一种大观霉素的检测方法技术

本发明专利技术公开了一种大观霉素的检测方法，包括如下步骤：1）分别制备冻干有大观霉素特异性抗体‑胶体金标记物的微孔试剂；2）分别制备具有包被大观霉素‑载体蛋白偶联物的检测线印迹和包被抗抗体的质控线印迹的反应膜；3）将2)制备好的反应膜与样品吸收垫、保护膜、吸水垫、底板组装成试纸；4）将1）和3）制备好的冻干有大观霉素特异性抗体‑胶体金标记物的微孔试剂、微孔条、微孔塞和试纸组装成试纸条。本发明专利技术避免了传统检测中复杂的样品前处理过程，使检测过程简单、快速且具有高的灵敏度，对保证我国食品中大观霉素的有效检测和监控监管，尽快提升我国的食品安全性和食品安全的控制能力将发挥重要作用，具有十分重要意义。

Method for detecting spectinomycin

The invention discloses a method for detection of spectinomycin, which comprises the following steps: 1) were prepared by lyophilization reagent Yt antibody microporous grand colloidal gold marker; 2) were prepared with coated membrane reaction control line blotting detection line spectinomycin carrier protein conjugate blot and the coated antibody; 3) 2) reaction film prepared with the sample absorption pad, protective film, absorbent pad, floor assembly test; 4) 1) 3) and microporous reagents, the prepared freeze-dried with spectinomycin via specific antibody colloidal gold marker micro a hole, microporous plug and strip assembled into strips. The invention avoids the traditional detection in complex sample pretreatment process, the detection process is simple, rapid and has high sensitivity, to ensure our food in spectinomycin detection and monitoring supervision, improve China's food safety and food safety control as soon as possible to force will play an important role, it is important significance.

