一种新的复方头孢噻肟钠他唑巴坦钠的检测方法技术

一种新的高效液相色谱（ＨＰＬＣ）方法，可以同时检测头孢噻肟钠他唑巴坦钠复方中两种单一成分的含量及有关杂质，两种成分不相互干扰与影响，该方法操作简单易行，专属性强，灵敏度高，线性范围大，稳定性好，可用于复方制剂与原料的检测。

A new method for the determination of compound cefotaxime sodium and tazobactam sodium

A new high performance liquid chromatography (HPLC) method, which can simultaneously detect the content of two kinds of single component of cefotaxime sodium and tazobactam sodium compound and related impurities, two ingredients do not interfere with each other and influence, the method is simple and easy to operate, strong specificity, high sensitivity, linear range, stability well, can be used for detection of compound preparation and raw materials.

【技术实现步骤摘要】
专利说明 专利技术背景 头孢噻肟钠(cefotaxime sodium，CTX)是1977年德国赫司特公司研制开发的第一个三代头孢菌素，用于治疗多种革兰氏阳性菌和阴性菌所致的感染性疾病，具有抗菌谱广，抗菌活性强，组织分布少，低毒等特点。该产品上市近30年，在全世界多个国家与地区使用，受到广泛好评，至今仍是临床一线用药。 由于大量和广泛的临床应用，甚至近年来滥用的出现，临床上产生了耐头孢噻肟的耐药菌。这类耐药菌大多数是通过产β-内酰胺酶降解头孢噻肟起作用的，这样降低了头孢噻肟钠的抗菌活性。针对这种情况开发的β-内酰胺酶抑制剂与抗生素合用后可有效抑制细菌的耐药性，恢复抗生素的活性，因此，采用“抗生素+β-内酰胺酶抑制剂”的复方组合能有效地抑制了产酶菌的耐药问题。由这种思路开发的复方制剂如“阿莫西林克拉维酸”、“头孢哌酮钠舒巴坦钠”、“哌拉西林钠舒巴坦钠”等在临床上获得了很大的成功。从制剂的角度来看，因为头孢噻肟钠含有一定水分，而他唑巴坦钠遇水降解，不稳定，如果简单的将两者混合到一起，则无法解决产品的稳定性问题，须在制剂工艺上解决产品的稳定性问题。同时由于之前没有复方制剂，均是单一成分做检测，两者混合后的复方检验需要建立新的检测方法，这样的检测方法不仅要求能够检测出复方中单一成分的含量和有关杂质，同时，这一检测方法对单一成分的测定还不能受到另一成分的影响，而且能够达到专属灵敏、简便操作等要求，并能够在制剂工厂以及各地检测机构或医院对产品质量进行检查，针对这样的要求我们建立了一个新的检测复方头孢噻肟钠他唑巴坦钠的方法。
技术实现思路
我们采用在工厂、药品检验所、医院等常见的高效液相色谱法(HPLC)通过优化流动相、流速、检测波长等指标，建立了一种新的检测方法，这种方法可以检测复方头孢噻肟钠他唑巴坦钠中两种单一成分的含量和有关物质，而不会出现两种成分相互影响与干扰，该方法简便易行、操作步骤少，方法专属性强、灵敏度高、线性范围大、重复性好等，可用于复方的制剂和原料的常规检测。 专利实例 实施例一、复方原料与制剂的初步检测 实验采用“注射用头孢噻肟钠他唑巴坦钠”，比例为6∶1，规格为1.0g，因其他配比和规格在制剂上简单的装量变化，其原料来源、制备工艺均无显著差异。故用该配比、规格样品进行研究。 试验样品为白色、类白色或微黄白色粉末，进行以下各种试验。 1、鉴别试验 两种组分他唑巴坦和头孢噻肟均以钠盐形式存在，灼烧时应呈现钠盐的火焰反应。取铂丝，用盐酸湿润后，蘸取本品，在无色的火焰中燃烧，火焰即显鲜黄色。 两种组分他唑巴坦钠和头孢噻肟钠极性不同，可通过HPLC法进行分离，并用对照品进行对照鉴别。取本品和他唑巴坦和头孢噻肟的标准品，分别用流动相制成每1ml含0.48mg头孢噻肟钠和0.08mg他唑巴坦钠的溶液，按照本专利以下描述的含量测定项下高效液相色谱法试验，结果供试品峰与对照品峰一致。(试验方法见实施例二、三) 2、检测试验 试验样品酸度检查取试验样品加注射用水制成每1ml中含头孢噻肟0.1g的溶液，用酸度计测定，结果试验样品的pH在4.5-6.5之间，为合格产品。 试验样品溶液澄清度检查取试验样品5瓶，分别加水制成每1ml中约含本品0.1g的溶液，与1号浊度标准液进行比较，检查澄清度。结果试验样品为澄明液体，未超过1号浊度标准液，澄清度符合相关规定，为合格样品。 试验样品溶液颜色检查取试验样品5瓶，加水溶解，置于25ml的纳氏比色管中，加水稀释至10ml，与黄色色调标准比色液比较。结果试验样品为澄明液体，溶液颜色未超过黄色或黄绿色9号标准比色液，符合相关规定，为合格样品。 试验样品水分检查，取试验样品1g，按水分检测法测定，结果试验样品水分含量均在3％左右符合标准，为合格样品。 由于该制剂是由无菌原料直接分装的，所以，原料与制剂的成分、含量上完全一样，没有差别。采用本专利的检测方法对原料进行的检测，得到与制剂相同的结果。 实施例二、复方原料与制剂的分析和质量控制方法 为控制产品的质量，必须对产品中的有可能出现的杂质进行分析研究。之前由于没有将两个物质混合在一起使用的经验，所以现有的资料也只有对单一头孢噻肟钠(或他唑巴坦钠)中有关杂质的检验方法。 这样的检验方法虽然是对单一物质检验有效，但是否能够检验混合物中的有关杂质还不清楚，因为制备成混合制剂以后两种主要成分是否会相互影响对方的检测，两种杂质是否也会影响对方的检测有很多不确定因素，需要进行大量的试验来验证。所以，我们根据头孢噻肟钠、他唑巴坦钠单一物质检测方法，建立了相应的对复方物质中杂质的检测方法。 1、有关杂质物质检测 由于HPLC方法已经能够很好地用于单一的两种成分检测，因此我们采用HPLC方法建立复方的杂质检测方法。 试验首先进行破坏性试验，按照药物稳定性试验指南分别进行了1)碱破坏分别取头孢噻肟钠、他唑巴坦钠和注射用头孢噻肟钠他唑巴坦钠适量，于10ml量瓶中，用0.1mol/l氢氧化钠溶液1ml溶解，溶液颜色变微黄色，用0.1mol/l盐酸中和，用水稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。2)、然后采用酸破坏分别取头孢噻肟钠、他唑巴坦钠和注射用头孢噻肟钠他唑巴坦钠适量，于10ml量瓶中，用0.1mol/l盐酸溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。3)、再采用氧化降解分别取头孢噻肟钠、他唑巴坦钠和注射用头孢噻肟钠他唑巴坦钠适量，于10ml量瓶中，用水溶解，加双氧水2滴，用水稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。 取经过上述三种供试品溶液，在下述色谱条件下测试，检测他唑巴坦钠、头孢噻肟钠是否有明显降解，以降解产物峰与主峰分离＞2.0，头孢噻肟钠降解产物与他唑巴坦钠主峰分离度＞1.5为合格标准的判断指标。 我们首先采用如下的色谱条件进行筛选最佳的检测方法 色谱条件(1)试验采用Waters 515泵，Waters2487紫外检测器；色谱柱UltimateXB-NH2正相分析柱；规格5μm，4.6*50mm；流动相正己烷-氯仿溶液(2∶1)；检测波长220 nm-260nm；流速0.1～3ml/min；进样量10～30μl。 色谱条件(2)试验采用Waters 515泵，Waters2487紫外检测器；色谱柱十八烷基硅烷键合硅胶柱，Kromasil C18 5μm 4.6mm×20cm，；流动相乙腈-磷酸二氢钾溶液(0.015mol/L)-四丁基氢氧化钠溶液(10％)(180-200∶785-795∶35-5)(用磷酸调pH值为4.0)；检测波长220nm-260nm；流速0.1～3ml/min；进样量10～30μl。 色谱条件(3)试验采用Waters 515泵，Waters2487紫外检测器；色谱柱十八烷基硅烷键合硅胶柱，Kromasil C18 5μm 4.6mm×20cm，；流动相乙腈-磷酸二氢钾溶液(0.015mol/L)-甲醇(10％)(180-200∶785-795∶35-5)(用磷酸调pH值为4.0)；检测波长220nm-260nm；流速0.1～3ml/min；进样量10～30μl。 色谱条件(4)试验采用Waters 515泵，Waters2487紫外检测器；色谱柱十八烷基硅烷键合硅胶柱，Kro本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种新的用于头孢噻肟钠与他唑巴坦钠复方原料和制剂的检测方法。

