本发明专利技术公开了一种人类嗜T细胞病毒酶联检测试剂盒，包括盒体，盒体内置7个下凹瓶位，7瓶设有密封盖试剂瓶、一块人类嗜T细胞包被酶标反应板及两张封板膜，其中所述的7个下凹瓶位内分别相应放置酶标记物、浓缩洗涤液、底物液A、底物液B、阳性对照、阴性对照和终止液各一瓶，所述的多孔酶联板包括数个底面封闭且顶面敞口的微孔反应孔的内壁包被有P24、P19、P15、gp21、gp46、gp68、pr53抗原。本发明专利技术提供的人类嗜T细胞病毒酶联检测试剂盒具有较好的特异性，尤其是对于P24、P19、P15、gp21、gp46、gp68、pr53的快速测定，解决传统方法存在非特异性反应的问题，且重复性良好。
【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术公开了一种人类嗜T细胞病毒酶联检测试剂盒，包括盒体，盒体内置7个下凹瓶位，7瓶设有密封盖试剂瓶、一块人类嗜T细胞包被酶标反应板及两张封板膜，其中所述的7个下凹瓶位内分别相应放置酶标记物、浓缩洗涤液、底物液A、底物液B、阳性对照、阴性对照和终止液各一瓶，所述的多孔酶联板包括数个底面封闭且顶面敞口的微孔反应孔的内壁包被有P24、P19、P15、gp21、gp46、gp68、pr53抗原。本专利技术提供的人类嗜T细胞病毒酶联检测试剂盒具有较好的特异性，尤其是对于P24、P19、P15、gp21、gp46、gp68、pr53的快速测定，解决传统方法存在非特异性反应的问题，且重复性良好。【专利说明】一种人类嗜T细胞病毒酶联检测试剂盒
本专利技术涉及一种酶联检测试剂盒及其用途，具体说，是设计一种人类嗜T细胞病毒酶联检测试剂盒，属生物
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技术介绍
人类嗜T细胞病毒(HTLV)，是20世纪70年代后期发现的第一个人类逆转录病毒，有I型(HTLV-1 )和II型(HTLV-1I )之分，分别是引起T细胞白血病和毛细胞白血病的病原体。属逆转录病毒科的RNA肿瘤病毒亚科。HTLV-1可通过输血、注射或性接触等途径传播，也可经胎盘、产道或哺乳等垂直传播。HTLV流行地区和非流行地区的人群感染率不同在流行地区，无症状的病毒携带者抗体阳性率明显高于非流行地区，如日本北部Hokkaido非流行地区的抗体阳性率为0%,而西南部Nagasaki和Kagoshima流行地区人群抗体阳性率分别为16%和15%，并有明显的聚集发病趋势。加勒比海盆地是HTLV的另一个流行地区，牙买加的非何杰金恶性淋巴瘤患者约70% HTLV-1抗体阳性。牙买加健康人群抗体阳性率约2%?10%，海地的健康人群抗体阳性率估计还要高些。英国加勒比海盆地移民中，患ATL的黑色人种近乎100% HTLV-1抗体阳性。非洲南部和北部也是HTLV感染的高发区。南非、尼日利亚、埃及、北非和加纳等国中，正常人群HTLV-1的抗体水平为2%?10%。另外在美国和以色列也存在小范围流行。我国福建省也有HTLV-1小流行的报道。在非流行国家，健康者HTLV-1或(和)II携带率不高，一般低于2%。资料表明病毒可通过供血者传播，有多次输血史的人群HTLV- 1、II的受染率分别为10.2%、0.8%。有学者认为，非T细胞白血病或淋巴瘤患者，或是儿童白血病HTLV-1的感染可能是由于输入污染有HTLV-1的血制品造成。虽然输有HTLV血液的受血者可能不发病，但作为携带个体，可能通过分娩、哺乳、性接触等途径，成为病毒传播的重要传染源。目前已从许多T淋巴细胞的恶性疾病中分离到HTLV，如成人T细胞白血病(ATL)、T细胞淋巴瘤(TCL)、皮肤T细胞淋巴瘤(CTCL)、T细胞性毛细胞白血病(THCL)、播散性混合性淋巴瘤(DML)等。此外，从艾滋病、某些慢性神经系统的退行性病变的组织及健康人中也分离到HTLV，研究显示，HTLV-1是T淋巴细胞白血病或淋巴瘤的病原因子，血液或组织中的肿瘤细胞以⑶+4为主。另外在感染HTLV-1后，可出现HTLV-1相关的脊髓病或热带痉挛性下肢轻瘫(HAM/TSP) HAM/TSP是一种慢性、进行性神经性疾病，表现为脊髓退行性病变，并在外周血和脑脊髓液中出现CD+8细胞毒T淋巴细胞的浸润。虽然多次从T细胞性毛细胞白血病患者中分离到HTLV-1LHTLV-1I也能在体外转化人的正常T细胞，但病毒在体内致病机理尚不明了，故目前仍不能十分确定HTLV-1I作为致病因子可造成淋巴细胞增殖性疾病。在美国，1988年起已开始对血库的血源作HTLV-1和HTLV-1I的测定。通常HTLV-1 / II抗体的初筛试验，采用培养人T细胞系中的病毒裂解物作为抗原，现采用最多的抗原是gp46、p21e、p24和p40tax,该类试验敏感性很高,但特异性较低，适用于大规模的初筛，而Western blot，PCR技术这些方法费时，费力，并且需要昂贵的设备仪器，无法满足同时大量处理标本的需求。