测量干血斑中无细胞病毒颗粒的方法技术

描述了测量干血斑中游离核酸和/或病毒颗粒的方法。所述方法可包括以下步骤：再水化干血样、任选地将存在于所述再水化的干血样中的细胞固定、将游离病毒颗粒从所述再水化的干血样中洗脱、使用过滤器将所述游离病毒从可能存在于所述再水化的干血样中的任何细胞残渣上分离以及通过病毒颗粒定量技术测量游离病毒颗粒。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】专利
本专利技术涉及测量血液中病毒载量的领域，并且更具体地讲，涉及测量干血斑中无细胞病毒颗粒的方法。专利技术背景2013年，世界卫生组织（WHO）修订了现行的HIV治疗和预防准则并强调了HIV病毒载量（VL）测试在对HIV阳性患者的管理中的重要性。WHO强烈推荐使用HIV病毒载量测试替代临床表现和CD4细胞计数以监测HIV抗逆转录病毒疗法（ART），并且将对于治疗效果的HIV血浆VL水平的截断值从5000份拷贝/mL降至1000份拷贝/mL。换句话讲，如果接受ART治疗的HIV患者血浆中的病毒滴度大于1000份拷贝/mL，则将看作是药物治疗失败。对治疗失败的应对（如依从性咨询、药物耐药性测试和二线治疗方案）是耗时且昂贵的，而应当仅在有必要时使用。在感染后，HIV病毒不仅在被感染的细胞内开始自我复制，还将其cDNA整合至宿主染色体中作为潜伏的HIV前病毒DNA（Greene,W.C.与Peterlin,B.M.,2002,ChartingHIV’sremarkablevoyage本文档来自技高网...

【技术保护点】
测量干血斑中无细胞病毒颗粒的方法，包括：再水化干血样，其通过向干血样施加缓冲溶液以产生再水化的干血样；任选地，使用固定剂将存在于所述再水化的干血样中的细胞固定以用细胞包含与细胞结合的RNA和/或DNA；使用洗脱剂将无细胞病毒颗粒从所述再水化的干血样中洗脱，所述洗脱剂优先地洗脱无细胞病毒颗粒而不破坏与细胞结合的RNA和/或DNA；使用过滤器将所述无细胞病毒从可能存在于所述再水化的干血样中的任何细胞碎片上分离；以及通过病毒颗粒定量技术测量无细胞病毒颗粒。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2013.10.22 US 61/894332;2014.02.28 US 61/945974;201.测量干血斑中无细胞病毒颗粒的方法，包括：
再水化干血样，其通过向干血样施加缓冲溶液以产生再水化的干血样；
任选地，使用固定剂将存在于所述再水化的干血样中的细胞固定以用细胞包含与细胞
结合的RNA和/或DNA；
使用洗脱剂将无细胞病毒颗粒从所述再水化的干血样中洗脱，所述洗脱剂优先地洗脱
无细胞病毒颗粒而不破坏与细胞结合的RNA和/或DNA；
使用过滤器将所述无细胞病毒从可能存在于所述再水化的干血样中的任何细胞碎片
上分离；以及
通过病毒颗粒定量技术测量无细胞病毒颗粒。
2.根据权利要求1的方法，其中所述病毒颗粒定量技术选自序列特异性核酸定量、
ELISA、PCR、等温核酸扩增、核酸杂交、原位杂交和电子显微镜。
3.根据权利要求1的方法，其中所述病毒选自HIV、HTLV、HCV、HBV、CMV和EBV。
4.根据权利要求1的方法，其中所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：P鲍姆，M克拉斯克，X吴，
申请(专利权)人：豪夫迈·罗氏有限公司，
类型：发明
国别省市：瑞士;CH