羊痘病毒属病毒等温扩增技术快速检测用引物、试剂盒和检测方法技术

本发明专利技术公开了一种基于ＬＡＭＰ等温扩增技术快速检测羊痘病毒属病毒用引物、试剂盒及检测方法。该试剂盒根据靶序列上６个区域设计４条引物，２条外引物和２条内引物，还包括２×ＬＡＭＰｂｕｆｆｅｒ缓冲液、ＢｓｔＤＮＡ聚合酶管、阳性对照、阴性对照和灭菌去离子水。利用本试剂盒在６３℃左右的温度下经１５～４５ｍｉｎ的反应后，便可以根据肉眼观察反应结果判断是否含有羊痘病毒属病毒。本发明专利技术可以在等温条件下快速、高效、特异性地扩增靶序列，且操作简便，不需要昂贵的仪器和试剂，可以凭肉眼判断结果，对操作人员没有技术上的要求，检测成本低，检测时间短。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及动物疫病分子生物学检验方法及检验试剂领域，具体涉及一种羊痘病毒属病毒等温扩散技术快速检测用引物、试剂及其检测方法。
技术介绍
羊痘病毒属病毒(Capripoxvirus, CPV)主要包括山羊痘病毒(GoatpoxVirus, GTPV)、绵羊痘病毒(Sheeppox Virus, SPPV)和牛挖瘡皮肤病病毒(Lumpy SkinDisease Virus，LSDV)三种，能引起山羊、绵羊和牛的皮肤、器官表面广泛性结节和水肿，病畜产乳量急剧减少，皮毛品质极大下降，造成巨大经济损失。山羊痘、绵羊痘病毒引起的羊痘又名羊“天花”，是羊的一种急性、热性、接触性传染病。绵羊痘和山羊痘，被我国列为一类传染病，对畜牧业养殖影响重大。据不同毒株的毒力差异，易感羊群的致死率可达10% 58%或75% 100%不等。羔羊致死率可达100%，妊娠母羊极易流产。同时，因自由贸易受到限制造成了国家税收的下降，致使此病也成为了重要的经济疾病。该病呈世界性分布，我国近年来在如广西、贵州、黑龙江、甘肃等地也有发生。牛疙瘩皮肤病病毒引起牛的疙瘩皮肤病，又称牛结节性皮炎或块状皮肤病，是以患牛发热、皮肤本文档来自技高网...

【技术保护点】
１．一种羊痘病毒属病毒等温扩增技术快速检测用试剂盒，其特征在于：它包括扩增反应液管、钙黄绿素显色剂管、阳性对照管、阴性对照管和灭菌去离子水管，其中：所述扩增反应液管　管内由以下反应液组成：ＤＮＡ序列为ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ１的６０　ｍｍｏｌ／Ｌ的羊痘病毒内引物上游１．０　μＬ；ＤＮＡ序列为ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ２的６０　ｍｍｏｌ／Ｌ的羊痘病毒内引物下游１．０　μＬ；ＤＮＡ序列为ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ３的５　ｍｍｏｌ／Ｌ的羊痘病毒外引物上游１．０　μＬ；ＤＮＡ序列为ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ４的５ｍｍｏｌ／Ｌ的羊痘病毒外引物下游１．０　μＬ；２×ＬＡＭＰ　ｂｕｆｆｅｒ　缓冲液　１２．５μＬ；５Ｕ／μＬ　Ｂｓｔ　ＤＮ...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：李应国，
申请(专利权)人：重庆出入境检验检疫局检验检疫技术中心，
类型：发明
国别省市：85