藤黄酸在制备抗肿瘤转移药中的应用制造技术

本发明专利技术属于制药领域，公开了藤黄酸在制备抗肿瘤转移药中的应用。本发明专利技术提供了藤黄酸在制备抗肿瘤转移药中的新应用，特别是在制备抗肝癌、胃癌、乳腺癌、肠癌或肺癌转移的药物中的应用。藤黄酸对肿瘤转移具有良好的抑制作用，对肿瘤细胞的抑制作用具有较好的选择性，对转移相关基因有明显影响，对转移相关蛋白有明显影响。

【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及藤黄酸在制备抗肿瘤药中的应用，特别是涉及藤黄酸在制备抗肿瘤转移药中的应用。
技术介绍
世界上恶性肿瘤的发生率继续呈上升趋势，2000年世界卫生组织统计全球的癌症新发病例达到1千万例，有600万例癌症死亡，其中死亡原因大多为恶性肿瘤晚期转移所致。癌症已经成为威胁人类生命健康的主要疾病之一，怎样克服肿瘤细胞的复发和转移成为人类攻克癌症道路上最大的障碍。肿瘤侵袭是指恶性肿瘤离开原发生长部位，突破基底膜和细胞外基质构成的屏障，侵犯毗邻的正常组织，被侵袭的组织发生变性和坏死。肿瘤转移指恶性肿瘤细胞脱离其原发部位，通过各种渠道的转运到不连续的组织继续增殖生长，形成同样性质肿瘤的过程。侵袭和转移互为依存，即一个伴随另一个出现。肿瘤发生侵袭和转移是一个复杂多步骤的过程，一般可分为以下几步肿瘤细胞从原发肿瘤病灶脱离、肿瘤细胞穿过细胞外基质(ECM)浸润、迁移于血管内皮细胞、肿瘤细胞进入循环系统，随着血流到达并停留于远处位点的血管壁、肿瘤细胞穿出血管，通过ECM，最后在特定的组织或器官形成转移灶。近年来肿瘤化疗取得了很大的进展，肿瘤患者生存时间明显延长，但由于化疗药物的毒副作用，使临床应用受到一定限制。目前细胞毒性药物依然是抗肿瘤的基础和主要途径，但真正能够达到高效低毒目标的药物少之又少，其中能够抑制肿瘤转移的药物更少。使用细胞毒性药物虽然能够杀死肿瘤细胞，但同时也往往对正常的细胞产生伤害，因此使用剂量不宜过大，在化疗过程中也不断应用新技术提高药物在肿瘤局部高浓度分布(如定向注射、制成靶向前体药物等)，以减轻全身毒副反应，但由于这些药物不能有效抑制肿瘤细胞的转移，常常是肿瘤原发灶有所减轻，但身体其他部分又出现多处转移灶，最终导致病情恶化。藤黄酸(Gambogic Acid，GA，C38H44O8)是中药藤黄中有效成分之一。藤黄系藤黄科植物藤黄所分泌的干燥树脂。实验研究结果表明，藤黄酸的抗癌作用与一般的化疗抗癌药有所区别，能选择性的杀死癌细胞，而对正常的造血系统和白细胞没有影响。这为寻找新型抗癌药提供新颖的前景，同时有可能启示新的抗癌机理。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供藤黄酸在制药领域中的新用途，即藤黄酸在制备抗肿瘤转移药中的应用。本专利技术的目的是通过下列措施来实现的藤黄酸在制备抗肿瘤转移药中的应用。更进一步，藤黄酸在制备抗肝癌、胃癌、乳腺癌、肠癌或肺癌转移的药物中的应用。有益效果1、藤黄酸对人肝癌SMMC-7721及QGY-7701细胞株、人肺腺癌SPC-A1细胞株、人乳腺癌MDA-MB-231、人胃癌MGC-803及SGC-7901细胞株的体外生长具有显著的抑制作用。2、藤黄酸对肿瘤转移具有良好的抑制作用。3、藤黄酸对肿瘤细胞的抑制作用具有较好的选择性。4、藤黄酸对肿瘤细胞的抑制作用表现在(1)对接种的人乳腺癌、肝癌、肺癌、胃癌、肠癌及其它瘤株的裸小鼠转移模型又显著的抗转移作用；(2)对转移相关基因有明显影响；(3)对转移相关蛋白有明显影响。附图说明图1为藤黄酸作用于人乳腺癌细胞MDA-MB-231 48h量效曲线。图2为空白对照组裸小鼠肺转移结节实体照片。图3为ADM(2mg/kg)对照组裸小鼠肺转移结节实体照片。图4为藤黄酸高剂量(8mg/kg)组裸小鼠肺转移结节实体照片。图5为藤黄酸低剂量(4mg/kg)组裸小鼠肺转移结节实体照片。图6为藤黄酸作用于MDA-MB-231细胞后对MMP-2基因表达的影响的RT-PCR结果图，其中Actin为内参；1为NS；2为Taxol(0.30μM)；3为GA(3.00μM)；4为GA(1.50μM)；5为GA(0.75μM)；6为GA(0.30μM)。