本发明专利技术涉及生物医药领域，具体涉及一种用于治疗老年性白血病的组合物，包括年轻骨髓间质干细胞、维生素C以及用于维持年轻骨髓间质干细胞生理活性的生理盐水。本发明专利技术所述组合物应用于治疗老年人骨髓增生异常疾病，以及其他普通髓系增生性疾病的缓解辅助治疗，没有毒副作用，有效缓解患者症状，实现长期带病生存，提高生存质量，延长患者寿命，具有良好的应用前景。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物医药领域，具体涉及一种用于治疗老年性白血病的组合物。
技术介绍
老年性白血病，一般指年愈60岁的白血病患者与其他年龄组白血病一样，是一种病因不明的原发于造血干细胞的恶性疾病，是衰老的造血微环境与白血病干细胞共同作用的结果。老年白血病多数缓慢起病，逐步进展，以乏力、面色苍白、食欲不佳、劳动后气急等为主。老年人白血病是全世界治疗难题，迄今没有行之有效的治疗方案。传统化疗/辐射疗法和造血干细胞移植是治疗老年白血病的常用技术。经典化疗/辐射疗法是治疗多种肿瘤的常规治疗技术。化疗/辐射疗法的原理很简单，就是直接杀死患者肿瘤细胞。对于诸多实体瘤，局部化疗/辐射疗法的治疗法案应用广泛，效果较佳。然而，血液系统遍布全身，因此无法通过上述方案杀死血液肿瘤细胞。经典化疗/辐射疗法在杀死肿瘤细胞的同时也破坏患者体内正常的细胞，产生严重的毒副作用。针对肿瘤细胞的靶向化疗被证明非常有效，但是仅仅局限于如CML的少数肿瘤类型。有效剂量化疗老年患者难以承受，亚剂量、低剂量化疗治疗老年白血病难以有效杀死白血病细胞。因此，化疗/辐射疗法的严重副作用，不适合于老年白血病患者。干细胞疗法是治疗诸多恶性血液肿瘤、免疫缺陷、自身免疫等疾病的重要途径。治疗用的干细胞类型有多种，但当前应用最广的是各种类型的成体干细胞，如造血干细胞、间充质干细胞等。干细胞疗法的工作原理是部分或者完全重建因疾病、损伤、衰老等因素而失去正常功能的组织与器官、甚至某个系统。造血干细胞移植是最早应用于临床、能够彻底治愈部分血液疾病的干细胞疗法。造血干细胞疗法将造血干细胞植入患者体内，能够归巢到骨髓定居，进行自我更新，并且增殖产生所有成熟造血细胞，最终重建整个造血系统。因此，在结合化疗等预处理方案清除患者体内的肿瘤细胞后，移植自体来源或者配型合适的异体来源造血干细胞，可以重建造血及免疫系统，彻底治愈部分血液病。由于造血干细胞移植需要对患者进行化疗等预处理才能实现成功植入，这个预处理过程对老年患者几乎无法承受。此外，由于衰老原因，造血干细胞移植本身就很难成功植入老年患者，主要原因是老年人骨髓微环境老化，以及整个造血支持系统的老化。当前，造血干细胞移植受到造血干细胞来源短缺、移植排斥等问题局限。因此，一种折中途径就是降低供体造血干细胞的配型要求，达到植入和造血重建，结合间充质干细胞疗法抑制移植物抗宿主的免疫排斥(GVHD)。这种折中方案适合儿童和青壮年，但因患者身体条件，不适合老年患者。总之，由于老年患者难以承受移植前的预处理，并且衰老的造血微环境导致很难植入供体造血干细胞。因此，造血干细胞移植在治疗老年白血病方面受到局限，迄今成功甚少，亟需寻求一种用于治疗老年性白血病的方法或药物。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术大量实验以期找到一种药物组合，实现衰老骨髓微环境年轻化，成功压制老年白血病肿瘤细胞，能够在一定时期内恢复造血稳态，提高了患者生活质量。为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供以下方案:一种用于治疗老年性白血病的组合物，包括:年轻的骨髓间质干细胞、维生素C以及用于维持年轻骨髓间质干细胞生理活性的生理盐水。作为优选，年轻骨髓间质干细胞浓度为4-6 X 106个/ml。更优选地，年轻骨髓间质干细胞浓度为5 X 106个/ml。作为优选，维生素C浓度为40-60 μ g/ml。 更优选地，维生素C浓度为50 μ g/ml。作为优选，所述骨髓间质干细胞为间充质干细胞与骨髓内皮细胞的组合。更优选地，所述间充质干细胞与骨髓内皮细胞的比例为90-99:1:10。