一种高度氧化的二萜化合物及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种高度氧化的二萜化合物及其制备方法和医药用途。该化合物为首次报道，是一种结构新颖的二萜化合物，可以从泽漆的干燥全草中提取、分离纯化得到。本研究证实该化合物能使过氧化氢损伤后心肌细胞存活率明显增加，LDH活性明显降低，可以用来开发成心肌保护的药物。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于药物
，具体涉及从泽漆的干燥全草中分离得到的一种具有心肌保护作用的二萜化合物及其制备方法。
技术介绍
泽漆是大戟属(EuphorbiaL.)植物泽漆EuphorbiahelioscopiaL.的干燥全草，别名猫儿眼睛草、五凤灵芝等，分布于除新疆、西藏以外的全国各地。长期以来泽漆一直作为民间草药，味苦，性微寒，有毒，归肺、小肠、大肠经。据《本草纲目》记载，泽漆有利水消肿、消痰退热、散结杀虫等功效。临床用于治疗腹水、水肿、肺结核、颈淋巴结核、痰多喘咳、癣疮。泽漆主要含二萜酯类、黄酮类化合物，是其主要的生物活性物质，另外还含有三萜、甾醇、多酚类、氨基酸、天然油脂类化合物等多种成分。二萜酯类化合物是泽漆的主要有效成分，主要分布于泽漆的乳汁中，根部也有分布。二萜酯类化合物对皮肤有刺激性，有辅助抗癌的作用。现代药理研究表明泽漆具有抗肿瘤、抑菌、平喘止咳，抑制蘑菇酪氨酸酶活性等生理活性。民间还用于治疗宫颈癌、食道癌等，并具有一定疗效，因此泽漆是一味很有研究开发价值的药材。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种从泽漆的干燥全草中分离得到的一种具有心肌保护作用的二萜化合物及其制备方法。本专利技术的上述目的是通过下面的技术方案得以实现的：具有下述结构式的化合物(Ⅰ)，所述的化合物(Ⅰ)的制备方法，包含以下操作步骤：(a)将泽漆的干燥全草粉碎，用80～90％乙醇热回流提取，合并提取液，浓缩至无醇味，依次用石油醚、乙酸乙酯和水饱和的正丁醇萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；(b)步骤(a)中乙酸乙酯萃取物用大孔树脂除杂，先用10％乙醇洗脱6个柱体积，再用80％乙醇洗脱8个柱体积，收集80％乙醇洗脱液，减压浓缩得80％乙醇洗脱物浸膏；(c)步骤(b)中80％乙醇洗脱浸膏用正相硅胶分离，依次用体积比为80:1、50:1、35:1、15:1和1:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到5个组分；(d)步骤(c)中组分4用正相硅胶进一步分离，依次用体积比为25:1、15:1和5:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到3个组分；(e)步骤(d)中组分2用十八烷基硅烷键合的反相硅胶分离，用体积百分浓度为75％的甲醇水溶液等度洗脱，收集8～10个柱体积洗脱液，洗脱液减压浓缩得到纯的化合物(Ⅰ)。进一步地，所述大孔树脂为AB-8型大孔吸附树脂。进一步地，所述用乙醇热回流提取采用的乙醇浓度为85％。一种药物组合物，其中含有治疗有效量的所述的化合物(Ⅰ)和药学上可接受的载体。该药物组合物含有治疗有效量的本专利技术化合物(Ⅰ)，其余为药物学上可接受的、对人和动物无毒和惰性的可药用载体和/或赋形剂。所述的可药用载体或赋形剂是一种或多种选自固体、半固体和液体稀释剂、填料以及药物制品辅剂。将本专利技术的药物组合物以单位体重服用量的形式使用。本专利技术药物可通过口服或注射的形式施用于需要治疗的患者。用于口服时，可将其制成片剂、缓释片、控释片、胶囊、滴丸、微丸、混悬剂、乳剂、散剂或颗粒剂、口服液等；用于注射时，可制成灭菌的水性或油性溶液、无菌粉针、脂质体或乳剂等。本专利技术化合物用作药物时，可以直接使用，或者以药物组合物的形式使用。实验表明：化合物(Ⅰ)各给药组均能使心肌细胞存活率明显增加；在心肌细胞过氧化氢损伤培养液中LDH的活性试验中，化合物(Ⅰ)低、中、高剂量组、阳性药物组的LDH活性明显降低，表明化合物(Ⅰ)可以进一步研究开发成心肌细胞保护的药物。附图说明图1为化合物(Ⅰ)结构式；图2为化合物(Ⅰ)理论ECD值与实验ECD值比较。具体实施方式下面结合实施例进一步说明本专利技术的实质性内容，但并不以此限定本专利技术保护范围。