一种MDCK细胞制备流感疫苗的培养基及其使用方法技术

本发明专利技术提供一种适用于大规模高密度培养MDCK细胞制备流感疫苗的培养基。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物制品领域，涉及一种培养基的配置和使用方法，更具体的，涉及一种用于在大规模高密度生长环境的培养MDCK细胞制备流感病毒疫苗的培养基。
技术介绍
通过动物细胞培养以制备最终产品，是生物制品领域最常用的生产方式之一。用于动物细胞培养的培养基，绝大部分需要加入10% -15%的动物血清，以提供细胞生长所需的营养成分及细胞保持正常形态的支持蛋白。但是，来源于动物的血清的缺点在于:成分难以明确，产品批间差异不易控制，价格昂贵，并且要求极其严格的检测程序以确保血清中不含有血清来源动物可能携带的细菌、病毒等。MDCK细胞广泛用于生物制品领域，尤其是疫苗制备。使用MDCK细胞制备流感疫苗是近年来流感疫苗生产的一个新趋势。生物反应器及多种适合的载体，已被广泛应用于动物细胞培养，其优点在于，许多种类的生物反应器可以通过灌流培养的方式实现大规模，高密度培养动物细胞。为达到良好的培养效果，生物反应器的参数设置和所选培养基的成分是其中的重要因素。然而，针对使用生物反应器大规模高密度培养MDCK细胞制备流感疫苗的培养基研究有待深入进行。
技术实现思路
本专利技术提供一种适用于大规模高密度培养MDC本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种大规模高密度培养MDCK细胞制备流感疫苗的培养基，其特征在于：培养基的组成成分及重量份为：FSA00000834901200011.tif