同时，鉴于HTLV-1 / II病毒的危害性，有必要开发一种简单快速的检验HTLV-1 / II的病毒抗体的检测试剂盒。HTLV为单股RNA病毒，具有外膜。根据基因组及血清学反应可分为I型(HILV—I)和II型(HTLV — II )，HTLV — I基因组全长9.03kb，5端的开放阅读框架编码核心蛋白(gag),蛋白酶(proI),逆转录酶(pol)，外膜蛋白(env), 3端ORF编码Tax和Rex,另外还编码两种功能尚不清楚的小蛋白Tof和Kof。Gag由24kDa(P24)，19kDa(P19)和15kDa(P15)分子群组成，Env是一种糖蛋白，由21kDa的跨膜糖蛋白gp21e和46kDa的外膜蛋白gp46组成，HTLV-1I与HTLV-1有60%的基因序列同源。根据WHO规定的WB阳性判定标准是p24、pl9、pr53中的一条带或几条带和gp21、gp46、gp68中的一条带或几条带。由于传统的WB同样使用的是与ELISA相同的病毒裂解物作为抗原，因而也存在非特异性反应的问题，因此本试剂盒需要包被HTLV病毒全部序列从而解决特异性反应的问题，同时该方法也为人类嗜T细胞病毒(HTLV)的防治、早期筛查、检测工作提供了准确、简便、有效的监测手段，具有广泛的应用范围和社会需求。
技术实现思路
针对现有技术存在的上述问题，本专利技术的目的是提供一种人类嗜T细胞病毒酶联检测试剂盒。为实现上述专利技术目的，本专利技术采用的技术方案如下: 一种人类嗜T细胞病毒酶联检测试剂盒，包括盒体，盒体内置有7个下凹瓶位，7瓶试剂瓶、一酶标反应板2片封膜构成，所述试剂瓶内的试剂分别为:酶标记物、浓缩洗涤液、底物液A、底物液B、终止液、阴性对照和阳性对照各一瓶，所述的多孔酶联反应板包括数个底面封闭且顶面敞口的微孔反应孔的内壁包被有P24、P19、P15、gp21、gp46、gp68、pr53抗原。作为一种优选方案，所述的人类嗜T细胞病毒抗体检测盒包被全部序列特异性抗原即 P24, P19, P15, gp21, gp46, gp68, pr53。所述酶标反应板由稀释度为1:1000-1:1100的人类嗜T细胞病毒抗原包被；包被全部序列特异性抗原即 P24、P19、P15、gp21、gp46、gp68、pr53 ； 所述浓缩洗涤液为含有15%氯化钠的磷酸盐缓冲液； 所述酶标记物为辣根过氧化物酶标记的酶标P24、P19、P15、gp21、gp46、gp68、pr53抗原，稀释度 1:1200-1:1500 ； 所述底物液A为0.04%过氧化脲乙酸缓冲液； 所述底物液B为0.04%TMB的柠檬酸缓冲液； 所述终止液为lmol/L硫酸溶液； 所述阴性对照为阴性血清； 所述阳性对照为P24、P19、P15、gp21、gp46、gp68、pr53抗体阳性血清。作为进一步优先方案，所述下凹瓶位可由塑料或纸板制成。作为进一步优选方案，所述酶标反应板位于所述试剂瓶之前，所述封板膜与所述酶标板相邻；且所述酶标反应板的大小一致。作为进一步优选方案，所述酶标反应板包括支撑架，及放置在本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种人类嗜T细胞病毒酶联检测试剂盒，其特征在于，包括盒体，盒体内置有7个下凹瓶位，7瓶设有密封盖的试剂瓶、一酶标反应板和两张封板膜构成，所述试剂瓶内的试剂分别为：酶标记物、洗涤液、底物液A、底物液B、阴性对照、阳性对照和终止液，所述的多孔酶联反应板包括数个底面封闭且顶面敞口的微孔反应孔的内壁包被有P24、P19、P15、gp21、gp46、gp68、pr53抗原，其中：所述酶标反应板由稀释度为1:1000?1:1100的人类嗜T细胞病毒抗原包被；包被全部序列特异性抗原即P24、P19、P15、gp21、gp46、gp68、pr53；所述浓缩洗涤液为含有15%氯化钠的磷酸盐缓冲液；所述酶标记物为辣根过氧化物酶标记的酶标P24、P19、P15、gp21、gp46、gp68、pr53抗原，稀释度1:1200?1:1500；所述底物液A为0.04%过氧化脲乙酸缓冲液；所述底物液B为0.04%TMB的柠檬酸缓冲液；所述终止液为1mol/L硫酸溶液；所述阴性对照为阴性血清；所述阳性对照为P24、P19、P15、gp21、gp46、gp68、pr53抗体阳性血清。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：安军，席甘，陶杰，席昇州，
申请(专利权)人：武汉翰雄生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：
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