用于预防和治疗转移性肿瘤的组合物制造技术

本发明专利技术公开了用于转移性肿瘤免疫预防和治疗的方法和组合物、以及用于增强肝脏组织内的免疫和／或预防或者治疗肝脏病原体感染的方法和组合物。所述组合物包含免疫细胞激活剂。优选地，所述免疫细胞激活剂是ＬＩＧＨＴ多肽或其变体或者它们的编码核酸。

【技术实现步骤摘要】

本申请主要涉及癌症预防和治疗领域，更具体地涉及用于癌症(特别是转移性肿瘤)免疫预防和治疗的方法和组合物。
技术介绍
肿瘤的放射治疗和化疗并不能完全清除肿瘤细胞，同时还损伤了免疫系统。残存的肿瘤细胞(包括转移肿瘤)往往最终夺取了患者的生命。免疫治疗提供了最理想的完全清除残存肿瘤的方法，但是肿瘤往往因免疫系统被肿瘤抗原激活不足而逃脱免疫系统的攻击。免疫系统的激活不足原因在于免疫细胞浸入肿瘤细胞不足，或缺乏足够强的对浸潤肿瘤的淋巴细胞的活化信号。增加T淋巴细胞对肿瘤的浸润常常带来良好的预后。如何增加对肿瘤的免疫力成为清除肿瘤而又不损伤免疫系统的关键。转移性疾病是癌症致病率和死亡率的主要原因，而且尽管经过数十年在治疗结果改善方面付出的巨大努力，其恶性肿瘤仍然是主要的医学挑战。免疫治疗有潜力成为有希望的根除散布的转移性肿瘤的方案，尤其是在早期。然而，目前在手术切除肿瘤后实行化疗或放疗的标准策略可能会在无意中阻碍免疫治疗的潜在益处。尽管手术切除可以适当地去除不受影响的已建立的肿瘤块，然而伴随此，肿瘤抗原的主要来源将消失，从而可能降低免疫应答的可能性和效力，因为过少的转移性肿瘤可能不能使CTL致敏。减少肿瘤负荷的化疗/放疗可能无意中破坏先前产生的肿瘤特异性CTL并抑制新产生抗肿瘤的CTL，以及可能地诱导耐受性。如何在目前的治疗方案和相关免疫治疗之间达成适当的平衡，一直是根除散布的转移性肿瘤的主要挑战。目前使用体外扩增的肿瘤特异性T细胞进行的主动免疫策略和过继转移治疗很大程度地依赖于对给定的肿瘤抗原的了解。这些治疗可以应用有限数量的带有特征性肿瘤抗原的癌症患者，但是当出现抗原丢失变体(这常常可以在经历免疫学压力的肿瘤上观察到)时却时常无效。LIGHT是一种新近鉴定到的针对基质细胞上的LTβR以及T细胞上的疱疹病毒进入介质(HVEM)的配体。我们先前的数据提示，LIGHT介导的信号转导可以增强肿瘤中用于幼稚细胞的募集和活化的淋巴组织趋化因子的产生。但是，不清楚LIGHT是否可用于转移性肿瘤的防治。在本申请中，我们着重于用高表达突变LIGHT的腺病毒进行肿瘤内注射以产生充足的CTL来根除转移性肿瘤。因此，在本领域中需要提供改进的转移性肿瘤预防和治疗方法。本专利技术满足了这一需要和其它需要。
技术实现思路
本专利技术的专利技术人检查了手术切除前肿瘤微环境中直接产生的免疫应答是否将允许更多的肿瘤抗原特异性T细胞走出肿瘤部位以巡查和消除周边的转移性肿瘤细胞。在本研究中，我们证实，将表达LIGHT的腺病毒直接接种入自发转移的高侵略性4T1乳腺癌中，之后手术去除该原发性肿瘤，可以根除散布的转移性肿瘤细胞。而且，我们能够清楚地证实，局部治疗可以在肿瘤部位诱导促炎细胞因子环境，并产生充足的肿瘤特异性CTL以离开原发性肿瘤并根除转移性肿瘤。我们的研究提示，手术前靶向原发性肿瘤可能是一项产生CTL以根除周边和远处的转移性肿瘤的有效策略。因此，我们的研究开辟了一条通过技巧地利用免疫治疗作为根除转移性疾病的手段治疗癌症的新路径。一般而言，本专利技术涉及预防和/或治疗肿瘤的方法，该方法包括向患者施用免疫细胞(NK，T，and DC细胞)的激活剂。在特别优选的实施方案中，通过手术前靶向原发性肿瘤来预防和/或治疗转移瘤。免疫细胞激活剂可以是CD8+T细胞的激活剂。所述激活剂的例子是抗体，尤其是单克隆抗体，人源化抗体等。在一个实施方案中，所述激活剂是编码激活CD8+T细胞的多肽的核酸。在一个实施方案中，所述免疫细胞激活剂是编码激活免疫细胞的多肽、或者编码激活免疫细胞的多肽的核酸或者包含它的药用组合物。特别地，所述激活剂是LIGHT多肽或者编码LIGHT的核酸。