【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种基因探针组合物及试剂盒,尤其涉及一种检测急性淋巴细胞性白血病的基因探针组合物及试剂盒。
技术介绍
急性淋巴细胞性白血病是一种恶性程度很高的血液疾病,其特征为外周血中存在大量的类似于淋巴母细胞的未成熟白细胞,这些异常细胞也可在骨髓,淋巴结,脾脏和其它器官中发现。急性淋巴细胞白血病在儿童急性白血病中约占80%,发病率高峰在3岁至7 岁之间,该病也可发生于成年人,约占所有成年白血病的20%。在急性白血病中,恶性细胞失去成熟和定向分化的功能,恶变细胞迅速分裂并取代正常细胞。当恶性细胞取代正常的骨髓成分时即发生骨髓衰竭,由于正常细胞的数目急剧减少,患者变得容易出血和感染。目前,急性淋巴细胞性白血病的发病原因仍不清楚。辐射、某些毒素,如苯和一些化学试剂,可能和该病的诱发有关。近年来分子生物学的研究表明,染色体和某些基因的异变在急性淋巴细胞性白血病的发生过程中发挥了关键的作用。例如TEL/AM1基因融合是由t(12 ;21)染色体易位引起的。这种基因重排最常见于B细胞急性淋巴细胞性白血病,荧光原位杂交法的检出率为21%,而常规细胞遗传学的检出率仅为O. 05 ...
【技术保护点】
一种检测急性淋巴细胞性白血病的基因探针组合物,其特征在于:该基因探针组合物包括TEL基因探针,AML1基因探针,PAX5基因探针,P16基因探针和IKZF1基因探针。
【技术特征摘要】
1.一种检测急性淋巴细胞性白血病的基因探针组合物,其特征在于该基因探针组合物包括TEL基因探针,AMLl基因探针,PAX5基因探针,P16基因探针和IKZFl基因探针。2.根据权利要求I所述的基因探针组合物,其特征在于所述基因探针组合物包括 TEL 基因探针RP11-654E9(UCSC genome browser); AMLl 基因探针RP11-77G18(UCSC genome browser); PAX5 基因探针RP11-243F8(UCSC genome browser); P16 基因探针RP11-97A22(UCSC genome browser);IKZFl 基因探针RPl 1-663L2(UCSC genome browser) 3.根据权利要求I或2所述的基因探针组合物,其特征在于所述TEL基因探针、AMLl基因探针、PAX5基因探针、P16基因探针和IKZFl基因探针均为经过荧光素标记的探针。4.权利要求1-3任一项所述基因探针组合物的制备方法,其特征在于包括如下步骤 1)、克隆筛选检索UCSC genome browser, NCBI Clone Registry, Ensembl GenomeBrowser数据库分别含有TEL、AML1、PAX5、P16、IKZFl基因的所有细菌人工染色体(BAC)克隆,并对这些克隆进行筛选,选出最佳的克隆; 2)、克隆培养和鉴定按照筛选确定的克隆编号购买BAC克隆(美国Invitrogen公司),取5-10微升克隆菌液加到3-5毫升含氯霉素抗性的LB液体培养基中,37°C振摇活化培养8-16小时;然后将菌液全部加入至400-500毫升含氯霉素抗性的LB液体培养基中,37°C震摇培养8-16小时;对TEL、AML1、PAX5、P16、IKZFl的BAC克隆用相对应的基因引物进行多聚酶链式反应扩增,用1-2%的琼脂糖凝胶电泳对产物进行分析,从而完成待选克隆的分子鉴定; 3)、基因探针的制备和鉴定获得目的基因的克隆后,提取大量DNA,酶切DNA后采用缺口平移的方法对酶切后的DNA进行荧光素标记,再对TEL,AML1,PAX5,P16和IKZFl基因探针组合后进行沉淀和浓缩,将制作好的探针组合物溶解到含有50%去离子甲酰胺的杂交缓冲液中,即得荧光标记探针组杂交混合液,采...
【专利技术属性】
技术研发人员:程涛,竺晓凡,胡林萍,张丽,缪为民,
申请(专利权)人:中国医学科学院血液病医院血液学研究所,
类型:发明
国别省市:
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