一种促进小分子蛋白在PVDF膜上驻留的转膜液制造技术

本发明专利技术提供了一种促进小分子蛋白在PVDF膜上驻留的转膜液，所述转膜液以8‑20％的异丙醇为PVDF膜活化剂，使用统一的0.45μM PVDF膜就能对小分子蛋白和大分子蛋白同时进行检测，通过优化摸索PVDF膜活化剂的种类和浓度，验证得到新的转膜液配方，即8‑20％的异丙醇作为0.45μM PVDF膜的湿转缓冲液能提高小分子蛋白的驻留效果，重复性高，截留效果好，操作简便，具有广阔的应用前景和巨大的市场价值。

A Transfer Membrane Solution Promoting the Residence of Small Molecular Proteins on PVDF Membranes

【技术实现步骤摘要】
一种促进小分子蛋白在PVDF膜上驻留的转膜液
本专利技术属于生物
，涉及一种促进小分子蛋白在PVDF膜上驻留的转膜液。
技术介绍
蛋白质印迹法(免疫印迹试验)即WesternBlot，是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法，是蛋白定性和定量检测的金标准，主要步骤包括：制备SDS-PAGE胶、SDS-PAGE电泳分离、电泳后转印(将蛋白分子从PAGE中转移至膜上固定)、膜封闭、一抗孵育、二抗孵育、ECL液显色和荧光信号采集分析等。其基本原理是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色，通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中表达情况的信息。蛋白免疫印迹(WesternBlot)是将电泳分离后的细胞或组织总蛋白质从凝胶转移到固相支持物硝酸纤维素膜(NC膜)或聚偏二氟乙烯膜(PVDF膜)上，然后用特异性抗体检测某特定抗原的一种蛋白质检测技术，现已广泛应用于基因在蛋白水平的表达研究、抗体活性检测和疾病早期诊断等多个方面。当前，大部分分子生物学实验室进行WesternBlot时，会使用Millpore公司或者GE等公司的PVDF膜进本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种促进小分子蛋白在PVDF膜上驻留的转膜液，其特征在于，所述转膜液采用异丙醇作为PVDF膜活化剂。

【技术特征摘要】
1.一种促进小分子蛋白在PVDF膜上驻留的转膜液，其特征在于，所述转膜液采用异丙醇作为PVDF膜活化剂。2.根据权利要求1所述的转膜液，其特征在于，所述PVDF膜为0.45μM的PVDF膜。3.根据权利要求1或2所述的转膜液，其特征在于，所述异丙醇的体积浓度为8-20％，优选为10-15％。4.根据权利要求1-3中任一项所述的转膜液，其特征在于，所述转膜的方法为全湿转。5.根据权利要求1-4中任一项所述的转膜液，其特征在于，所述小分子蛋白的大小为5-20kD。6.一种检测小分子蛋白的方法，其特征在于，所述方法采用如权利要求1-5中任一项所述的转膜液。7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：(1)将0.45μMPVDF膜完全浸泡在异丙醇中，摇晃浸润；(2)将步骤(1)浸润的PVDF膜用权利...

【专利技术属性】
技术研发人员：张磊，王文天，赵慧娟，池颖，李慧媛，孙婷，
申请(专利权)人：中国医学科学院血液病医院血液学研究所，
类型：发明
国别省市：天津,12