本文公开了能够与ＯＸ－２／ＣＤ２００和／或ＯＸ－２／ＣＤ２００受体结合的多肽、包括抗体的使用方法。这些多肽被用于治疗其特征表现为ＯＸ－２／ＣＤ２００水平升高的疾病，包括癌症和慢性淋巴细胞性白血病（ＣＬＬ）。
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
公开了从慢性淋巴细胞性白血病(CLL)细胞衍生的细胞系及其 在CLL和其它疾病的研究和治疗中的应用。具体来说，本公开涉及了 一株被命名为"CLL-AAT"的CLL细胞系，该细胞系按照布达佩斯 公约的条款于2001年11月28日保藏于美国典型培养保藏中心 (Manassas, Virginia, USA) ， ATCC登记号为PTA-3920。
技术介绍
慢性淋巴细胞性白血病(CLL)是一种白细胞疾病，在西半球是 最常见的白血病形式。CLL代表了一组不同形式的与恶性淋巴细胞的 生长相关的疾病，这些淋巴细胞生长缓慢，但是生命期跨度延长。CLL 被分成不同的类型，包括例如典型的和混合型的B细胞慢性淋巴细胞 性白血病(B-CLL) 、 B细胞和T细胞前淋巴细胞性白血病、毛细胞 白血病和大的粒状淋巴细胞性白血病。在所有的不同类型的CLL中，B-CLL占了所有白血病的大约 30%。尽管它在年龄在50岁以上的个体中发生得更频繁，但在较年轻 的人群中也越来越多地看见。B-CLL的特征表现为形态学上正常但生物学上不成熟从而失去功能的B淋巴细胞的积累。淋巴细胞的正常功 能是与感染斗争。但是，在B-CLL中，淋巴细胞在血液和骨髓中积累， 导致淋巴结肿胀。正常骨髓和血细胞的生产减少，病人通常经历严重 的贫血以及低血小板计数。这可能引起危及生命的出血，以及由于白 细胞数量的减少而发展成严重的感染。为了进一步了解象白血病这样的疾病，重要的是要具有能够用做 工具研究它们的病因学、发病机理和生物学的适当的细胞系。恶性人 B淋巴细胞类的细胞系的例子包括前B急性成淋巴细胞性白血病 (Reh)、扩散性大细胞白血病(WUS-DLCL2)和Waldenstrom巨球 蛋白血症(WUS-WM)。不幸的是，大多数现有的细胞系不能代表临 床上最常见的白血病和淋巴瘤的类型。使用Epstein Barr病毒(EBV)在体外感染获得了一些CLL衍生 细胞系、特别是B-CLL细胞系，它们是具有代表性的恶性细胞。这些 细胞系的表现型与体内肿瘤的表现型不同，B-CLL株的特征反而倾向 于与成淋巴细胞类的细胞系的特征相似。通过EBV感染的帮助使B-CLL细胞永生的尝试很少获得成功。其原因尚不清楚，但是已知这不 是由于缺少EBV受体的表达、结合或摄取。Wells等发现B-CLL细胞 停止在细胞周期的Gl/S期，并且与转化相关的EBV DNA没有表达。 这表明EBV与B-CLL细胞的相互作用与它和正常B细胞的相互作用 不同。EBV转化的CLL细胞系更多表现为分化，具有与用EBV永生 的成淋巴细胞类的细胞系(LCL)更相似的形态。以前已经建立了一株EBV阴性的CLL细胞系WSU-CLL (Mohammad等，(1996) Leukemia 10(1): 130-7)。但是还不知道有 其它这样的细胞系存在。在身体对疾病状态包括癌症和CLL的反应中有多种不同的机制 发挥作用。例如，CD4+辅助性T细胞通过为效应细胞提供刺激因子，在针对各种恶性肿瘤的有效的免疫反应中发挥重要作用。细胞毒性T细胞据信是消除癌细胞最有效的细胞，辅助性T细胞通过分泌Thl细 胞因子例如IL-2和IFN-Y来引发细胞毒性T细胞。在各种恶性肿瘤中， 已经显示出辅助性T细胞的表现型与正常个体中发现的细胞相比有变 化。 一个显著改变的特征是Thl细胞因子的产生减少，转变成产生Th2 细胞因子。