尽管参照较佳实施例对本专利技术作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本专利技术的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本专利技术技术方案的实质和范围。实施例1：化合物(Ⅰ)分离制备及结构确证试剂来源：乙醇、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、二氯甲烷为分析纯，购自上海凌峰化学试剂有限公司，甲醇，分析纯，购自江苏汉邦化学试剂有限公司。制备方法：(a)将泽漆的干燥全草(8kg)粉碎，用85％乙醇热回流提取(25L×3次)，合并提取液，浓缩至无醇味(3L)，依次用石油醚(3L×3次)、乙酸乙酯(3L×3次)和水饱和的正丁醇(3L×3次)萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物(359g)和正丁醇萃取物；(b)步骤(a)中乙酸乙酯萃取物用AB-8型大孔树脂除杂，先用10％乙醇洗脱6个柱体积，再用80％乙醇洗脱8个柱体积，收集80％乙醇洗脱液，减压浓缩得80％乙醇洗脱物浸膏(138g)；(c)步骤(b)中80％乙醇洗脱浸膏用正相硅胶分离，依次用体积比为80:1(8个柱体积)、50:1(8个柱体积)、35:1(6个柱体积)、15:1(8个柱体积)和1:1(5个柱体积)的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到5个组分；(d)步骤(c)中组分4(32g)用正相硅胶进一步分离，依次用体积比为25:1(8个柱体积)、15:1(10个柱体积)和5:1(6个柱体积)的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到3个组分；(e)步骤(d)中组分2(17g)用十八烷基硅烷键合的反相硅胶分离，用体积百分浓度为75％的甲醇水溶液等度洗脱，收集8-10个柱体积洗脱液，洗脱液减压浓缩得到纯的化合物(Ⅰ)(29mg)。结构确证：HR-ESIMS显示[M+Na]+为m/z369.1708，结合核磁特征可得分子式为C20H26O5，不饱和度为8。核磁共振氢谱数据δH(ppm，DMSO-d6，600MHz)：H-2(3.57，m)，H-2(3.42，m)，H-5(1.99，dd，J＝3.1，14.6)，H-6(2.51，dd，J＝3.1，14.6)，H-6(2.39，m)，H-11(2.32，m)，H-11(2.67，m)，H-12(1.57，m)，H-12(1.49，m)，H-14(4.24，s)，H-15(4.18，t，J＝7.8)，H-16(4.10，t，J＝7.8)，H-16(3.56，t，J＝7.8)，H-17(0.93，s)，H-18(0.97，s)，H-19(1.01，s)，H-20(1.21，s)；核磁共振碳谱数据δC(ppm，DMSO-d6，150MHz)：206.4(C，1-C)，52.2(CH2，2-C)，201.1(C，3-C)，44.7(C，4-C)，42.6(CH，5-C)，34.0(CH2，6-C)，198.8(C，7-C)，128.9(C，8-C)，168.3(C，9-C)，44.5(C，10-C)本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种高度氧化的二萜化合物，具有下述结构式的化合物(Ⅰ)，其特征在于：

【技术特征摘要】
1.一种高度氧化的二萜化合物，具有下述结构式的化合物(Ⅰ)，其特征在于：
2.权利要求1所述的二萜化合物的制备方法，其特征在于：包含以下操作步骤：
a、将泽漆的干燥全草粉碎，用80～90％乙醇热回流提取，合并提取液，浓缩至无醇味，
依次用石油醚、乙酸乙酯和水饱和的正丁醇萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物
和正丁醇萃取物；
b、步骤a中乙酸乙酯萃取物用大孔树脂除杂，先用10％乙醇洗脱6个柱体积，再用80％
乙醇洗脱8个柱体积，收集80％乙醇洗脱液，减压浓缩得80％乙醇洗脱物浸膏；
c、步骤b中80％乙醇洗脱浸膏用正相硅胶分离，依次用体积比为80:1、50:1、35:1、15:1
和1:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到...

【专利技术属性】
技术研发人员：王赛波，
申请(专利权)人：温州统益生物医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江;33