一种检测DNA中5-甲基胞嘧啶的化学方法技术

本发明专利技术涉及一种检测DNA中5-甲基胞嘧啶的化学方法，该方法采用的两种化合物分别为取代的苯磺酰氯胺钠盐和取代的苯磺酰溴胺钠盐，具体检测步骤如下：先用取代的苯磺酰氯胺钠盐与带荧光标记的DNA中的胞嘧啶反应，再用取代的苯磺酰溴胺钠盐与带荧光标记的DNA中的胞嘧啶和5-甲基胞嘧啶反应，然后用哌啶处理，通过比较DNA聚丙烯酰胺变性胶中两个反应的DNA带，可以清楚的看到5-甲基胞嘧啶的位置和个数。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种DNA中5-甲基胞嘧啶的化学检测方法。
技术介绍
表观遗传学被定义为研究基因表达水平(量变)信息的遗传。DNA甲基化是表观遗传学的主要形式。DNA甲基化与肿瘤有极大的关系。2003年，美国《science》杂志同期刊登的三篇文章已经肯定了 DNA的总体低甲基化导致的基因不稳定性对肿瘤的发生起着构成原因的作用。在老鼠模型中，目前已经证明从胚胎到成体发育过程中，利用DNA甲基化转移酶(DNMT)的突变导致染色体去甲基化，可以引起老鼠基因组不稳定和导致淋巴瘤。一般来说。肿瘤细胞DNA总体甲基化水平低于正常细胞，但某些特定基因(如肿瘤抑制基因)CpG岛却处 于高甲基化状态。DNA异常甲基化发生频率高的分子可作为临床监控病程和评估疗效的较好指标。同时，DNA异常甲基化发生频率高的分子也有望成为肿瘤早期诊断的肿瘤标志物。且在癌症防治上，可防止癌变早期基因组稳定性的发生，从而减少肿瘤易感性突变的可能，达到癌症的早期预防。DNA甲基化同时还与单亲遗传病、老化等也有很大关系。随着年龄的老化，基因组总体DNA甲基化水平逐渐降低。现有的甲基化化学检测方法主要有亚硫酸氢钠法、锇酸钾法及高本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种检测DNA中5？甲基胞嘧啶的化学方法，其特征在于，包括以下步骤：1)取代的苯磺酰氯胺钠盐与带荧光标记的DNA样品中的胞嘧啶反应：以乙腈为溶剂，分别加入缓冲溶液、催化剂和取代的苯磺酰氯胺钠盐溶液，振荡离心，加入DNA样品后进行孵育；2)取代的苯磺酰溴胺钠盐与带荧光标记的DNA样品中的胞嘧啶和5？甲基胞嘧啶反应：以乙腈为溶剂，分别加入缓冲溶液、去离子水和取代的苯磺酰溴胺钠盐溶液，震荡离心，加入DNA样品后进行孵育；3）确定5？甲基胞嘧啶的位置和个数：将步骤1）和2）孵育后的DNA样品除盐三次，再用哌啶处理，震荡离心后干燥，再将处理后的DNA样品上样，比较DNA聚丙烯酰胺变性胶中两个反应的DNA...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：周翔，王天露，翁小成，
申请(专利权)人：武汉大学，
类型：发明
国别省市：