【技术特征摘要】
1.一种大规模高密度培养MDCK细胞制备流感疫苗的培养基，其特征在于:培养基的组成成分及重量份为:成份mg/L甘氨酸(Glycine)20-55L-丙氨酸(L-Alanine)2—35L-精氨酸(L-Arginine)50-150L-门冬醜胺(L-Asparagine)5-50 L-天门冬氨酸(L-Aspartic acid)I_28 L-半胱氨酸盐酸盐(L-Cysteine hydrochloride_H20)1-30 L-胱氨酸二盐酸盐(L-Cystine 2HC1)25-80 L-谷氨酸(L-Glutamic Acid)5-80L-谷氨酰胺(L-Glutamine)200-500L-组氨酸(L-Histidine)20-80 L-轻脯氨酸(L-Hydroxyproline)1-15 L-异亮氨酸(L-1soleucine40-120L-亮氨酸(L-Leucine)40-120 L-赖氨酸盐酸盐(L-Lysine hydrochloride)20-130L-甲硫氨酸(L-Methionine)10-60 L-苯丙氨酸(Phenylalanine)20-80L-丝氨酸(L-Serine)10 - 60L-苏氨酸(L-Threonine)30-100L-色氨酸(L-Tryptophan)10-60L-織氨酸(L-Valine)20-110L-腩氨酸(L-Proline)10-60 L-酪氨酸盐钠盐二水(L-Tyrosine disodium salt dihydrate30-120 氯化钠(Sodium Chloride)4000-9000 无水硫酸镁(Magnesium Sulfate (anhydrous) )50-150 氯化钾(Potassium Chloride)200-600 无水氯化妈(Calcium Chloride)100-300 一水憐酸氢二钠(Sodium Phosphatemonobasic) 20-150 五水硫酸铜(Cupric sulfate)0.0001-0.01 泛酸妈(D-Calcium pantothenated)0.5-5 氯化胆碱(Choline chloride)0.5-10叶酸(Folic Acid)0.5-5肌醇(1-1nositol)2—15烟酰胺(Niacinamide)0.5-5核黄素(Riboflavin)0.1-5 盐酸硫胺(Thiamine hydrochloride)0.1-5 葡萄糖(D-Glucose (Dextrose))1000-7000 丙酮酸钠 Sodium Pyruvate)10-100酿红(Phenol Red)8—20 盐酸P比嘆签(Pyridoxal hydrochloride)0.01-2 维生素 B12 (Vitamin B12)0.05-1.6 维生素 B6 (Vitamin B6)0.001-0.1抗坏血酸(Ascorbic Acid)1-5亚油酸(Linoleic Acid)0.01-1.52.如权利要求1所述的大规模高密度培养MDCK细胞制备流感疫苗的培养基，其特征在于:培养基的组成成分及重量份优选为:·成份mg/L 甘氨酸(Glycine)29.5 L-丙氨酸(L-Alanine)18.5 L-精氨酸(L-Arginine)90 L-门冬酰胺(L-Asparagine)28.34 L-天门冬氨酸(L-Aspartic acid)8.35 L-半胱氨酸盐酸盐(L-Cysteine hydrochloride)16.45 L-胱氨酸二盐酸盐(L-Cystine 2HC1)55 L-谷氨酸(L-Glutamic Acid)42.8 L-谷氣酰胺(L-Glutamine)405 L-组氨酸(L-Histidine)35 L-轻脯氣酸(L-Hydroxyproline)8 L-异亮氨酸(L-1soleucine50 L-亮氨酸(L-Leucine)60 L-赖氨酸盐酸盐(L-Lysine hydrochloride)43.5 L-甲硫氨酸(L-Methionine)19.5 L-苯丙氨酸(Phenylalanine)30 L-丝氨酸(L-Serine)21.15 L-苏氨酸(L-Threonine)51.3 L-色氧酸(L-Tryptophan)8 L-缬氨酸(L-Valine)23.5 L-脯氨酸(L-Proline)22.8 L-酪氨酸盐钠盐二水(L-Tyrosine disodium salt dihydrate)49.35 氯化钠(Sodium Chloride)6850 无水硫酸镁(Magnesium Sulfate (anhydrous) )100 氯化钾(Potassium Chloride)425 无水氯化 1 (Calcium Chloride)180 一水憐酸氧二纳(Sodium Phosphate monobasic)146 五水硫酸铜(Cupric sulfate)0.0004 泛酸 1 (D-Calcium pantothenated)1.2 氯化胆碱(Choline chloride)2.3 叶酸(Folic Acid)1.2 肌醇(1-1nositol)8.5 烟酰胺(Niacinamide)0.9 核黄素(Riboflavin)0.6 盐酸硫胺(Thiamine hydrochloride)1.8 葡萄糖(D-Glucose (Dextrose))3050 丙酮酸納 Sodium Pyruvate)40 酷红(Phenol Red)12.5 盐酸卩比卩多签(Pyridoxal hydrochloride)0.06 维生素 B12 (Vitamin B12)1_ I 维生素 B6 (Vitamin B6)0.005 抗坏血酸(Ascorbic Acid)4.2 亚油酸(Linoleic Acid)0.058 生物素(Biotin)0.013.如权利要求1或2所述的培养基，在使用前加入3%-5%的胎牛血清或小牛血清，经过膜过滤制成在大规模高密度环境下使用的培养MDCK细胞的培养液。4.一种大规模高密度培养得到MDCK细胞接入流感病毒后，维持病毒感染时期的培养基，其特征在于:培养基的组成成分及重量份为:成份mg/L甘氨酸(Glycine)20-55L-丙氨酸(L-Alanine)2—35L-精氨酸(L-Arginine)50-150 L-门冬酰胺(L-Asparagine)5-50 L-天门冬氨酸(L-Aspartic acid)1-28 L-半胱氨酸盐酸盐(L-Cysteine hydrochloride-ftO)1-30 L-胱氨酸二盐酸盐(L-Cystine 2HC1)25-80 L-谷氨酸(L-Glutamic Acid)5-80 L-谷氨酰胺(L-Glutamine)200-500L-组氨酸(L-Histidine)20-80 L-经脯氨酸(L-Hydroxyproline)1-15 L-异亮氨酸(L_Isoleucine40-120L-亮氨酸(L-Leucine)40-120 L-赖氨酸盐酸盐(L-Lysine hydrochloride)20-130 L-甲硫氨酸(L-Methionine )10-60 L-苯丙氨酸(Phenylalanine)20-80L-丝氨酸(L-Serine)10-60L-苏氨酸(L-Threonine)30-100 L-色氨酸(L-Tryptophan)10 - 60L-缬氨酸(L-Val ine)20-110L-脯氨酸(L-PiOline)10-60 L-酪氨酸盐纳盐二水(L-Tyrosine disodium salt dihydrate30-120 氯化钠(Sodium Chloride)4000-9000 无水硫酸镁(Magnesium Su...

【专利技术属性】
技术研发人员：贾馨丹，
申请(专利权)人：杭州国牧生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：