【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种传感器，尤其涉及一种集成双酶级联传感器和用于即时血糖含量测定的纸基比色传感器，属于含酶的测定。
技术介绍
1、在目前，已经开发了许多用于检测葡萄糖的方法，例如荧光法、比色法、电化学法、化学发光法等等。但这些方法大都存在操作复杂、成本高、难以实现商品化等缺点。特别是对于商用血糖仪来说，因为带有额外的信号读取系统，这不仅大大增加了检测成本，并且复杂的操作系统对老年人并不友好。另外，对于一些商业化葡萄糖检测试剂盒来说，检测液中的酶必须在特定条件下进行储存，保质期短，且容易受到周围环境的干扰。对于mof的合成来说，大部分现有的制备方法需要高温、高压、有机溶剂、超长反应时间等苛刻条件，对实验室仪器的要求较高，并且对环境很不友好。为了符合绿色化学的国际标准，应当对mof的制备工艺进行改良。
技术实现思路
1、专利技术目的：本专利技术的目的是提供一种集成双酶级联传感器；本专利技术的另一目的是提供一种集成双酶级联传感器的制备方法；本专利技术的另一目的是提供一种用于检测葡萄糖的生物传感器；本专利技术的另一目的是提供一种用于即时血糖含量测定的纸基比色传感器。
2、技术方案：本专利技术的集成双酶级联传感器，所述集成双酶级联传感器包括gox&hrp@zif-90，所述gox&hrp@zif-90中，葡萄糖氧化酶（gox）和辣根过氧化物酶（hrp）包埋在锌咪唑骨架-90（zif-90）的孔道结构内。
3、另一方面，本专利技术提供一种zif-90的制备
4、另一方面，本专利技术提供一种集成双酶级联传感器的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：
5、（1）咪唑-2-甲醛和聚乙烯吡咯烷酮溶解在水中，搅拌，然后水浴加热以充分溶解；
6、（2）搅拌冷却至室温，继续加入gox和hrp，搅拌均匀，最后加入zn(no3)2·6h2o以触发反应；反应结束，收集产物即为gox&hrp@zif-90。
7、优选地，咪唑-2-甲醛、聚乙烯吡咯烷酮的摩尔比为4-10：1； gox和hrp的摩尔比为1:1。
8、优选地，步骤（1）中，搅拌时间为10min-60min，和/或，水浴加热温度为70-90℃。
9、优选地，步骤（2）中，搅拌均匀的搅拌时间为8min。
10、优选地，步骤（2）中，搅拌冷却至室温中，降温速率为1-1.5 ℃/min。
11、另一方面，本专利技术提供一种用于检测葡萄糖的生物传感器，所述生物传感器包括上述的集成双酶级联传感器，所述生物传感器检测葡萄糖时，检测体系中需加入显色底物。
12、优选地，显色底物为四甲基联苯胺（tmb）。
13、优选地，所述生物传感器的使用条件为：温度为25-55℃，检测体系的ph为2-8。
14、另一方面，本专利技术提供一种用于即时血糖含量测定的纸基比色传感器，所述纸基比色传感器包括定性滤纸，所述定性滤纸内载有上述的集成双酶级联传感器和显色底物。
15、本专利技术首次在常温、常压、水溶液的条件下快速制备了gox&hrp@zif-90，并实现了zif-90对葡萄糖氧化酶（gox）和辣根过氧化物酶（hrp）的大量负载和出色的保护作用。另外，利用双酶级联系统代替单酶催化，有效的拉近了酶分子之间的距离，在一定程度上改变了该传感器的传质过程，减少了其在溶质中的无效扩散，增加了检测灵敏度。由于专利技术利用了纸基比色法，不同于此前的繁琐的仪器和设备，不仅造成本低廉，而且操作简单。
16、有益效果：与现有技术相比，本专利技术具有如下显著优点：在较低浓度（0.1-10μg/ml）和较高浓度（400 ~ 2500 μg/ml），检测信号与血糖浓度均呈现出良好的线性关系（(y=8.65e-5[glucose]+0.0739, r2= 0.9988，y=5.11687e-4x-0.00888，r2 = 0.9967）。并且，将构建的上述方法用于血糖含量的检测，得到的回收率和精密度结果均符合生物定量分析方法验证的指导原则，能够作为血糖含量检测的可靠定量方法。另外，gox&hrp@zif-90在不同有机试剂、强酸强碱、高温以及蛋白酶的消解中成功的保留了可观的活性，在长达30天的室温贮藏环境下同样保持了70%以上的生物活性，开发出的gox&hrp@zif-90合成方法也高度符合绿色化学的要求。最终我们构建的纸基比色传感器，实现了便携式的血糖可视化检测，并为酶储存领域和新一代生物传感器的构建提供了潜在的理论指导。
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1.集成双酶级联传感器，其特征在于，所述集成双酶级联传感器包括GOx&HRP@ZIF-90，所述GOx&HRP@ZIF-90中，GOx和HRP包埋在ZIF-90的孔道结构内。
2.一种集成双酶级联传感器的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：
3.根据权利要求2所述的集成双酶级联传感器的制备方法，其特征在于，咪唑-2-甲醛、聚乙烯吡咯烷酮的摩尔比为4-10：1。
4.根据权利要求2所述的集成双酶级联传感器的制备方法，其特征在于，步骤（1）中，搅拌时间为10min-60min，和/或，水浴加热温度为70-90℃。
5. 根据权利要求2所述的集成双酶级联传感器的制备方法，其特征在于，步骤（2）中，搅拌冷却至室温中，降温速率为1-1.5 ℃/min。
6.一种用于检测葡萄糖的生物传感器，其特征在于，所述生物传感器包括根据权利要求1所述的集成双酶级联传感器，所述生物传感器检测葡萄糖时，检测体系中需加入显色底物。
7.根据权利要求6所述的用于检测葡萄糖的生物传感器，其特征在于，显色底物为TMB
8.根据权利要求6所述的用于检测葡萄糖的生物传感器，其特征在于，所述生物传感器的使用条件为：温度为25-55℃，检测体系的pH为2-8。
9.一种用于即时血糖含量测定的纸基比色传感器，其特征在于，所述纸基比色传感器包括定性滤纸，所述定性滤纸内载有根据权利要求1所述的集成双酶级联传感器和显色底物。
...【技术特征摘要】
1.集成双酶级联传感器，其特征在于，所述集成双酶级联传感器包括gox&hrp@zif-90，所述gox&hrp@zif-90中，gox和hrp包埋在zif-90的孔道结构内。
2.一种集成双酶级联传感器的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：
3.根据权利要求2所述的集成双酶级联传感器的制备方法，其特征在于，咪唑-2-甲醛、聚乙烯吡咯烷酮的摩尔比为4-10：1。
4.根据权利要求2所述的集成双酶级联传感器的制备方法，其特征在于，步骤（1）中，搅拌时间为10min-60min，和/或，水浴加热温度为70-90℃。
5. 根据权利要求2所述的集成双酶级联传感器的制备方法，其特征在于，...
【专利技术属性】
技术研发人员：舒畅，陈昊天，严泽龙，宁江月，包兴艳，
申请(专利权)人：中国药科大学，
类型：发明
国别省市：
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