一种新的西曲依醇(红杉醇)含量测定方法技术

本发明专利技术公开了一种利用高效液相色谱蒸发光散射测定西曲依醇含量的方法，其色谱条件中固定相用以硅胶为基质的氨丙基；流动相采用甲醇－水或乙腈－水；检测器采用蒸发光散射检测器。本发明专利技术采用高效液相色谱蒸发光散射检测技术，灵敏度适宜、专属性强，可以很好地测定西曲依醇的含量，同时比原有柱前衍生化法测定含量的技术实施起来简便许多。

A new method for the determination of Western alcohol (Redwood) content

The invention discloses a method using HPLC determination method in Xiqu steamed alcohol scattering light, the chromatographic conditions in stationary phase with aminopropyl using silica gel as substrate; the mobile phase was methanol water or acetonitrile water; detector with evaporative light scattering detector. The invention adopts the high performance liquid chromatography with evaporative light scattering detection technique, proper sensitivity and strong specificity, can well determine the sequoyitol content, at the same time than the original pre column derivatization method for the determination of the technology to implement many simple.

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种仪器分析方法，其具体涉及一种用高效液相色谱蒸发光散射 法测定西曲依醇的含量。
技术介绍
西曲依醇(又名红杉醇，sequoyitol)(如图1)最初由红豆杉中提取而得， 具有降糖效果。但其没有紫外吸收，因此增加了检测难度。曾有报道[梁敬钰， CN1488344A]用柱前衍生化法测定其含量，该方法比较复杂，操作步骤比较繁琐， 并且无法判断衍生化是否完全和是否得到均一物质，因此，检测的准确度难以得 到保证。
技术实现思路
本专利技术的目的是克服现有的检测方法繁杂的缺点，提供一种灵敏度适宜，方 便检测西曲依醇含量的高效液相色谱蒸发光散射测定法。本专利技术的目的可以通过以下措施达到色谱条件中固定相用硅胶基质的氨丙基为填充剂；流动相采用甲醇-水或乙腈-水；检测器采用蒸发光散射检测器。其 中流动相体系采用甲醇或乙腈与水体积比为95:5 65:35，流速为0.5~2,mL/min， 柱温为15 55'C;其中高效液相色谱蒸发光散射测定时，蒸发光散射中漂移管温 度为25 7(TC，雾化气体流速为0.5~3L/min。通过研究建立了优化的检测方法，优选的指标包括1、 其色谱条件中固定相用硅胶基质的氨丙基为填充剂；流动相采用甲醇-水或乙 腈-水；检测器采用蒸发光散射检测器。2、 流动相体系采用甲醇-水或乙腈-水，体积比为95:5-65:35;其中甲醇与水体积 比最优比例为75:25，乙腈与水体积比最优比例为80:20。3、 流动相的流速为0.5 2mL/min，柱温为15~55°C;其中最佳流速为lmL/min， 柱温为30°C。4、 蒸发光散射检测器中，漂移管温度为25 7(TC，雾化气体流速为0.5~3L/min; 其中最优温度为4(TC，雾化气体最佳流速为1L/min。有关本检测方法的详细描述，请见以下实验实例 实例一 检测方法的优化 1.流动相的选择与优化 西曲依醇为多羟基环醇类化合物，有较好的水溶性，因此考察了甲醇或乙腈与水为流动相。结果见表l:表l流动相的选择编号流动相比例主峰出峰时间(min)分离度理论板数1乙腈-水(90 : io)7.5986.81867092乙腈-水(75 : 25)12.9734.732176253乙腈-水(80 : 20)10.64810.21114707结果表明当条件l、 2、 3时主峰都能得到较好的分离，但条件3所用时间 相对较少，l的时间最少，但是噪音有点大，主峰有点平头，故选择条件3作为 分析条件。2.柱温的选择将柱温箱温度分别设定为30°C、 35°C、 40'C，结果表明温度对主峰的出峰 时间、峰面积影响很小，由于温度越高，对色谱柱损害越大，故测定时选择30 。C。实例二新的检测方法的确认1.标准曲线的制备精密称取西曲依醇对照品适量于25ml量瓶中，加水 7.5ml，摇匀；再加乙腈至刻度，摇匀，得供试品溶液。