分别得到银杏内酯A和银杏内酯B的粗品，将得到的银杏内酯A和银杏内酯B的粗品分别同50mL80％的乙醇重结晶1次，温度4℃，静置时间24h。析出晶体，抽滤，母液合并，结晶分别于80℃烘干，得到银杏内酯A0.76g、银杏内酯B1.07g，银杏内酯A的纯度为95.6％，银杏内酯B的纯度为96.2％。现有技术提供的这种银杏内酯A和银杏内酯B的精制方法虽然工艺简单、损失较少，能够同时分离纯化银杏内酯A和银杏内酯B，但是这种方法制备银杏内酯A和银杏内酯B的纯度和收率较低。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术的目的在于提供一种白果内酯、银杏内酯A、银杏内酯B和银杏内酯C的制备方法，本专利技术提供的方法制备白果内酯、银杏内酯A、银杏内酯B和银杏内酯C的纯度和收率均较高。本专利技术提供了一种白果内酯、银杏内酯A、银杏内酯B和银杏内酯C的制备方法，包括：将银杏叶采用醇类化合物回流提取后经过滤过、浓缩、分散、再次滤过，得到滤液；将所述滤液萃取后依次进浓缩和干燥，得到银杏总内酯粗品；将所述银杏总内酯粗品在溶剂中和硅胶混合后粉碎，得到样品硅胶；将所述样品硅胶在真空液相色谱分离装置中进行梯度洗脱，按照所述梯度洗脱过程中的洗脱液包括弱极性溶剂A和强极性溶剂B，所述弱极性溶剂A和强极性溶剂B的洗脱比例为(8.2～7.8)：(1.8～2.2)，得到白果内酯；所述弱极性溶剂A和强极性溶剂B的洗脱比例为(7.2～6.8)：(3.2～2.8)，得到银杏内酯C；所述弱极性溶剂A和强极性溶剂B的洗脱比例为(6.2～5.8)：(4.2～3.8)，得到银杏内酯A；所述弱极性溶剂A和强极性溶剂B的洗脱比例为1：(0.5～1.5)，得到银杏内酯B；所述弱极性溶剂A包括石油醚或环己烷；所述强极性溶剂B包括乙酸乙酯或丙酮。优选的，所述醇类化合物为碳原子数为1～5的醇类化合物。优选的，所述醇类化合物为甲醇或乙醇。优选的，所述萃取的试剂为乙酸乙酯。优选的，所述溶剂包括甲醇、乙醇、丙酮或乙酸乙酯。优选的，所述硅胶的粒度为80目～100目。优选的，所述银杏总内酯粗品和硅胶的质量比为1：(0.8～1.2)。优选的，所述弱极性溶剂A和强极性溶剂B的洗脱比例为8：2，得到白果内酯；所述弱极性溶剂A和强极性溶剂B的洗脱比例为7：3，得到银杏内酯C；所述弱极性溶剂A和强极性溶剂B的洗脱比例为6：4，得到银杏内酯A；所述弱极性溶剂A和强极性溶剂B的洗脱比例为1：1，得到银杏内酯B。优选的，所述洗脱液为石油醚和乙酸乙酯。优选的，所述梯度洗脱过程中洗脱液的用量为6BV～10BV。本专利技术提供的方法通过对银杏叶进行合适的处理，制备样品硅胶，采用真空液相色谱分离装置同时控制梯度洗脱的工艺条件制备银杏内酯，这种方法制备得到的白果内酯、银杏内酯A、银杏内酯B和银杏内酯C的收率和纯度均较高。此外，本专利技术提供的方法能够同时制备得到白果内酯、银杏内酯A、银杏内酯B和银杏内酯C，制备过程简单、快速、制备量大。附图说明为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据提供的附图获得其他的附图。图1为本专利技术实施例提供的制备白果内酯、银杏内酯A、银杏内酯B和银杏内酯C方法的流程图；图2为本专利技术实施例1制备得到的银杏总内酯粗品的蒸发光散射检测图；图3为银杏内酯混合对照品的蒸发光散射检测图；图4为本专利技术实施例1制备得到的白果内酯的蒸发光散射检测图；图5为本专利技术实施例1制备得到的银杏内酯A的蒸发光散射检测图；图6为本专利技术实施例1制备得到的银杏内酯B的蒸发光散射检测图；图7为本专利技术实施例1制备得到的银杏内酯C的蒸发光散射检测图。具体实施方式下面将对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。本专利技术提供了一种白果内酯、银杏内酯A、银杏内酯B和银杏内酯C的制备方法，包括：将银杏叶采用醇类化合物回流提取后经过滤过、浓缩、分散、再次滤过，得到滤液；将所述滤液萃取后依次进浓缩和干燥，得到银杏总内酯粗品；将所述银杏总内酯粗品在溶剂中和硅本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种白果内酯、银杏内酯A、银杏内酯B和银杏内酯C的制备方法，包括：将银杏叶采用醇类化合物回流提取后经过滤过、浓缩、分散、再次滤过，得到滤液；将所述滤液萃取后依次进浓缩和干燥，得到银杏总内酯粗品；将所述银杏总内酯粗品在溶剂中和硅胶混合后粉碎，得到样品硅胶；将所述样品硅胶在真空液相色谱分离装置中进行梯度洗脱，所述梯度洗脱过程中的洗脱液包括弱极性溶剂A和强极性溶剂B，所述弱极性溶剂A和强极性溶剂B的洗脱比例为(8.2～7.8)：(1.8～2.2)，得到白果内酯；所述弱极性溶剂A和强极性溶剂B的洗脱比例为(7.2～6.8)：(3.2～2.8)，得到银杏内酯C；所述弱极性溶剂A和强极性溶剂B的洗脱比例为(6.2～5.8)：(4.2～3.8)，得到银杏内酯A；所述弱极性溶剂A和强极性溶剂B的洗脱比例为1：(0.5～1.5)，得到银杏内酯B；所述弱极性溶剂A包括石油醚或环己烷；所述强极性溶剂B包括乙酸乙酯或丙酮。

【技术特征摘要】
1.一种白果内酯、银杏内酯A、银杏内酯B和银杏内酯C的制备方法，
包括：
将银杏叶采用醇类化合物回流提取后经过滤过、浓缩、分散、再次滤过，
得到滤液；
将所述滤液萃取后依次进浓缩和干燥，得到银杏总内酯粗品；
将所述银杏总内酯粗品在溶剂中和硅胶混合后粉碎，得到样品硅胶；
将所述样品硅胶在真空液相色谱分离装置中进行梯度洗脱，所述梯度洗
脱过程中的洗脱液包括弱极性溶剂A和强极性溶剂B，所述弱极性溶剂A和
强极性溶剂B的洗脱比例为(8.2～7.8)：(1.8～2.2)，得到白果内酯；所述
弱极性溶剂A和强极性溶剂B的洗脱比例为(7.2～6.8)：(3.2～2.8)，得到
银杏内酯C；所述弱极性溶剂A和强极性溶剂B的洗脱比例为(6.2～5.8)：
(4.2～3.8)，得到银杏内酯A；所述弱极性溶剂A和强极性溶剂B的洗脱比
例为1：(0.5～1.5)，得到银杏内酯B；
所述弱极性溶剂A包括石油醚或环己烷；
所述强极性溶剂B包括乙酸乙酯或丙酮。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述醇类化合物为碳原子
数为1～5的醇类化合物...

【专利技术属性】
技术研发人员：萧伟，倪付勇，刘露，赵祎武，宋亚玲，温建辉，谢雪，黄文哲，王振中，
申请(专利权)人：江苏康缘药业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32