图7为藤黄酸作用于MDA-MB-231细胞后对MMP-2基因表达的影响的柱形图，是将图6经灰度扫描后各组表达转化为数值，除去actin的内参值后得到相对值。图8为藤黄酸作用于MDA-MB-231细胞后对TIMP-1基因表达的影响的RT-PCR结果图，其中Actin为内参；1为NS；2为Taxol(0.30μM)；3为GA(3.00μM)；4为GA(1.50μM)；5为GA(0.75μM)；6为GA(0.30μM)。图9为藤黄酸作用于MDA-MB-231细胞后对TIMP-1基因表达的影响的柱形图，是将图8经灰度扫描后各组表达转化为数值，除去actin的内参值后得到相对值。图10为藤黄酸作用于MDA-MB-231细胞后对TIMP-2基因表达的影响的RT-PCR结果图，其中Actin为内参；1为NS；2为Taxol(0.30μM)；3为GA(3.00μM)；4为GA(1.50μM)；5为GA(0.75μM)。图11为藤黄酸作用于MDA-MB-231细胞后对TIMP-2基因表达的影响的柱形图，是将图10经灰度扫描后各组表达转化为数值，除去actin的内参值后得到相对值。图12为藤黄酸对MDA-MB-435裸小鼠肺转移模型瘤组织TIMP-1影响的RT-PCR图，其中GAPDH为内参；NS为未给药空白对照组；ADM为阿霉素(2mg/kg)阳性对照组；GA8为藤黄酸(8mg/kg)组；GA4为藤黄酸(4mg/kg)组。图13为藤黄酸对MDA-MB-435裸小鼠肺转移模型瘤组织TIMP-1影响的柱形图，是将图12经灰度扫描后各组表达转化为数值，除去GAPDH的内参值后得到相对值。图14为藤黄酸对MDA-MB-435裸小鼠肺转移模型瘤组织TIMP-2影响的RT-PCR图，其中GAPDH为内参；NS为未给药空白对照组；ADM为阿霉素(2mg/kg)阳性对照组；GA8为藤黄酸(8mg/kg)组；GA4为藤黄酸(4mg/kg)组。图15为藤黄酸对MDA-MB-435裸小鼠肺转移模型瘤组织TIMP-2影响的柱形图，是将图14经灰度扫描后各组表达转化为数值，除去GAPDH的内参值后得到相对值。图16为藤黄酸作用于MDA-MB-231细胞后对MMP-2和MMP-9蛋白及其活性影响的电泳图，图中NS为未给药对照组；1为藤黄酸给药(8μM)组；2为藤黄酸给药(0.4μM)组；3为藤黄酸给药(0.08μM)组。图17为藤黄酸作用于MDA-MB-231细胞后对MMP-2和MMP-9蛋白及其活性影响的柱形图，是将图16经灰度扫描后各组表达转化为数值得到的相对值。具体实施例方式以下通过实施例对本专利技术作进一步的阐述，但不对本专利技术作任何限制。本专利技术实施例所用的藤黄酸的制备可参见专利CN1557816A公开的内容，也可以采用市售的藤黄酸标准品。实施例1 藤黄酸对乳腺癌细胞株体外生长抑制作用体外培养乳腺癌细胞株MDA-MB-231，加入藤黄酸，测定藤黄酸作用48h后乳腺癌细胞的情况，结果表明，IC50为3.16μM，并呈现良好量效曲线(见图1)。实施例2 藤黄酸对裸小鼠肺转移模型药效作用取对数生长的体外培养的乳腺癌细胞MDA-MB-435，细胞浓度调整为1×107/ml。无菌条件下，接种于裸小鼠左侧第二乳头的脂肪垫，接种量为0.1ml/只(细胞数为1.0×106/只)。2周后将动物随机分组。藤黄酸高剂量(8mg/kg)组、藤黄酸低剂量(4mg/kg)组、ADM(阿霉素)对照组每周静脉注射给药一次，共10次；空白对照组给等量生理盐水。停药后11天处死动物，称体本文档来自技高网...

【技术保护点】
藤黄酸在制备抗肿瘤转移药中的应用。

【技术特征摘要】
1.藤黄酸在制备抗肿瘤转移药中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其...

【专利技术属性】
技术研发人员：尤启冬，齐琦，顾红燕，肖伟，郭青龙，袁胜涛，赵丽，刘娓，张坤，戴翔翎，凌娅，
申请(专利权)人：中国药科大学，江苏康缘药业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：84[中国|南京]