在本专利技术的实施例中，所述间充质干细胞与骨髓内皮细胞的比例为99:1。更优选地，年轻的骨髓间质干细胞使用剂量为0.5-1.5X 107cells/kgo推荐的使用方式是髓腔内注射。本专利技术还提供所述组合物在用于制备治疗老年性白血病的用途。本专利技术实现老年白血病动物长期带病生存，长期实现老年白血病病理缓解、延长患者生命的创新技术。采用本专利技术所述药物组合物定期输注还可以完全控制疾病的发展，大大延长患者寿命，没有化疗和预处理出现的毒副作用。本专利技术所述组合物应用于治疗老年人骨髓增生异常疾病，以及其他普通髓系增生性疾病的缓解辅助治疗，没有毒副作用，有效缓解患者症状，实现长期带病生存，提高生存质量，延长患者寿命，具有良好的应用前景。术语与定义年轻的骨髓间质干细胞:取自6月内健康小鼠、大鼠骨髓间质干细胞，或者30岁以下健康人骨髓间质干细胞，原代培养可以传代6代以内的细胞。【附图说明】 图1.YBMSC免疫表型鉴定；(A)YBMSC分离及培养不同代次显微镜照片；(B)流式分析表明 YBMSC 的免疫表型为 CD31-，CD45-，Terll9_，PDGFRa+，PDGFRb+，CD51+，CD105+O图2老年骨髓增生异常疾病模型参数鉴定；图3输注YBMSC有效缓解老年骨髓增生异常。【具体实施方式】本专利技术公开了一种用于治疗老年性白血病的组合物，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本专利技术。本专利技术的产品、方法已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本
技术实现思路
、精神和范围内对本文所述的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本专利技术技术。本专利技术所述骨髓间质干细胞，可以按照下述实施例自行制备，也可购自市场。如实施例1中自行制备的年轻骨髓间质干细胞，可购自Cyagene，货号MUBMX-01001。下面结合实施例，进一步阐述本专利技术:实施例1年轻骨髓间质干细胞的分离培养(l)Day 0，安乐死小鼠，取出小鼠(6个月以内)的4条腿放在6cm培养皿中，把肉尽可能剥离干净，用含有10x双抗的DPBS依次洗3次后放在室温的DMEM:F12中(有文献提到室温比放置在冰上更好)，使用5ml注射器用DMEM:F12将骨髓尽可能吹干净，将骨髓用70um滤网过滤，收集骨头和滤网上的碎骨片，放在预先加入1.5ml DMEM:F12培养基的六孔板的一个孔中，用剪刀把骨头尽可能剪碎，再加入1.5ml配好的胶原酶II (在避光的1.5mlEP管中，已经用DMEM:F12配好)，这样胶原酶II的终浓度为lmg/ml，用1ml移液器将剪碎的骨片吹散，均匀扑满整个孔，小心放入培养箱中37°C消化l_2h(文献中是用带有摇床的培养箱消化，静置消化1.5-2h效果也可以)。消化完成后将消化液吸弃，用DMEM:F12洗3次，加入3ml DMEM:F12+10% FBS(Gibico)完全培养基放置在37°C培养箱培养3d(尽可能放置在里面角落里，以保证3d期间不要挪动它)。(2)Day 3，将培养基吸弃，骨片转移到另一个新孔再培养3d，洗掉培养基和骨片的孔用F12洗3遍，换3ml新的完全培养基继续培养6d(第三天已经可以看到在骨片下面及周围有许多MSC细胞爬出)。(3) Day 6，换液，吸弃培养基，加入3ml新的完全培养基。(4)Day 9，传代，吸弃培养基，用DMEM:F12洗一遍，加入0.5ml 0.25%胰酶37°C消化2.5min当前第1页1 2 本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种用于治疗老年性白血病的组合物，包括：年轻的骨髓间质干细胞、维生素C以及用于维持年轻骨髓间质干细胞生理活性的生理盐水。
【技术特征摘要】
...
【专利技术属性】
技术研发人员：管玉先，陈运贤，张祥忠，
申请(专利权)人：广东颐养抗衰老研究院，
类型：发明
国别省市：广东;44
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