本发明专利技术提供一种尿液内源性α胰蛋白酶抑制剂重链H4(Inter-alpha-trypsin inhibitor heavy chain H4，ITIH4)蛋白的应用，具体为尿液内源性α胰蛋白酶抑制剂重链H4在制备用于诊断或检测2型糖尿病合并冠心病的制剂中的应用。本发明专利技术通过研究证实与正常对照和单纯2型糖尿病组相比，内源性α胰蛋白酶抑制剂重链H4在2型糖尿病合并冠心病组患者的尿液中特异表达下调，从而能够用于2型糖尿病合并冠心病的诊治。本发明专利技术发挥尿液标本获取无创、可大规模重复取样、保存方便的优势，利用随机尿标本检测内源性α胰蛋白酶抑制剂重链H4。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及尿液内源性a胰蛋白酶抑制剂重链H4的新用途，具体涉及尿液内源 性a胰蛋白酶抑制剂重链H4在2型糖尿病合并冠心病诊治中的应用。
技术介绍
2型糖尿病（diabetesmellitustype2)是全球重要的公共卫生问题之一，近二十 年来，随着中国经济的发展，人们的生活方式发生了显著的改变，2型糖尿病的患病人数呈 急剧增加趋势。由于中国人口老龄化的趋势，60岁以上的2型糖尿病患者已接近50%，并 以每年0. 1 %的速度递增。2型糖尿病已成为威胁中国居民生命和健康的重要疾病之一，是 亟待解决的重大公共卫生问题。 2型糖尿病主要是由于胰岛素分泌和（或）作用缺陷引起的慢性血糖增高，涉及全 身性的糖类、脂类和蛋白质代谢紊乱。由于血糖浓度容易受多种因素（例如兴奋、劳累、感 冒、发烧和感染）的影响而产生波动，所以2型糖尿病患者需要不断的监测血糖变化，以相 应的调整药物剂量。血糖控制不佳以及脂肪、蛋白质代谢紊乱可导致眼、肾、心脏、血管等组 织器官及神经系统的慢性进行性病变、功能减退及衰竭。据统计，在全球的死亡率里，2型糖 尿病占了大约5. 2%，而死于合并心脏病的又占了其中的68%。因此需要对2型糖尿病合 并冠心病的高危人群进行早期筛查和早期诊断，以便进行早期治疗，提高患者的生存质量。 ITI(Inter-alpha-trypsin inhibitor,内源性a胰蛋白酶抑制剂）是存在于 人类血清中的胰蛋白酶抑制因子，通过对肝mRNAs和序列克隆测定，发现ITI包括有重链 和轻链多肽，分别被不同的基因编码。至今为止，ITI包括ITIH1，ITIH2,ITIH3,ITIH4和 ITIH5,以及轻链bikunin。ITIH4 (Inter-alpha-trypsininhibitorheavychainH4,内源 性a胰蛋白酶抑制剂重链H4)是一种血浆糖蛋白，主要在肝中表达，在胰腺组织中也有表 达。ITIH4对血浆激肽释放酶非常敏感，被认为是血浆激肽释放酶作用的底物。ITIH4有不 同的生物学功能，现在普遍认为ITIH4主要与炎症和癌症有关。ITIH4在血中可以被激肽释 放酶降解为35kDa(coo-末端）和85kDa(N-末端），后者还可以降解为57kDa的片段以及推 测的28kDa的片段。体内ITIH4的具体生物学功能还不清楚。有研究显示血中ITIH4的片 段与前列腺癌、膀胱癌、乳腺癌、卵巢癌以及黑色素瘤和胰腺癌等有关，目前尚无关于ITIH4 与糖尿病及其并发症或合并症的相关报道。 为了 了解疾病进展，及时治疗并发症，2型糖尿病患者需要监测血糖控制病情。在 现有的临床检查中，采集末梢血或静脉血作为血糖监测的最佳标本，但血液标本的获取有 仓|J，乳糜血或溶血会影响血糖检测的准确性，并且频繁采血会对患者造成心理负担，尤其是 老年人和肥胖人群。因此，如果能建立一种对2型糖尿病患者进行筛查、监测的无创性检查 方法，对2型糖尿病及其并发症或合并症的早期筛查、诊断、预防及治疗均具有极其重要的 意义。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种尿液内源性a胰蛋白酶抑制剂重链 H4(Inter-alpha_trypsininhibitorheavychainH4，ITIH4)在制备用于诊断或检测 2 型 糖尿病合并冠心病的制剂中的应用。 