靶向CD5的嵌合抗原受体及其应用制造技术

本发明专利技术提供了一种编码靶向CD5的嵌合抗原受体的核酸分子，所述嵌合抗原受体包含胞外区、跨膜区和胞内信号转导区，其编码的所述胞外区包含CD5结合结构域，所述CD5结合结构域为如SEQ ID NO.3所示的氨基酸序列。通过流式细胞术、脱颗粒分析实验、ELISA检测NK细胞分泌的细胞因子，证明该CD5 CAR NK细胞对表达CD5的血液肿瘤细胞有很强的杀伤作用，而对不表达CD5的细胞杀伤作用很弱，有效防止了脱靶效应。本发明专利技术嵌合抗原受体CD5 scFv‑CD8α‑4‑1BB‑CD3ζ可用于CD5阳性的淋巴细胞血液肿瘤的治疗。

【技术实现步骤摘要】
靶向CD5的嵌合抗原受体及其应用
本专利技术涉及生物医药
，特别涉及靶向CD5的嵌合抗原受体及其应用。
技术介绍
近年来，嵌合抗原受体(chimericantigenreceptor,CAR)免疫疗法已成为强有力的一种新的过继免疫治疗技术，其对许多实体肿瘤、血液系统肿瘤，尤其是B细胞淋巴瘤治疗效果明显。CAR治疗利用改良的患者的T细胞可以突破MHC限制性直接识别肿瘤抗原，靶向清除恶性肿瘤。CAR-T细胞在血液肿瘤中已经被广泛应用，特别是CD19作为靶抗原的CAR-T细胞免疫治疗已获得突破性进展。然而，CAR-T细胞和恶性T细胞之间靶抗原的共同表达所导致的自我靶向杀伤问题限制了CAR-T在T细胞血液肿瘤中的应用。NK细胞是一种细胞毒性淋巴细胞，为固有免疫系统的重要组成部分。NK细胞因其特殊的识别靶细胞的机制、短暂的生理周期、广泛的肿瘤杀伤能力等优势，被视为同样具有潜力通过CAR修饰增强其抗肿瘤能力的效应细胞。重要的是，NK细胞缺乏与T细胞共享的抗原，有效避免了自我靶向的问题。此外，在许多针对实体瘤和血液恶性肿瘤的临床试验中被验证有效的同时，也被证实几乎没有移植物抗宿主病(graf本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.编码靶向CD5的嵌合抗原受体的核酸分子，所述嵌合抗原受体包含胞外区、跨膜区和胞内信号转导区，其特征在于，其编码的所述胞外区包含CD5结合结构域，所述CD5结合结构域为如SEQ ID NO.3所示的氨基酸序列。

【技术特征摘要】
1.编码靶向CD5的嵌合抗原受体的核酸分子，所述嵌合抗原受体包含胞外区、跨膜区和胞内信号转导区，其特征在于，其编码的所述胞外区包含CD5结合结构域，所述CD5结合结构域为如SEQIDNO.3所示的氨基酸序列。2.根据权利要求1所述的核酸分子，其特征在于，其编码的所述胞外区还包含构建在所述的嵌合抗原受体氨基末端的信号肽或与所述信号肽具有90-99％同一性的氨基酸序列，所述信号肽为CD8α中的信号肽序列或GM-CSF，优选为如SEQIDNO.4所示的信号肽。3.根据权利要求1所述的核酸分子，其特征在于，其编码的所述CD5结合结构域通过铰链区与其编码的所述跨膜区连接，所述铰链区优选为CD8α中的铰链区序列；所述跨膜区为选自以下蛋白质的跨膜结构域或与所述蛋白质具有90-99％同一性的氨基酸序列：T细胞受体的α、β或ζ链、CD3ε、CD45、CD4、CD5、CD8α、CD9、CD16、CD22、CD33、CD37、CD64、CD80、CD86、CD134、4-1BB或CD154。4.根据权利要求1所述的核酸分子，其特征在于，其编码的所述胞内信号转导区还包含共刺激因子。5.根据权利要求4所述的核酸分子，其特征在于，所述共刺激因子为通过选自以下蛋白质或与所述蛋白质具有90-99％同一性的氨基酸序列获得的功能性信号结构域的一种或几种：MHCI类分子、TNF受体蛋白、免疫球蛋白样蛋白质、细胞因子受体、整联蛋白、淋巴细胞活化信号分子、活化NK细胞受体、BTLA、Toll配体受体、OX40、CD2、CD7、CD27、CD28、CD30、CD40、CDS、ICAM-1、LFA-1、4-1BB、B7-H3、CD278、GITR、BAFFR、LIGHT、HVEM、KIRDS2、SLAMF7、NKp80、NKp44、NKp30、NKp46、CD19、CD4、CD8α、CD8β、IL2Rβ、IL2Rγ、IL7Rα、ITGA4、VLA1、CD49α、IA4、CD49D、ITGA6、VLA6、CD49f、ITGAD、CD11d、ITGAE、CD103、ITGAL、CD11α、ITGAM、CD11b、ITGAX、CD11c、CD29、ITGB1、ITGB2、CD18、ITGB7、NKG2D、NKG2C、TN...

【专利技术属性】
技术研发人员：王建祥，王敏，刘倩，徐颖茜，饶青，廖小龙，
申请(专利权)人：中国医学科学院血液病医院血液学研究所，
类型：发明
国别省市：天津,12