克罗烷型二萜类化合物及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种克罗烷型二萜类化合物及其制备方法和应用，该克罗烷型二萜类化合物的制备方法如下：将海南暗罗组织经过阴干、粉碎后，用提取溶液回流提取，减压浓缩后得浸膏；浸膏中加入蒸馏水悬浮后，依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯萃取；将乙酸乙酯部位先经硅胶柱层析，然后经石油醚-丙酮体系梯度洗脱，合并相同流份，得到丙酮洗脱部分组分1和组分2；组分1经薄层层析色谱分离得到化合物A，组分2依次经柱层析分离和高效液相色谱分离得到化合物B。本发明专利技术的克罗烷型二萜类化合物对肿瘤细胞，尤其是Hela（宫颈癌细胞）、MCF-7（人乳腺癌细胞）和A549（人肺癌细胞）具有增殖抑制作用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物化学医药
，具体涉及一种克罗烷型二萜类化合物及其制备方法和应用。
技术介绍
海南暗罗（PolyalthialauiMerr.）为番荔枝科（Annonaceae）暗罗属（Polyalthia）植物，常为直立灌木。据中国植物志记载，该属植物全世界约有200种，分布于马来西亚、菲律宾、印度、斯里兰卡等亚热带地区，我国分布于云南、广东、广西南部及海南。我国有17种，海南有7种，分别为：细基丸（P.cerasoides），沙煲暗罗（P.consanguinea），海南暗罗（P.laui），陵水暗罗（P.nemoralis），斜脉暗罗（P.plagioneura），香花暗罗（P.rumphii）和暗罗（P.suberosa）。其中，海南暗罗和沙煲暗罗为海南特有种。克罗烷型二萜类化合物最早是在1988年由PhadnisA.P.等从P.longifolia中分离得到，化学名称为16-hydroxycleroda-3,13(14)E-dien-15-oicacid；1990年KijjoaA.等从P.viridis中分离得到了5个克罗烷型二萜类化合物16(R)-3,13Z-kolavadien-15,16-olide、Methyl-2E,6E-farnesoate-3,13E-kolavadien-15-oicacid、16(R&S)-3,13Z-kolavadien-15,16olide-2-one、14,15-bisnor-3,11E-kolavadien-13-one、(4→2)-abeo-16(R&S)-2,13Z-kolavadien-15,16-olide-3-ol；1992年ChakrabortyM.等从P.longifolia中分离得到了2个克罗烷型二萜类化合物16α-hydroxylcleroda-3,13Z-dien-16,15-olide和4β,16α-dehydroxycleroda-13(14)Z-dien-15,16-olide；1994年HasanC.等从P.longifolia中分离得到了3个克罗烷型二萜类化合物16-oxocleroda-3,13(14)E-dien-15-oicacid、Kolavenicacid和16β-hydroxycleroda-3,13(14)Z-dien-15,16-olide。
技术实现思路
本专利技术的目的在于解决上述问题，提供一种新的具有抗肿瘤活性的克罗烷型二萜类化合物及其制备方法和应用。实现本专利技术上述目的的技术方案之一是：一种克罗烷型二萜类化合物，其结构如式A所示：（A）。实现本专利技术上述目的的技术方案之二是：一种克罗烷型二萜类化合物，其结构如式B所示：（B）。上述克罗烷型二萜类化合物A的制备方法包括以下步骤：①将海南暗罗组织经过阴干、粉碎后，用提取溶液回流提取，减压浓缩后得浸膏；浸膏中加入蒸馏水悬浮后，依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯萃取；②将乙酸乙酯部位先经硅胶柱层析，然后经石油醚-丙酮体系梯度洗脱，合并相同流份，得到丙酮洗脱部分组分1和组分2；③对组分1进行薄层层析色谱分离，得到克罗烷型二萜类化合物A。上述克罗烷型二萜类化合物B的制备方法包括以下步骤：①将海南暗罗组织经过阴干、粉碎后，用提取溶液回流提取，减压浓缩后得浸膏；浸膏中加入蒸馏水悬浮后，依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯萃取；②将乙酸乙酯部位先经硅胶柱层析，然后经石油醚-丙酮体系梯度洗脱，合并相同流份，得到丙酮洗脱部分组分1和组分2；③对组分2依次进行柱层析分离和高效液相色谱分离，得到克罗烷型二萜类化合物B。其中，海南暗罗组织具体为海南暗罗的根或茎。