一种含酪氨酸激酶抑制剂的药物组合物及其在制备抗肿瘤转移药物中的应用制造技术

本发明专利技术的目的是提供一种含酪氨酸激酶抑制剂的药物组合物及其在抗肿瘤转移中的应用，其所述的药物组合物包含以物质的量比为10:1‑10的熊果酸和厄洛替尼，两者联用可以起到协同抗肿瘤转移的效果。其联用对恶性肿瘤细胞的迁移、侵袭等具有显著的抑制作用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种药物组合物，属于药物组合物领域，具体的属于抗肿瘤转移的药物组合物领域。
技术介绍
熊果酸即3β-羟基-熊果-12-烯-28-酸(3β-hydroxy-urs-12-en-28-oic acid，简称UA)，又名乌索酸、属于a-香树脂醇(a-amyrin)型五环三萜类化合物，其相对分子量为456.68，分子式为C30H48O3，结构如式Ⅰ所示是自然界中分布较广的天然活性化合物，主要以游离或糖苷的形式存在，其广泛分布于枇杷叶、熊果、山楂、白花蛇舌草等多种天然植物中，也是许多传统中药的主要活性成分之一, 具有广泛的药理作用，如抗癌、保肝、抗炎、抗病毒、抗氧化等其中以抗癌活性最为显著，不仅对多种致癌物有抵抗作用，而且对多种肿瘤细胞在体内、外均有抑制作用。因其副作用小，毒性低，显示出较大的临床应用潜力。近年来国内外对UA的抗肿瘤研究日趋深入，并发现其在肿瘤预防、治疗以及防止晚期复发转移等方面有着独特的优势及潜在的应用前景。专利N201510097801.9公开了一种含有熊果酸和环磷酰胺的药物组合物，所述组合物既可以增强单组分的抗肿瘤药效，也能降低其对正常组织的毒性，从而提高肿瘤治疗的效果，在肿瘤治疗领域具有很大的应用前景。专利N03150714.X公开了熊果酸对人肝癌细胞、人乳腺癌细胞、人淋巴瘤细胞、人成淋巴细胞白血病和人急性成淋巴细胞白血病、人急性早幼粒白血病及人慢性髓性白血病都有细胞毒效应。厄洛替尼（Erlotinb, 简称El），结构如式Ⅱ所示，是近年来才上市的治疗晚期非小细胞肺癌药物，在国际及国内肺癌指引中厄洛替尼均被列为晚期非小细胞肺癌二线治疗药物之一，它是通过口服治疗非小细胞肺癌的靶向药物。表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂（the epidermal growth factor receptor tyrosine kinase inhibitor, EGFR-TKI）是重要的靶向治疗药物之一，是以EGFR为靶点的小分子药物，通过竞争性结合受体的ATP或底物结合区域，从源头阻断其信号传导而发挥作用。厄洛替尼作为EGFR小分子酪氨酸激酶抑制剂，因其有口服简便、副作用小、易于被患者接受而临床应用广泛。结构如图2所示。专利N201510360703.X公开了苦鬼臼毒和厄洛替尼联合用药用药肺癌的治疗，两者联合使用后会产生协同抗肺癌作用；专利N 200680041064.X公开了将N-辛二酰苯胺异羟肟酸和厄洛替尼联合使用用于肺癌、乳腺癌、胰腺癌等多种癌症的治疗。以不同癌细胞系作为研究对象，通过将熊果酸和厄洛替尼联合用药，对不同癌细胞系进行体外抗癌活性测试，结果表明，熊果酸和厄洛替尼的联合使用对恶性肿瘤细胞，特别是对非小细胞肺癌的增殖迁移、侵袭等具有显著的抑制作用，呈浓度和时间依赖性的抑制非小细胞肺癌的增殖。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种含酪氨酸激酶抑制剂的药物组合物及其在制备抗肿瘤转移药物中的应用，通过将酪氨酸激酶抑制剂厄洛替尼与高效低毒的抗肿瘤天然产物熊果酸进行联合用药，考察其联合用药后对癌细胞的抗转移作用，其可望获得较为安全可靠的抑制肿瘤转移的新型候选药物。一种含酪氨酸激酶抑制剂的药物组合物及其在抗肿瘤转移中的应用，其所述的药物组合物包含以物质的量比为10:1-10的熊果酸和厄洛替尼，两者联用可以起到协同抗肿瘤转移的效果。附图说明图1.熊果酸和厄洛替尼单独使用及联合使用24h对A549细胞增殖的抑制结果；图2.熊果酸和厄洛替尼单独使用及联合使用24 h对H1975细胞增殖的抑制结果；图3.