【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及纳米领域，具体涉及一种基于壳聚糖载多肽纳米凝胶系统及其制备方法、应用。
技术介绍
1、蛋白和多肽具有广泛的生物功能，包括调节基因的表达，催化反应的发生，调控信号的转导以及免疫相关细胞因子的分泌。蛋白和多肽在生物体中对这些生物化学过程起到关键作用，同时发现它们的一些功能涉及到各种疾病的病理条件的产生，如糖尿病、癌症。自从1982年美国食品和药物管理局(fda)批准重组人胰岛素，越来越多的蛋白质和多肽候选药物被用于不同疾病的治疗研究。然而此类药物其本身的物理化学性质使它们成为药物及剂型的开发受到许多限制。蛋白和多肽药物通常采用注射途径给药，但即使是静脉注射，由于蛋白和多肽在体内的循环半衰期较短，不能充分实现最佳治疗效果。其他给药途径，如口服途径也具有非常明显的缺点，蛋白和多肽类药物大分子量和亲水性的特点，使其具有较差的口服生物利用度，并且蛋白和多肽在胃肠道环境中非常不稳定，易被水解和酶解，从而发生团聚。为了解决蛋白和多肽类药物的递送问题，大量利用不同技术、不同方法的研究已经开展，包括蛋白和多肽结构的化学修饰、添加酶抑制剂或吸收促进剂、使用纳米颗粒载体。其中使用纳米载体包裹并递送蛋白和多肽药物是较为常用的药物递送策略。
2、纳米载体为大小为1μm以下的颗粒分散体或固体颗粒，制备材料可以为脂质、金属、蛋白、多肽和合成聚合物中的一种或多种结合。纳米级别的药物递送系统能够增强胶束稳定性、刺激响应性释放以及细胞内的药物递送。在这些体系中，纳米凝胶即纳米大小的水凝胶颗粒，由于其潜在的性能，引起科研学者广泛研究将其应用于
3、本专利技术所述的多肽，包括但不仅仅局限于来源于trpm8(transient receptorpotential melastatin 8，瞬时受体电位阳离子通道亚家族m成员)蛋白的肽段。多肽t2，即多肽抗原t2，是trpm8蛋白编号为1074～1094之间的肽段，其氨基酸序列为：cseem rhrfrqldtk lndlk g，结构式如下所示。多肽t2具备治疗慢性前列腺炎(cp/cpps)和前列腺癌的潜力，但其作为活性大分子药物在制剂开发过程中面临着和上述蛋白/多肽类药物同样的挑战。
4、
5、多肽t2
6、针对多肽类药物的诸多难题：如何能高效荷载多肽同时将其递送至靶向部位，并且能够充分保护多肽，减少环境对多肽的影响，释放后的多肽是否依然具有治疗效果等，都是目前多肽类药物递送系统设计开发急需解决的难题。
7、本专利技术的创新之处在于：针对多肽的特点，以及来源于trpm8蛋白的t2多肽抗原的治疗潜力，设计了基于壳聚糖的t2多肽抗原纳米凝胶载体，为多肽提供了高包封率、高载药量的纳米载体。该纳米凝胶载体能够持久地释放被包裹的多肽抗原，加强髓源性树突状细胞对与纳米凝胶结合的抗原的摄取和进一步增强抗原的免疫反应。t2多肽抗原纳米凝胶具备多途径给药的能力，其中皮下注射给药后具备提高t2多肽抗原活化树突状细胞，刺激免疫应答效应的能力。因此壳聚糖纳米凝胶载体具备类似免疫佐剂效应功能，能够保护多肽抗原进而增强其在抗原呈递细胞，尤其是髓源性树突细胞中的摄取，并且壳聚糖纳米凝胶可降解、生物相容性高，不同于免疫佐剂会对机体产生较大的毒性，是一种非常有前景的纳米载体应用于免疫治疗。
技术实现思路
1、本专利技术是针对多肽类药物的难题，构建能够高效荷载多肽的纳米凝胶系统。
2、本专利技术的一个目的是构建基于壳聚糖荷载来源于trpm8蛋白的多肽的纳米凝胶系统，该纳米凝胶系统能够提高t2多肽在体内外的稳定性，能够帮助t2多肽更好地跨过细胞膜将其递送到细胞内，并完成胞内药物递送。
3、本专利技术的另一目的是提供上述基于壳聚糖的t2多肽纳米凝胶系统的制备方法及应用。
4、本专利技术提供的基于壳聚糖载多肽的纳米凝胶系统包括：t2多肽，壳聚糖，三聚磷酸钠、羧甲基壳聚糖。其中，所述t2多肽与三聚磷酸钠、壳聚糖以及/或者羧甲基壳聚糖通过静电作用结合形成纳米凝胶颗粒，并且所述t2多肽荷载于纳米凝胶三维网状系统中。
5、一种基于壳聚糖的多肽的纳米凝胶系统，其特征在于，其由多肽、壳聚糖、三聚磷酸钠和羧甲基壳聚糖配制而成。
6、所述的纳米凝胶系统，其特征在于，所述壳聚糖和三聚磷酸钠的用量质量比为3～8︰1。