(参见例如Kiani等，Haematologica 88:754-761 (2003); Maggio等，Ann Oncol 13 Suppl 1:52-56 (2002); Ito等，Cancer 85:2359-2367 (1999); Podhorecka等，Leuk Res 26:657-660 (2002); Tatsumi等，J Exp Med 196:619-628 (2002); Agarwal等，Immunol Invest 32:17-30 (2003); Smyth等，Ann Surg Oncol 10:455-462 (2003); Contasta 等，Cancer Biother Radiopharm 18:549-557 (2003); Lauerova等， Neoplasma 49:159-166 (2002)。)已经证实将这种细胞因子的转变逆转 向Thl的情况增加了 T细胞的抗肿瘤效应(参见Winter等，Immunology 108:409-419 (2003); Inagawa等，Anticancer Res 18:3957-3964 (1998))。肿瘤细胞驱使辅助性T细胞的细胞因子的表达从Thl变为Th2 的能力之下的机制包括细胞因子例如IL-10或TGF-(3的分泌以及与免 疫系统的细胞相互作用的表面分子的表达。OX-2/CD200为一种在树 突状细胞表面表达的与免疫球蛋白基因家族的分子具有高度同源性的 分子，已经牵涉于免疫抑制中(Gorczynski等，Transplantation 65:1106-1114 (1998))，表明表达OX-2/CD200的细胞能够抑制对Thl 细胞因子生产的刺激的证据已经提供。Gorczynski等在小鼠模型中证 实了在使用白血病肿瘤细胞的动物模型中OX-2/CD200 Fc的灌注抑制 了肿瘤细胞的排斥(Clin Exp Immunol 126:220-229 (2001))。对治疗患有癌症或CLL的病人的方法进行改进是合乎需要的， 特别是改进它们增强T细胞活性的程度。专利技术简述在一个实施方案中，提供了不是通过用EBV永生化而建立的恶性来源的CLL细胞系。该细胞系从初级CLL细胞衍生而来，保藏于 ATCC，登记号PTA-3920。在优选实施方案中，细胞系是CLL-AAT。 CLL-AAT是从B-CLL初级细胞衍生的B-CLL细胞系。另一方面，CLL-AAT细胞系被用来产生单克隆抗体，用于CLL 的诊断和/或治疗。抗体的产生可以通过使用本专利技术的细胞作为免疫 原，在动物中引发免疫反应，再从中分离单克隆抗体。这些抗体的序 列可以被测定，抗体及其变异体可以通过重组技术生产。在这一方面 来说，"变异体"包括基于单克隆抗体序列的嵌合的、CDR-移植的、 人源化的和完全的人类抗体。此外，可以使用本专利技术的细胞或从中衍生的多肽作为饵在靶特异 性的基础上分离抗体，从而筛选从重组文库衍生的抗体("噬菌体抗 体")。另一方面，抗体的产生可以通过使用初级CLL细胞或从其衍生 的抗原来淘洗抗体文库，然后使用一株CLL细胞系例如本专利技术描述的 CLL细胞系进一步筛选和/或表征。因此，提供了用于表征特异于CLL 的抗体的方法，其中包括评估抗体与CLL细胞系的结合。另一方面，提供了鉴定在CLL细胞中独特表达的蛋白的方法， 这利用了 CLL-AAT细胞系，使用本领域的专业技术人员熟知的方法， 例如免疫沉淀然后质谱分析。这些蛋白可以独特表达在CLL-AAT细 胞系中，或独特表达在来自CLL病人的初级细胞中。可以使用CLL-AAT细胞系在基于细胞的分析中筛选小分子文库 (许多可以购买到)，以鉴定能够调节细胞的生长特性的试剂。例如， 调节CLL-AAT细胞系中的细本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种方法，包括： 确定在患者中ＯＸ－２／ＣＤ２００是否被上调；以及 给患者施用能够与ＯＸ－２／ＣＤ２００或ＯＸ－２／ＣＤ２００受体结合的多肽。
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...
【专利技术属性】
技术研发人员：凯瑟琳S鲍迪什，约翰麦克沃特，安克克雷茨罗梅尔，
申请(专利权)人：阿莱克森制药公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]
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