熊果酸和厄洛替尼单独使用及联合使用24 h对H1299细胞增殖的抑制结果；图4.熊果酸和厄洛替尼单独使用及联合使用24 h对A549细胞侵袭能力的抑制结果；图5.熊果酸和厄洛替尼单独使用及联合使用24 h对A549细胞侵袭的抑制率；图6.熊果酸和厄洛替尼单独使用及联合使用24 h后对A549细胞迁移能力的抑制结果；图7.熊果酸和厄洛替尼单独使用及联合使用24 h对A549细胞迁移的抑制率；图8.熊果酸和厄洛替尼单独使用及联合使用48 h后对A549细胞迁移能力的抑制结果；图9.熊果酸和厄洛替尼单独使用及联合使用48 h对A549细胞迁移的抑制率；图10. 熊果酸和厄洛替尼单独使用及联合使用72 h后对A549细胞迁移能力的抑制结果；图11. 熊果酸和厄洛替尼单独使用及联合使用72 h对A549细胞迁移的抑制率；图12. 熊果酸和厄洛替尼单独使用及联合使用于A549细胞对EGFR蛋白表达水平的影响；图13. 熊果酸和厄洛替尼单独使用及联合使用于H1975细胞对EGFR蛋白表达水平的影响。具体实施方式为了使本专利技术所述的内容更加便于理解，下面结合具体实施方式对本专利技术所述的技术方案做进一步的说明，但是本专利技术不仅限于此。实施例1熊果酸和厄洛替尼单独使用及联合使用24 h对不同肺癌细胞系的增殖抑制作用：采用标准MTT比色法测定了熊果酸和厄洛替尼不同联合比例对不同肺癌细胞系的增殖抑制活性,结果如图1-3所示。如图1-3所示，当熊果酸（10 μM）和厄洛替尼（1-10 μM）在低浓度范围内联合用药24 h后，对癌细胞无明显增殖抑制作用且对正常细胞的毒副作用小。因此后续选择将安全有效的低剂量浓度（无明显细胞杀伤作用）的熊果酸和厄洛替尼联用，继续研究其对肺癌细胞侵袭及转移的抑制能力，以探索其在抗肿瘤转移领域应用的潜力。实施例2熊果酸和厄洛替尼单独使用以及联合使用对A549细胞株侵袭能力的影响A549细胞先加无血清无酚红培养基饥饿过夜，消化、离心收集的细胞用含不同药物浓度的空白培养基悬浮。取12孔板，在小室的上室中加入500 μL含不同药物浓度的细胞悬浮液（约5×105/孔），下室加500 μL含10%小牛血清的培养基，药物作用24 h，取出小室，用4%的多聚甲醛固定20 min，用棉签擦掉上层未迁移细胞，用PBS洗3次，用0.1％结晶紫染色40 min，用PBS洗3次，将小室的底膜取下，封片保存，倒置显微镜下随机5个视野下拍照，统计迁移的细胞数，结果如图4、5所示。实验结果如图4、5所示，熊果酸和厄洛替尼单独使用以及联合使用24 h后对A549细胞株侵袭能力的检测，结果表明, 空白对照组、UA（浓度在10 μM条件下）和厄洛替尼（浓度在10-40 μM条件下）单独使用组，穿过微孔滤膜的细胞数明显高于熊果酸和厄洛替尼（浓度在1-8 μM条件下）联合用药组；两者联用细胞侵袭能力明显受到了抑制，可以减少厄洛替尼的给药剂量。实施例3熊果酸和厄洛替尼单独使用以及联合使用对A549细胞株迁移能力的影响取对数生长期的细胞（约3×106/孔）接种于该板中，置于37℃,5% CO2 的培养箱中培养24 h,待细胞接近融合后，用白色枪头在孔板的1/4、1/2、3/4处垂直的划三条平行线，用PBS清洗细胞3次，在荧光显微镜下拍划痕宽带，记录下所拍图片的坐标轴。加入含不同药物浓度的培养基，置于37℃,5% CO2 的培养箱中培养24、48、72 h在同一部位再次拍照，测定迁移距离，对比各组两次拍照的迁移距离，结果如图6-11所示。实验结果如图6-11所示，熊果酸和厄洛替尼单独使用以及联合使用24、48、72 h后对A549本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种具有抗肿瘤转移活性的药物组合物，其特征在于包含物质的量比为10:1‑10的熊果酸和厄洛替尼。

【技术特征摘要】
1.一种具有抗肿瘤转移活性的药物组合物，其特征在于包含物质的量比为10:1-10...

【专利技术属性】
技术研发人员：邵敬伟，郑桂容，江凯，
申请(专利权)人：福州大学，
类型：发明
国别省市：福建;35