【技术实现步骤摘要】
一种大观霉素的检测方法
本专利技术涉及一种检测方法，具体是一种大观霉素的检测方法。
技术介绍
大观霉素又称壮观霉素、奇放线菌素、壮观菌素等，为大观链霉菌所产生的一种氨基环醇类抗生素，对革兰氏阴性菌(如布鲁氏菌、克雷伯菌属、变形杆菌、沙门氏菌、巴氏杆菌等)有较强作用，对革兰氏阳性菌(链球菌、葡萄球菌等)作用较弱，对支原体亦有一定作用，是一新型特效专治淋病的抗生素，对淋病奈瑟菌有较强的抗菌作用。能促进动物生长，是良好的动物饲料添加剂，作为兽药广泛应用于畜牧业中。一些不法商贩受经济利益的驱使滥用抗生素，使大量抗生素残留在畜产品中，如果长期食用含有抗生素残留的动物源性食品，也就相当于长期低剂量吸收抗生素，使人体内菌株产生抗生素抗性，给患病时使用抗生素治疗带来不良影响，会破坏机体内环境平衡，造成菌群失调，抗生素过敏体质的人会出现过敏反应，引起免疫性溶血，同时造成食品和环境中药物残留污染的一系列问题。因此，各国政府和国际组织对动物性食品抗生素残留污染十分重视，已成为涉及人类健康的公共卫生热点问题。建立牛、羊奶及制品中大观霉素的残留检测方法对食品安全、进出口贸易等方面都有重要意义。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种大观霉素的检测方法，以解决上述
技术介绍
中提出的问题。为实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：一种大观霉素的检测方法，包括如下步骤：1）分别制备冻干有大观霉素特异性抗体-胶体金标记物的微孔试剂；2）分别制备具有包被大观霉素-载体蛋白偶联物的检测线印迹和包被抗抗体的质控线印迹的反应膜；3）将2)制备好的反应膜与样品吸收垫、保护膜、吸水垫、底板组装成试纸；4）将1）和3）制备好的冻干有大观霉素特异性抗体-胶体金标记物的微孔试剂、微孔条、微孔塞和试纸组装成试纸条；5）配置不同浓度的含有磷钨酸的盐酸大观霉素标准溶液，静置半小时后过滤，以蒸馏水为参比溶液，测定上述不同浓度标准溶液在200~255nm下的吸光度，然后以吸光度为纵坐标，对应标准溶液的浓度为横坐标，绘制标准曲线；6）取待测大观霉素发酵液或成品，加入磷钨酸溶液，静置半小时，稀释定容过滤后作为测试液；以同样处理的不加磷钨酸溶液的待测大观霉素成品为参比溶液，测定测试液在255nm下的吸光度；根据标准曲线，计算大观霉素的浓度。作为本专利技术再进一步的方案：还包括如下步骤：直接将试纸插入包含有检测样品溶液和微孔试剂的混合溶液的微孔中进行检测。与现有技术相比，本专利技术的有益效果是：本专利技术避免了传统检测中复杂的样品前处理过程，使检测过程简单、快速且具有高的灵敏度，对保证我国食品中大观霉素的有效检测和监控监管，尽快提升我国的食品安全性和食品安全的控制能力将发挥重要作用，具有十分重要意义。具体实施方式下面对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。本专利技术实施例中，一种大观霉素的检测方法，包括如下步骤：1）分别制备冻干有大观霉素特异性抗体-胶体金标记物的微孔试剂；2）分别制备具有包被大观霉素-载体蛋白偶联物的检测线印迹和包被抗抗体的质控线印迹的反应膜；3）将2)制备好的反应膜与样品吸收垫、保护膜、吸水垫、底板组装成试纸；4）将1）和3）制备好的冻干有大观霉素特异性抗体-胶体金标记物的微孔试剂、微孔条、微孔塞和试纸组装成试纸条；5）配置不同浓度的含有磷钨酸的盐酸大观霉素标准溶液，静置半小时后过滤，以蒸馏水为参比溶液，测定上述不同浓度标准溶液在255nm下的吸光度，然后以吸光度为纵坐标，对应标准溶液的浓度为横坐标，绘制标准曲线；6）取待测大观霉素发酵液或成品，加入磷钨酸溶液，静置半小时，稀释定容过滤后作为测试液；以同样处理的不加磷钨酸溶液的待测大观霉素成品为参比溶液，测定测试液在200~255nm下的吸光度；根据标准曲线，计算大观霉素的浓度。还包括如下步骤：直接将试纸插入包含有检测样品溶液和微孔试剂的混合溶液的微孔中进行检测。实施例1：本专利技术大观霉素的检测方法，包括如下步骤：1）分别制备冻干有大观霉素特异性抗体-胶体金标记物的微孔试剂；2）分别制备具有包被大观霉素-载体蛋白偶联物的检测线印迹和包被抗抗体的质控线印迹的反应膜；3）将2)制备好的反应膜与样品吸收垫、保护膜、吸水垫、底板组装成试纸；4）将1）和3）制备好的冻干有大观霉素特异性抗体-胶体金标记物的微孔试剂、微孔条、微孔塞和试纸组装成试纸条；5）配置不同浓度的含有磷钨酸的盐酸大观霉素标准溶液，静置半小时后过滤，以蒸馏水为参比溶液，测定上述不同浓度标准溶液在255nm下的吸光度，然后以吸光度为纵坐标，对应标准溶液的浓度为横坐标，绘制标准曲线；6）取待测大观霉素发酵液或成品，加入磷钨酸溶液，静置半小时，稀释定容过滤后作为测试液；以同样处理的不加磷钨酸溶液的待测大观霉素成品为参比溶液，测定测试液在200下的吸光度；根据标准曲线，计算大观霉素的浓度。