【技术特征摘要】
1、一种新的用于头孢噻肟钠与他唑巴坦钠复方原料和制剂的检测方法。2、根据权利要求1所述的方法，其特征在于该方法采用高效液相色谱法，所采用的流动相可以是正己烷，氯仿，二氯甲烷，四丁基氢氧化胺、乙腈、磷酸二氢钾、甲醇、水等，其中优选的采用四丁基氢氧化胺，磷酸二氢钾溶液和乙腈。3、根据权利要求1、2所述的方法，其特征在于该方法所采用的检测波长可以是210~260nm，优选的波长采用230nm。4、根据权利要求1、2、3所述的方法，其特征在于该方法所采用的流动相流速可以是0.1~3.0ml/min，优选地流速采用1.0ml/min；5、根据权利要求1、2、3、4所述的方法，其特征在于该方法所采用的色谱柱可以是胺基柱，氰基柱，十八烷基硅烷键合硅胶柱，八烷基硅烷键合硅胶柱，四烷基硅烷键合硅胶柱，苯基硅烷键合硅胶柱等；...

【专利技术属性】
技术研发人员：王霆，邓桂兴，孙明杰，马宏强，
申请(专利权)人：广州威尔曼新药开发中心有限公司，湘北威尔曼制药有限公司，
类型：发明
国别省市：81[中国|广州]