7、所述的纳米凝胶系统，其特征在于，所述壳聚糖溶液质量浓度为0.5～3mg/ml，所述的壳聚糖溶液初始ph为4.0～6.5。
8、所述的纳米凝胶系统，其特征在于，所述壳聚糖和三聚磷酸钠混合时磁力搅拌转速为500～1000rpm/min，三聚磷酸钠与壳聚糖溶液的混合时间为10～60min。
9、所述的纳米凝胶系统，其特征在于，所述多肽为t2多肽抗原，其氨基酸序列为：cseem rhrfr qldtk lndlk g。
10、所述的纳米凝胶系统，其特征在于，所述t2多肽与壳聚糖用量质量比为1:2～6，所述t2多肽的质量浓度为0.25～1.5mg/ml。
11、所述的纳米凝胶系统，其特征在于，加入羧甲基壳聚糖，并且所述壳聚糖与羧甲基壳聚糖用量质量比为3～1:1～3。
12、所述的纳米凝胶系统，其特征在于，所述壳聚糖溶液质量浓度为0.5～2.0mg/ml；所述羧甲基壳聚糖质量浓度为0.5～1.5mg/ml，所述t2多肽的质量浓度为0.25～1.0mg/ml，得到荷载t2多肽的壳聚糖-羧甲基壳聚糖纳米凝胶。
13、进一步而言：
14、本专利技术提供一种针对上述基于壳聚糖的t2多肽抗原纳米凝胶系统的制备方法，包括以下步骤：
15、步骤一：取定量三聚磷酸钠、t2多肽、羧甲基壳聚糖分别溶解于去离子水中，壳聚糖溶解于醋酸溶液中。
16、步骤二：将步骤一的t2多肽和三聚磷酸钠溶液，以及/或者壳聚糖溶液，以及或者空白壳聚糖纳米凝胶溶液混合，通过离子凝胶法得到荷载t2多肽的壳聚糖纳米凝胶(t2/csngs)。
17、步骤三：加入步骤一的羧甲基壳聚糖，通过离子凝胶法和/或聚电解质凝胶法得到荷载t2多肽的壳聚糖-羧甲基壳聚糖纳米凝胶(t2/cs-cmcs ngs)。
18、根据本专利技术一实本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种基于壳聚糖的多肽的纳米凝胶系统，其特征在于，其由多肽、壳聚糖、三聚磷酸钠和羧甲基壳聚糖配制而成。
2.根据权利要求1所述的纳米凝胶系统，其特征在于，所述壳聚糖和三聚磷酸钠的用量质量比为3～8︰1。
3.根据权利要求2所述的纳米凝胶系统，其特征在于，所述壳聚糖溶液质量浓度为0.5～3mg/mL，所述的壳聚糖溶液初始pH为4.0～6.5。
4.根据权利要求2～3任一所述的纳米凝胶系统，其特征在于，所述壳聚糖和三聚磷酸钠混合时磁力搅拌转速为500～1000rpm/min，三聚磷酸钠与壳聚糖溶液的混合时间为10～60min。
5.根据权利要求1所述的纳米凝胶系统，其特征在于，所述多肽为T2多肽抗原，其氨基酸序列为：CSEEM RHRFR QLDTK LNDLK G。
6.根据权利要求5所述的纳米凝胶系统，其特征在于，所述T2多肽与壳聚糖用量质量比为1:2～6，所述T2多肽的质量浓度为0.25～1.5mg/mL。
7.根据权利要求1所述的纳米凝胶系统，其特征在于，加入羧甲基壳聚糖，并且所述壳聚糖与羧甲基壳聚糖用
8.根据权利要求7所述的纳米凝胶系统，其特征在于，所述壳聚糖溶液质量浓度为0.5～2.0mg/mL；所述羧甲基壳聚糖质量浓度为0.5～1.5mg/mL，所述T2多肽的质量浓度为0.25～1.0mg/mL，得到荷载T2多肽的壳聚糖-羧甲基壳聚糖纳米凝胶。
9.根据权利要求1-8任意一项所述的纳米凝胶系统的制备方法，包括以下步骤：
10.根据权利要求1至8中任一项所述纳米凝胶系统在制备治疗前列腺癌或慢性前列腺炎的药物中的应用。
...【技术特征摘要】
1.一种基于壳聚糖的多肽的纳米凝胶系统，其特征在于，其由多肽、壳聚糖、三聚磷酸钠和羧甲基壳聚糖配制而成。
2.根据权利要求1所述的纳米凝胶系统，其特征在于，所述壳聚糖和三聚磷酸钠的用量质量比为3～8︰1。
3.根据权利要求2所述的纳米凝胶系统，其特征在于，所述壳聚糖溶液质量浓度为0.5～3mg/ml，所述的壳聚糖溶液初始ph为4.0～6.5。
4.根据权利要求2～3任一所述的纳米凝胶系统，其特征在于，所述壳聚糖和三聚磷酸钠混合时磁力搅拌转速为500～1000rpm/min，三聚磷酸钠与壳聚糖溶液的混合时间为10～60min。
5.根据权利要求1所述的纳米凝胶系统，其特征在于，所述多肽为t2多肽抗原，其氨基酸序列为：cseem rhrfr qldtk lndlk g。
6.根...
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。