另取对照品25mg，同法 配制对照品溶液。分别量取2)nl、 5^1、 10^1、 15^1、 20W、 40pl注入液相色谱仪， 记录蒸发光散射仪检测的谱图，以进样量的对数值(x)为横坐标，以峰面积的 对数值(y)为纵坐标，绘制标准曲线，得到线性方程为y二1.2119x+20.594 (y=0.9996)。图谱见附图2 7，数据见表2:表2标准曲线试验数据<table>table see original document page 5</column></row><table>由以上结果可以看出当进样量在2.0pg 40pg之间时，进样量对数值与峰面积对数值有良好的线性关系，表明新方法可靠。2.精密度试验取上述对照品溶液，连续进样6次，以峰面积计算RSD，试验结果如表3:表3精密度试验结果<table>table see original document page 5</column></row><table>连续进样6次的RSD为2.83X，表明仪器的精密度良好，方法可靠。3.稳定性称取西曲依醇样品适量，按上述方法配制成样品溶液，每隔一定时<table>table see original document page 5</column></row><table>从以上结果可以看出24h内样品峰面积的RSD为2.19%，表明样品溶液 放置24h后仍然稳定，因此新方法可以有效进行检测。4.重复性称取西曲依醇样品6份，按前文所述液相色谱蒸发光散射方法 以标准曲线计算含量，图谱见附图8 13，结果如表5:表5重复性试验数据编号称样量(mg)峰面积含量(％)平均含量(％) RSD(。XO19.40427045865.6129.82424706462.543 49.24 8.834226860 398105766.15 65.8965》0 2.888.23373146367.0168.90419042668.22结果显示6次测定的RSD为2.88，表明本方法重复性良好。5.回收率试验取西曲依醇样品约25mg，精密称定，共9份，分别加入适量对照品，按样品制备方法得到供试品溶液。分别进样20pl，记录峰面积，用标准曲线方程计算其含量，由此得到其回收率，结果见表6:表6回收率试验数据已知含量加入量(mg)测的总量回收率(％)平均回收率 RSD (%) (%)16.3218.9935.35108100.215.9418.8163334.375799816.5418.9982635.0546297.4317.2116.5834433.1543196.1217.8415.9794933.1121695.5696.51 1.8116.5616.1747731細6495.2116.3312.2685227.9878395.0416.7612.7783629.0440296.115.9312.6132827.9024294.9实例三采用新检测方法对样品进行含量测定实验条件高效液相色谱仪(岛津SPD-10A)、色谱柱(NUCLEOSIL00-5NH2, 4.6X250醒，5pm，柱温3(TC)、蒸发光散射检测器(漂移管温度40°(〕)，雾化 气体(氮气，流速1L/min)、流动相(乙腈-水体积比75:25，使用前经0.45pm 微孔滤膜过滤并脱气30mins)、进样体积:2(Hi1。测定法取本品约50mg，精密称定，置10ml量瓶中，加水2.5ml.，摇匀， 加乙腈到刻度。另取对照品50mg，同法配置对照品溶液，分别紧密吸取20ml 进入色谱仪，以外标法计算即得。按上诉测定方法操作，精密称取西曲依醇原料适量，分别进样，图谱见附图 14~15，测定结果如下表表7含量测定试验数据样品称样量峰面积含量(％)平均含量(％)06090123.404112113 41316604121886.564.00通过上述种种研究表明用高效液相色谱-蒸发光散射检测法测定待测物中西 曲依醇的含量，快速简便，选择性好，精密度高，从而本专利技术适用于西曲依醇的 含量测定。附图说明图l是西曲依醇结构图图2~7是红杉醇线性色谱图图8~13是红杉醇重复性色谱图 图14本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种西曲依醇的高效液相色谱蒸发光散射测定法，其特征在于其色谱条件中固定相用硅胶基质的氨丙基为填充剂；流动相采用甲醇－水或乙腈－水；检测器采用蒸发光散射检测器。

【技术特征摘要】
1、一种西曲依醇的高效液相色谱蒸发光散射测定法，其特征在于其色谱条件中固定相用硅胶基质的氨丙基为填充剂；流动相采用甲醇-水或乙腈-水；检测器采用蒸发光散射检测器。2、 根据权利要求1所述的西曲依醇的高效液相色谱蒸发光散射测定法，其特征 在于流动相体系采用甲醇-水或乙腈-水，体积比为95:5 65:35;其中甲醇与水 体积比最优比例为75:25，乙腈与水体积比最优比例为80:20。3、 根据权...

【专利技术属性】
技术研发人员：王霆，王艳丽，邓桂兴，孙明杰，
申请(专利权)人：广州威尔曼新药开发中心有限公司，
类型：发明
国别省市：81[中国|广州]