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一种高产L-苯丙氨酸的重组谷氨酸棒杆菌及其应用制造技术

技术编号:8653069 阅读:372 留言:0更新日期:2013-05-01 19:19
本发明专利技术公开了一种高产L-苯丙氨酸的重组谷氨酸棒杆菌及发酵生产L-苯丙氨酸(Phe)的方法,属于代谢工程领域。本发明专利技术在谷氨酸棒杆菌模式菌株ATCC13032中通过诱导表达3-脱氧-D-阿拉伯庚酮糖酸7-磷酸合成酶基因,抗反馈抑制的分支酸变位酶/预苯酸脱水酶基因,转酮醇酶基因及磷酸烯醇式丙酮酸合成酶基因四个基因,获得了一株高产L-Phe的谷氨酸棒状杆菌工程菌株C.glutamicum19AF/99TP。在C.glutamicum?ATCC13032中过量表达L-Phe合成代谢途径的莽草酸代谢途径,分支酸代谢途径的关键酶基因使得L-Phe产量达到3.47g/L,结合表达中心代谢途径提高前体物质的两个酶基因L-Phe产量最高达到4.86g/L,而出发菌株ATCC13032作为对照菌株在整个发酵过程中检测不到L-Phe的积累。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种高产L-苯丙氨酸的重组谷氨酸棒杆菌及其应用,特别是一种代谢改造的重组谷氨酸棒杆菌及其生产L-苯丙氨酸的方法。
技术介绍
苯丙氨酸(Phenylalanine),即D, L_ a -氨基-0 -苯基丙酸,有外消旋DL-型、L-型和D-型三种,其中具有生物活性的光学异构体为L-苯丙氨酸(L-Phenylalanine, L-Phe),比旋光度为-35.1。。L-Phe又名L-苯基-氨基丙酸,常温下为白色或无色结晶性粉末固体,水中溶解度为29.6g/L,难溶于甲醇、乙醇和乙醚。L-Phe在自然界中广泛存在于卵、乳和动物蛋白中,含量5%-6% ;L-Phe也存在于植物性蛋白质中,含量约为1%。L-Phe是人和动物体内不能合成的8种必需氨基酸之一,也是高甜度低热量的新型甜味剂阿斯巴甜的重要组成部分。作为一种重要的生物化工产品,L-Phe在食品、饲料添加剂以及医药等领域具有广泛的应用。20世纪80年代以来,随着氨基酸类抗癌药物和营养保健品的开发应用,尤其是阿斯巴甜的广泛生产与使用,国际市场对L-Phe的需求快速增长。据悉,2005年全球需求量为3万吨,实际年产量只有1.4万吨本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种高产L?苯丙氨酸的重组谷氨酸棒杆菌,其特征在于过量表达3?脱氧?D?阿拉伯庚酮糖酸7?磷酸合成酶基因,抗反馈抑制的分支酸变位酶/预苯酸脱水酶基因,转酮醇酶基因及磷酸烯醇式丙酮酸合成酶基因。

【技术特征摘要】
1.一种高产L-苯丙氨酸的重组谷氨酸棒杆菌,其特征在于过量表达3-脱氧-D-阿拉伯庚酮糖酸7-磷酸合成酶基因,抗反馈抑制的分支酸变位酶/预苯酸脱水酶基因,转酮醇酶基因及磷酸烯醇式丙酮酸合成酶基因。2.权利要求1所述的重组谷氨酸棒杆菌,其特征在于所述3-脱氧-D-阿拉伯庚酮糖酸7-憐酸合成酶基因来源于谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)。3.权利要求1所述的重组谷氨酸棒杆菌,其特征在于所述转酮醇酶基因来源于谷氨酸棒杆菌。4.权利要求1所述的重组谷氨酸棒杆菌,其特征在于所述磷酸烯醇式丙酮酸合成酶基因来源于谷氨酸棒杆菌。5.权利要求1-4任一所述的重组谷氨酸棒杆菌,其特征在于所述3-脱氧-D-阿拉伯庚酮糖酸...

【专利技术属性】
技术研发人员:陈坚张传志堵国成康振
申请(专利权)人:江南大学
类型:发明
国别省市:

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