优选地，所述尿液内源性a胰蛋白酶抑制剂重链H4的氨基酸序列如SEQID NO:1 所示（MKPPRPVRTCSKVLVLLSLLAIHQTTTAEKNGIMYSLTVDSRVSSRFAHTVVTSRVVNR ANTVQEATFQMELPKKAFITNFSMIIDGMTYPGIIKEKAEAQAQYSAAVAKGKSAGLVKATGRNMEQFQV SVSVAPNAKITFELVYEELLKRRLGVYELLLKVRPQQLVKHLQMDIHIFEPQGISFLETESTFMTNQLVD ALTTWQNKTKAHIRFKPTLSQQQKSPEQQETVLDGNLIIRYDVDRAISGGSIQIENGYFVHYFAPEGLTT MPKNVVFVIDKSGSMSGRKIQQTREALIKILDDLSPRDQFNLIVFSTEATQWRPSLVPASAENVNKARSF AAGIQALGGTNINDAMLMAVQLLDSSNQEERLPEGSVSLIILLTD⑶PTVGETNPRSIQNNVREAVSGRY SLFCLGFGFDVSYAFLEKLALDNGGLARRIHEDSDSALQLQDFYQEVANPLLTAVTFEYPSNAVEEVTQN NFRLLFKGSEMVVAGKLQDRGPDVLTATVSGKLPTQNITFQTESSVAEQEAEFQSPKYIFHNFMERLWAY LTIQQLLEQTVSASDADQQALRNQALNLSLAYSFVTPLTSMVVTKPDDQEQSQVAEKPMEGESRNRNVHS GSTFFKYYLQGAKIPKPEASFSPRRGWNRQAGAAGSRMNFRPGVLSSRQLGLPGPPDVPDHAAYHPFRRL AILPASAPPATSNPDPAVSRVMNMKIEETTMTTQTPAPIQAPSAILPLPGQSVERLCVDPRHRQGPVNLL SDPEQGVEVTGQYEREKAGFSWIEVTFKNPLVWVHASPEHVVVTRNRRSSAYKWKETLFSVMPGLKMTMD KTGLLLLSDPDKVTIGLLFffDGRGEGLRLLLRDTDRFSSHVGGTLGQFYQEVLWGSPAASDDGRRTLRVQ GNDHSATRERRLDYQEGPPGVEISCWSVEL)。 优选地，所述制剂为2型糖尿病合并冠心病患者尿液内源性a胰蛋白酶抑制剂重 链H4检测试剂盒。所述试剂盒包括盒体以及设置在盒体内的酶标板和试剂。 优选地，所述酶标板由外框支撑架及放置其上的可拆的12条酶标反应微孔条组 成，每个可拆装酶标反应微孔条有8个反应孔。 优选地，每个反应孔预包被羊抗人ITIH4多克隆抗体。 优选地，所述试剂为ITIH4标准品溶液、酶标二抗、抗体浓缩液、显色液A、显色液 B、终止液和浓缩洗涤液。 优选地，所述试剂盒还包括盖板膜、放置试剂的下凹瓶位以及自封袋。 优选地，所述下凹瓶位共13个，由塑料泡沫制成。 优选地，所述酶标板由聚苯乙烯制成。 专利技术人首先收集了 2型糖尿病合并冠心病、无并发症及合并症的2型糖尿病患者 和正常对照的随机尿液标本，离心后取上清，利用弱阳离子交换磁珠纯化和分离尿液标本。 将1ill标本与10ill基质（〇. 3 %的a-氰基-4-羟基肉桂酸，HCCA)混匀后，取1ill点 在Anchorchip(AutoflexMALDITOF，Bruker_Dalton)祀板上，标本离子化后进行质谱分 析，采集l〇〇〇-l〇〇〇〇Da范围内的数据，获得由不同质荷比的蛋白峰构成的质谱多肽图。应 用ClinProTools2. 1分析软件对2型糖尿病合并冠心病组、无并发症及合并症的2型糖 尿病组和正常对照组的所有质谱图进行分析，筛选差异性多肽。然后专利技术人对具有统计 学意义的差异性多肽进行基质辅助激光解吸本文档来自技高网...
【技术保护点】
尿液内源性α胰蛋白酶抑制剂重链H4在制备用于诊断或检测2型糖尿病合并冠心病的制剂中的应用。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：张曼，付广真，雷婷，
申请(专利权)人：张曼，
类型：发明
国别省市：北京;11
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