在另一个实施方案中，所述免疫细胞激活剂是包含并表达编码LIGHT的核酸的重组载体(例如重组病毒，优选重组腺病毒或者禽痘病毒)或者包含这种重组载体的药用组合物。在另一个实施方案中，所述免疫细胞激活剂是包含并表达编码LIGHT的核酸的肿瘤细胞或者肿瘤(优选地，该肿瘤细胞或者肿瘤还包含并表达肿瘤抗原)或者包含肿瘤细胞或者肿瘤的药用组合物，特别是治疗性疫苗或者预防性疫苗。在本专利技术中，除非另有说明，当提及LIGHT时，LIGHT可以是野生型的、也可以是突变的，尤其是突变LIGHT。优选地，所述突变LIGHT包含阻止蛋白酶对其降解的突变，例如，所述突变LIGHT是不含蛋白酶裂解位点的LIGHT，特别是，对于人LIGHT蛋白，不含人LIGHT蛋白第81-84位的蛋白酶解位点EQLI的突变LIGHT。但是，本专利技术不限于通过该突变来减少蛋白酶的消化或降解。或者，所述突变LIGHT优选是具有细胞外域氨基酸序列和标签序列(例如便于纯化的标签)，如具有LIGHT第85-239位的氨基酸序列和flag序列。LIGHT可以来自哺乳动物，优选来自人，但也可以来自其它动物。患者可以是哺乳动物，包括但不局限于人。所述肿瘤可以是任何形式的肿瘤。可以是原发性肿瘤，但是更优选是转移性肿瘤。例如，在一些情况下，肿瘤是实体癌症，例如但不局限于乳腺癌、卵巢癌、肺癌、头和颈癌、前列腺癌、甲状腺癌、膀胱癌、胃癌、脑癌、黑色素瘤、鼻咽癌、皮肤癌或肾癌。癌症可以是转移的癌症，例如转移的乳腺癌。癌症可以是生血细胞的癌症，例如淋巴瘤或白血病。当然，熟练技术人员会理解根据本专利技术可以治疗任何数目的肿瘤/癌症。在本专利技术中，除非另有说明，“原发性肿瘤”是一个与“转移性肿瘤”相对的概念，因此，在原发性肿瘤切除后发生的转移性肿瘤也可看作“原发性肿瘤”。在一个优选实施方案中，所述肿瘤是肝脏肿瘤。在一个尤其优选的实施方案，本专利技术涉及预防和/或治疗转移性肿瘤的方法，该方法包括向患者施用免疫细胞激活剂。该免疫细胞激活剂可以是本文提到的任何免疫细胞激活剂，特别是LIGHT多肽或者编码LIGHT的核酸、包含并表达编码LIGHT的核酸的重组载体(例如重组病毒，优选重组腺病毒或者禽痘病毒)、包含并表达编码LIGHT的核酸的肿瘤细胞或者肿瘤、或者包含它们中一种或者多种的药物组合物。本专利技术方法可以采用任何适当的方式给药，例如系统性给药，优选的是例如皮下、肿瘤内给药。优选的是，在原发性肿瘤切除之前靶向原发性肿瘤。在此情况下，可以在肿瘤内给药。对于肝脏中的肿瘤，表达LIGHT或其它免疫刺激物的腺病毒也可以进行系统性地递送。本专利技术还涉及免疫细胞激活剂在制备用于预防或者治疗肿瘤的药物中的用途。本专利技术还涉及包含免疫细胞激活剂的肿瘤细胞或者肿瘤。本专利技术还涉及包含免疫细胞激活剂、用于预防或者治疗肿瘤的药物组合物，特别是治疗性疫苗或者预防性疫苗。在另一方面，本专利技术涉及预防和/或治疗肝脏病原体感染的方法，该方法包括向患者施用免疫细胞激活剂。如果适当的话，该免疫细胞激活剂可以是本文提到的任何免疫细胞激活剂，特别是LIGHT多肽或者编码LIGHT的核酸、包含并表达编码LIGHT的核酸的重组载体(例如重组病毒，优选重组腺病毒或者禽痘病毒)、或者包含它们中一种或者多种的药物组合物。组织特异性靶向可能是局部疾病更有效的治疗方法。腺病毒可用作病原体诱导的肝炎和肝癌(包括原发性和转移性肝癌)的肝特异性靶向试剂。腺病毒-LIGHT是靶向肝脏疾病(病原体和癌症)的理想试剂。本专利技术该方法可以采用任何适当的方式给药，优选系统本文档来自技高网...

【技术保护点】
包含免疫细胞激活剂、用于预防或者治疗肿瘤（特别是转移性肿瘤）的药物组合物，特别是治疗性疫苗或者预防性疫苗。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：傅阳心，
申请(专利权)人：博尔诚北京科技有限公司，
类型：发明
国别省市：11[中国|北京]