上述步骤①中所述的提取溶液为体积分数为75%的乙醇水溶液；上述步骤①中所述浸膏与所述蒸馏水的体积比为1∶1。上述制备化合物A的步骤③中的薄层层析色谱分离采用的展开剂为乙酸乙酯-石油醚混合溶剂，其中乙酸乙酯的体积百分数为10%～30%，优选为25%。上述制备化合物B的步骤③中的高效液相色谱分离采用的流动相为46%H2O和54%MeCN。上述化合物A和化合物B在增殖抑制肿瘤细胞上的应用。上述肿瘤细胞包括Hela（宫颈癌细胞）、MCF-7（人乳腺癌细胞）和A549（人肺癌细胞）。本专利技术具有的积极效果：（1）本专利技术的克罗烷型二萜类化合物对肿瘤细胞，尤其是Hela（宫颈癌细胞）、MCF-7（人乳腺癌细胞）和A549（人肺癌细胞）具有增殖抑制作用。（2）本专利技术的克罗烷型二萜类化合物制备工艺简单、成本低廉。附图说明图1为化合物A的1H-1HCOSY（━）相关和主要的HMBC（→）相关。图2为化合物A的NOESY谱图。图3为化合物B的1H-1HCOSY（━）相关和主要的HMBC（→）相关。图4为化合物B的NOESY谱图。具体实施方式（实施例1）本实施例为化合物A和化合物B的制备方法，包括以下步骤：①取海南暗罗根或茎，阴干、粉碎后，用8倍重量的体积分数为75%的乙醇水溶液回流提取3次，每次6天，过滤、合并提取液，减压浓缩得到浸膏；向浸膏中加入蒸馏水（体积比为1∶1），悬浮后依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯萃取。②将乙酸乙酯部位先经硅胶柱层析，然后经石油醚-丙酮体系梯度洗脱，合并相同流份，得到丙酮洗脱部分组分1和组分2。③对组分1进行薄层层析色谱分离，展开剂为石油醚-乙酸乙酯混合溶剂（V∶V＝3∶1），得到化合物A（12.5mg）。对组分2先进行柱层析分离，然后进行高效液相色谱分离，流动相为46%H2O和54%MeCN，得到化合物B（4.6mg）。化合物A为无色针状晶体，易溶于氯仿、乙酸乙酯，254nm紫外灯下呈黑色暗斑。化合物B为淡黄色油状液体，易溶于氯仿、乙酸乙酯，254nm紫外灯下呈黑色暗斑。化合物A的结构式如下：。化合物A的核磁数据见表1，化合物A的1H-1HCOSY（━）相关和主要的HMBC（→）相关见图1和表1，化合物A的NOESY谱图见图2。根据高分辨质谱数据（m/z=424.3221[M+H]+），推出化合物A的分子式为C28H41NO2，不饱和度为9。表1NO.δCδH（JinHz）multHMBC1H-1HCOSY118.41.51mCH22,102,10227.01.97mCH2--1,33120.55.20br,sCH--2,44144.7--C--3,18538.3--C----636.91.73mCH2--7727.61.18mCH2--6,8836.41.48mCH--7,9,17938.8--C--81046.61.32mCH--11136.51.48mCH2--121234.72.03mCH2--11,1313157.8--C--12,14,1614117.85.66sCH13,151315165.1--C----1619.02.20sCH312本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种克罗烷型二萜类化合物，其结构如式A所示：（A）。

【技术特征摘要】
1.一种克罗烷型二萜类化合物，其结构如式A所示：
（A）。
2.权利要求1所述的克罗烷型二萜类化合物的制备方法，其特征在于包括以下步骤：
①将海南暗罗组织经过阴干、粉碎后，用提取溶液回流提取，减压浓缩后得浸膏；浸膏中加入蒸馏水悬浮后，依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯萃取；
②将乙酸乙酯部位先经硅胶柱层析，然后经石油醚-丙酮体系梯度洗脱，合并相同流份，得到丙酮洗脱部分组分1和组分2；
③对组分1进行薄层层析色谱分离，得到克罗烷型二萜类化合物A。
3.根据权利要求2所述的克罗烷型二萜类化合物的制备方法，其特征在于：上述步骤①中所述的提取溶液为体积分数为75%的乙醇水溶液；上述步骤①中所述浸膏与所述蒸馏水的体积比为1∶1；上述步骤③中的薄层层析色谱分离采用的展开剂为乙酸乙酯-石油醚混合溶剂，其中乙酸乙酯的体积百分数为10%～30%。
4.权利要求1所述的克罗烷型二萜类化合物在制备抗肿瘤药物上的应用。
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于：所述肿瘤包括宫颈癌、人乳腺癌和人肺癌。<...

【专利技术属性】
技术研发人员：宋小平，余章昕，陈光英，韩长日，邵泰明，吴梨君，李小宝，
申请(专利权)人：海南师范大学，海南科技职业学院，
类型：发明
国别省市：海南;46