同时鉴别Q型和B型烟粉虱的特异性PCR方法及试剂盒技术

技术编号:8678027 阅读:288 留言:0更新日期:2013-05-08 22:35
本发明专利技术同时鉴别Q型和B型烟粉虱的特异性PCR方法及试剂盒,属于分子生物学检测技术,包括对待测烟粉虱的DNA进行PCR扩增和检测PCR扩增产物,其特征在于:所述PCR扩增所采用的引物对如下:上游引物Bt-F:5’-TCT?CAT?CGG?TGT?CTTATT?G-3’,下游引物Bt-R:5’-CTT?CGG?GTC?GTT?TCT?CGT-3’;所述检测PCR扩增产物指对PCR扩增产物进行凝胶电泳并观察是否出现特征带型,Q型烟粉虱的特征带型为一条507bp条带;B型烟粉虱特征带型为507bp和660bp两条带,本发明专利技术还基于该方法提供了试剂盒。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物检测技术,特别是一种同时鉴别Q型和B型烟粉虱的特异性PCR方法及试剂盒
技术介绍
烟粉虱Bemisia taabaci属半翅目,粉虱科,广泛分布于世界各大洲,通过直接取食植物汁液、分泌蜜露污染植物以及传播植物病毒对农业和园艺生产造成严重危害。烟粉虱入侵性极强,过去二十多年来,烟粉虱入侵到全球多个国家和地区并取代了当地多个土著烟粉虱,对世界各地多种重要作物造成了严重危害,除了本身刺吸植物汁液引起叶片甚至植株萎蔫、寄主植物生理紊乱外,最重要的是烟粉虱传播的双生病毒病一番茄黄曲叶病毒病大面积暴发为害(Brown&Czosnek, 2002 ;Czosnek&Ghanim, 2011),并由南方蔓延到北方(张穗等,2006;吴永汉等,2007 ;周莹等,2010)。病毒病的流行给番茄生产带来了巨大威胁,局部地区的番茄大棚甚至绝收。因而,烟粉虱成为全球密切关注的“超级害虫”(Liuet al., 2007; Martinez-CarriI1 and Brown, 2007; Bethke et al., 2009)。烟粉風是一个包括许多遗传型的复合种,被命本文档来自技高网...

【技术保护点】
用于检测B型烟粉虱和Q型烟粉虱的方法,包括对待测烟粉虱的DNA进行PCR扩增和检测PCR扩增产物,其特征在于:?所述PCR扩增所采用的引物对如下:?上游引物Bt?F:5’?TCT?CAT?CGG?TGT?CTT?ATT?G?3’,?下游引物Bt?R:5’?CTT?CGG?GTC?GTT?TCT?CGT?3’;?所述检测PCR扩增产物指对PCR扩增产物进行凝胶电泳并观察是否出现特征带型,Q型烟粉虱的特征带型为一条507bp条带;B型烟粉虱特征带型为507bp和660bp两条带。

【技术特征摘要】
1.关于检测B型烟粉虱和Q型烟粉虱的方法,包括对待测烟粉虱的DNA进行PCR扩增和检测PCR扩增产物,其特征在于: 所述PCR扩增所采用的引物对如下:上游引物 Bt-F:5’ -TCT CAT CGG TGT CTT ATT G-3’,下游引物 Bt-R:5’ -CTT CGG GTC GTT TCT CGT-3’ ; 所述检测PCR扩增产物指对PCR扩增产物进行凝胶电泳并观察是否出现特征带型,Q型烟粉風的特征带型为一条507bp条带;B型烟粉風特征带型为507bp和660bp两条带。2.根据权利要求1所述的方法,所述PCR扩增的体系:TaqDNA聚合酶0.05U/yl、IXTaq缓冲液、氯化镁1.5mM、dNTPs 200 ii M、上游引物和下游引物的浓度分别为0.5 ii M、DNA 模板浓度为 0.17 X 1(T5 0.2ng/ul,加 ddH20 至 20 yl。3.根据权利要求...

【专利技术属性】
技术研发人员:王少丽王金娜张友军吴青君谢文徐宝云
申请(专利权)人:中国农业科学院蔬菜花卉研究所
类型:发明
国别省市:

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