【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】一种高特异性的叶酸完全抗原合成方法及其应用,属于生物化工
。本专利技术是在载体蛋白溶液中加入6-氨基己酸与水溶性碳二亚胺后室温下反应,透析后得到修饰了连接臂的载体蛋白B。叶酸(N-{4-苯甲酰基}-L-谷氨酸)溶解于二甲亚砜,加入二环己基碳二亚胺与羟基琥珀酰亚胺,反应生成叶酸衍生物,再与载体蛋白B连接臂上的氨基进行偶联,得到完全抗原。结果表明,用本专利技术的抗原免疫动物得到的抗血清效价达81000,检测限0.042ng/mL,半抑制浓度0.3ng/mL。产生的抗体特异性高、灵敏度高。本专利技术的抗原或抗体用于免疫亲和柱的制备及建立酶联免疫吸附分析方法和胶体金试纸快速检测法,用于检测叶酸残留。【专利说明】一种高特异性的叶酸完全抗原合成方法及其应用
本专利技术涉及一种高特异性的叶酸完全抗原合成方法及其应用,属于生物化工
。
技术介绍
叶酸(folic acid或folate)又名碟酰谷氨酸,B族维生素之一,是氨基酸、嘧唳和嘌呤代谢中单碳转移的载体,对核蛋白的合成起辅酶作用;同时,叶酸也是许多细胞内酶反应的辅酶;叶酸的缺乏,会导致dTMP的合成受到限制,使DNA合成受阻,而产生巨幼细胞贫血。目前的研究已经证实,妇女孕前或妊娠早期缺乏叶酸是神经管畸形发生的重要病因之一。叶酸与同型半胱氨酸代谢关系密切,对预防心脑血管疾病的发生具有重要的生物学意义。而且,也有研究表明,叶酸与许多癌症的发生、预防以及治疗相关。在我国,叶酸作为一种食品添加剂可以按照食品安全国家标准合法添加至食品中。【权利要求】1.一种高特异性的叶酸完全抗原合成方法 ...
【技术保护点】
一种高特异性的叶酸完全抗原合成方法,其特征在于步骤为:在载体蛋白溶液中加入6‑氨基己酸ε‑ACA与水溶性碳二亚胺EDC,在室温下反应,透析后得到修饰了连接臂的载体蛋白B;将叶酸N‑{4‑[(2‑氨基‑1,4‑二氢‑4‑氧代‑6‑喋啶)甲氨基]苯甲酰基}‑L‑谷氨酸溶解于二甲亚砜DMSO中,加入二环己基碳二亚胺DCC与N‑羟基丁二酰亚胺NHS,反应生成叶酸衍生物,再加入载体蛋白B,调节反应pH值7.4,与载体蛋白B上的氨基进行偶联,透析,得到高特异性的叶酸完全抗原。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员:马伟,胥传来,孔德昭,匡华,徐丽广,刘丽强,宋珊珊,吴晓玲,
申请(专利权)人:江南大学,
类型:发明
国别省市:江苏;32
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