还包括如下步骤：直接将试纸插入包含有检测样品溶液和微孔试剂的混合溶液的微孔中进行检测。实施例2：本专利技术大观霉素的检测方法，包括如下步骤：1）分别制备冻干有大观霉素特异性抗体-胶体金标记物的微孔试剂；2）分别制备具有包被大观霉素-载体蛋白偶联物的检测线印迹和包被抗抗体的质控线印迹的反应膜；3）将2)制备好的反应膜与样品吸收垫、保护膜、吸水垫、底板组装成试纸；4）将1）和3）制备好的冻干有大观霉素特异性抗体-胶体金标记物的微孔试剂、微孔条、微孔塞和试纸组装成试纸条；5）配置不同浓度的含有磷钨酸的盐酸大观霉素标准溶液，静置半小时后过滤，以蒸馏水为参比溶液，测定上述不同浓度标准溶液在255nm下的吸光度，然后以吸光度为纵坐标，对应标准溶液的浓度为横坐标，绘制标准曲线；6）取待测大观霉素发酵液或成品，加入磷钨酸溶液，静置半小时，稀释定容过滤后作为测试液；以同样处理的不加磷钨酸溶液的待测大观霉素成品为参比溶液，测定测试液在255nm下的吸光度；根据标准曲线，计算大观霉素的浓度。还包括如下步骤：直接将试纸插入包含有检测样品溶液和微孔试剂的混合溶液的微孔中进行检测。实施例3：本专利技术大观霉素的检测方法，包括如下步骤：1）分别制备冻干有大观霉素特异性抗体-胶体金标记物的微孔试剂；2）分别制备具有包被大观霉素-载体蛋白偶联物的检测线印迹和包被抗抗体的质控线印迹的反应膜；3）将2)制备好的反应膜与样品吸收垫、保护膜、吸水垫、底板组装成试纸；4）将1）和3）制备好的冻干有大观霉素特异性抗体-胶体金标记物的微孔试剂、微孔条、微孔塞和试纸组装成试纸条；5）配置不同浓度的含有磷钨酸的盐酸大观霉素标准溶液，静置半小时后过滤，以蒸馏水为参比溶液，测定上述不同浓度标准溶液在255nm下的吸光度，然后以吸光度为纵坐标，对应标准溶液的浓度为横坐标，绘制标准曲线；6）取待测大观霉素发酵液或成品，加入磷钨酸溶液，静置半小时，稀释定容过滤后作为测试液；以同样处理的不加磷钨酸溶液的待测大观霉素成品为参比溶液，测定测试液在210nm下的吸光度；根据标准曲线，计算大观霉素的浓度。还包括如下步骤：直接将试纸插入包含有检测样品溶液和微孔试剂的混合溶液的微孔中进行检测。实施例4：本专利技术大观霉素的检测方法，包括如下步骤：1）分别制备冻干有大观霉素特异性抗体-胶体金标记物的微孔试剂；2）分别制备具有包被大观霉素-载体蛋白偶联物的检测线印迹本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种大观霉素的检测方法，其特征在于，包括如下步骤：1）分别制备冻干有大观霉素特异性抗体‑胶体金标记物的微孔试剂；2）分别制备具有包被大观霉素‑载体蛋白偶联物的检测线印迹和包被抗抗体的质控线印迹的反应膜；3）将2)制备好的反应膜与样品吸收垫、保护膜、吸水垫、底板组装成试纸；4）将1）和3）制备好的冻干有大观霉素特异性抗体‑胶体金标记物的微孔试剂、微孔条、微孔塞和试纸组装成试纸条；5）配置不同浓度的含有磷钨酸的盐酸大观霉素标准溶液，静置半小时后过滤，以蒸馏水为参比溶液，测定上述不同浓度标准溶液:200~255nm下的吸光度，然后以吸光度为纵坐标，对应标准溶液的浓度为横坐标，绘制标准曲线；6）取待测大观霉素发酵液或成品，加入磷钨酸溶液，静置半小时，稀释定容过滤后作为测试液；以同样处理的不加磷钨酸溶液的待测大观霉素成品为参比溶液，测定测试液在255nm下的吸光度；根据标准曲线，计算大观霉素的浓度。

【技术特征摘要】
1.一种大观霉素的检测方法，其特征在于，包括如下步骤：1）分别制备冻干有大观霉素特异性抗体-胶体金标记物的微孔试剂；2）分别制备具有包被大观霉素-载体蛋白偶联物的检测线印迹和包被抗抗体的质控线印迹的反应膜；3）将2)制备好的反应膜与样品吸收垫、保护膜、吸水垫、底板组装成试纸；4）将1）和3）制备好的冻干有大观霉素特异性抗体-胶体金标记物的微孔试剂、微孔条、微孔塞和试纸组装成试纸条；5）配置不同浓度的含有磷钨酸的盐酸大观霉素标准溶液，静置半小时后过滤，以蒸馏水为参比溶液...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴敏芳，徐静，赵春城，胡勇，蒋韦艳，刘金杰，朱倩倩，
申请(专利权)人：无锡艾科瑞思产品设计与研究有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏,32