一种用于检测基因变异的PCR引物设计方法及试剂盒技术

技术编号:8297537 阅读:363 留言:0更新日期:2013-02-06 22:32
本发明专利技术涉及一种用于检测基因变异的PCR引物设计方法及试剂盒,该引物设计方法包括:在基因同源和保守的区域设计正向PCR通用引物,所述正向PCR通用引物的5’端附加一段与基因变异区域野生型完全互补6~20个碱基的寡核苷酸;在变异基因的位置设计与变异基因完全互补的反向引物;所述的试剂盒,包括:dNTPs、Mg2+、Taq?DNA聚合酶、Tris-KCl体系、引物和探针。本发明专利技术的引物设计方法易于设计、可控且扩增灵敏度高;本发明专利技术的试剂盒灵敏度高、特异性强、时间短、使用操作步骤少。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于基因变异的检测方法及试剂盒领域,特别涉及一种用于检测基因变异的PCR引物设计方法及试剂盒
技术介绍
基因变异在生物体中时刻发生,有的变异是无意的,它不影响生物体正常生长,但是,总有一些变异后果非常严重,给人类的生存带来挑战。科学工作者专利技术了许多检测基因变异的方法,具体包括PCR-限制性酶切分析、PCR-SSCP分析、PCR-测序分析、PCR-基因芯片分析、PCR-LDR、连接酶反应LDR、PCR-HRM分析、ARMS-PCR等。其中最为常用方法为PCR-限制性酶切分析、PCR-测序分析、PCR-基因芯片分析、PCR-HRM分析、ARMS-PCR。PCR-限制性酶切分析是针对位点明确、且突变型与野生型在序列上至少存在一种酶切位点差异。PCR完成后,用该酶进行酶切后,测序鉴定。耗时、·繁琐,但灵敏度高。对于有些样品由于野生型和突变型之间无差异酶切位点,导致该方法不可用。PCR-测序分析是突变检测的金标准方法,可发现未知变异位点。实验周期久、灵敏度低(10%左右)。PCR-基因芯片分析是针对大量已知突变位点的有效方法,但是其灵敏度仅能做到59TlO%,且成本较高。PC本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于检测基因变异的PCR引物设计方法,包括:在基因同源和保守的区域设计正向PCR通用引物,所述正向PCR通用引物的5’端附加一段与基因变异区域野生型完全互补6~20个碱基的寡核苷酸;在变异基因的位置设计与变异基因完全互补的反向引物。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:楼敬伟李丙亮谢彩霞
申请(专利权)人:上海宝藤生物医药科技有限公司
类型:发明
国别省市:

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