一种新的复方头孢他啶他唑巴坦钠的检测方法技术

一种新的高效液相色谱（ＨＰＬＣ）方法，可以同时检测头孢他啶他唑巴坦钠复方中两种单一成分的含量及有关杂质，两种成分不相互干扰与影响，该方法操作简单易行，专属性强，灵敏度高，线性范围大，稳定性好，可用于复方制剂与原料的检测。

【技术实现步骤摘要】

技术介绍
头孢他啶(Ceftazidime)是由0 Callaghan等人于1978年研制成功的第三代半 合成头孢菌素类抗生素，其特点是对绿浓杆菌、肠杆菌属、厌氧菌、脆弱性杆菌等有杀菌作用；同时仍对各种革兰氏阳性及阴性菌有较大的抗菌活性；对酶十分稳定、安 全，副作用小且抗菌谱广泛，因而被认为是氨基糖甙类抗生素的理想取代品。该产品 上市多年，在全世界多个国家与地区使用，受到广泛好评，至今仍是临床一线用药。头孢他啶的作用机制为与细菌细胞膜上的青霉素结合蛋白(PBPs)结合，使转肽酶酰化，抑制细菌中隔和细胞壁的合成，影响细胞壁粘肽成分的交叉连结，使细胞分裂和 生长受到抑制，细菌形态变长，最后溶解和死亡。在临床上主要用于敏感革兰阴性杆 菌所致的败血症、下呼吸道感染、腹腔和胆道感染、复杂性尿路感染和严重皮肤软组 织感染等。对于由多种耐药革兰阴性杆菌引起的免疫缺陷者感染、医院内感染以及革 兰阴性杆菌或铜绿假单胞菌所致中枢神经系统感染尤为适用(注射用头孢他啶说明 书)。由于大量和广泛的临床应用，甚至近年来滥用的出现，临床上产生了耐头孢他 啶的耐药菌，如耐药的柠檬酸细菌属和普通变形杆菌的假单胞菌属和肠杆菌科，克雷 伯氏菌属，以及抗青霉素的葡萄球菌、单核细胞增多性李司忒(氏)菌。导致细菌耐药 的最主要机制为产生特异性的p -内酰胺酶,包括由质粒介导的超广谱e -内酰胺酶(Extended Spectrum P-Lactamase ， ESBLs)和主要由染色体编码的AmpC酶 (Matindale 2002; Jacoby GA et al， 1991;李真等，2002)。他唑巴坦(三唑巴坦，Tazobactam)是大鹏药品工业株式会社首先合成的P-内 酰胺酶抑制剂，是典型的不可逆竞争性e-内酰胺酶抑制剂，能有效抑制革兰阴性菌 产生的各种质粒介导的e-内酰胺酶，对肺炎克雷伯杆菌、拟杆菌等产生的染色体介 导酶及葡萄球菌产生的青霉素酶具有抑制作用，抑酶作用强于舒巴坦，稳定性比克 拉维酸好(王学工等，1997)。因此采用"抗生素+e-内酰胺酶抑制剂"的复方组合 能有效地抑制了产酶菌的耐药问题。由这种思路开发的复方制剂如"阿莫西林克拉维 酸钾"、"头孢哌酮钠舒巴坦钠"、"哌拉西林钠舒巴坦钠"等在临床上获得了很大的成 功。按照协同式药物组合的研发思路，我们开发了 "注射用头孢他啶他唑巴坦钠"。头孢他啶和他唑巴坦钠两者合用后，具有良好的协同作用，可增加头孢他啶的抗菌活 性，并扩大其抗菌谱。之前对于头孢他啶、他唑巴坦均有比较成熟的检验方法(彭军等，2001);但由 于以前没有复方制剂，实践中均是对单一成分做检测，因此针对两者混合后的复方的 检验需要建立新的检测方法，这样的检测方法必须同时能够检测出复方中单一成分的 含量和有关杂质，同时，这一检测方法对单一成分的测定还不能受到另一成分的影响， 而且能够达到专属灵敏、简便操作等要求，并能够在制剂工厂以及各地检测机构或医院对产品质量进行检査。虽然已有(董伍爱等，2002)等人报道这样的检测方法，但 我们在实践中发现期仍有灵敏度等方法上的缺陷，因此通过改进、针对这样的要求我 们建立了一个新的检测复方头孢他啶他唑巴坦钠的方法。
技术实现思路
我们采用在工厂、药品检验所、医院等常见的高效液相色谱法(HPLC)通过优化 流动相、流速、检测波长等指标，建立了一种新的检测方法，这种方法可以检测复方 头孢他啶他唑巴坦钠中两种单一成分的含量和有关物质，而不会出现两种成分相互影 响与干扰，该方法简便易行、操作步骤少，方法专属性强、灵敏度高、线性范围大、 重复性好等，可用于复方制剂和原料的常规检测。专利实例实施例一、复方原料与制剂的初步检测实验采用"注射用头孢他啶他唑巴坦钠"，比例为6: 1，规格为1.0g，因其他配 比和规格在制剂上简单的装量变化，其原料来源、制备工艺均无显著差异。故用该配 比、规格样品进行研究。试验样品为白色或类白色粉末或结晶性粉末，进行以下各种试验。1、鉴别试验该复方中有钠离子的存在，故灼烧时应呈现钠盐的火焰反应。取铂丝，用盐酸湿 润后，蘸取本品，在无色的火焰中燃烧，火焰即显鲜黄色。 碳酸盐化学鉴别因本品的头孢他啶原料中已混有碳酸钠，加强酸能使碳酸根游离成碳酸并分解成为二氧化碳，二氧化碳又与钙离子复合生成沉淀。取本品适量，加稀酸，即泡腾，发 生二氧化碳，导入氢氧化钙试液中，生成白色沉淀。两种组分他唑巴坦钠和头孢他啶极性不同，可通过HPLC法进行分离，并用对照品 进行对照鉴别。取本品和他唑巴坦和头孢他啶的标准品，分别用流动相制成每lml含 0.48mg头孢他啶和0.08mg他唑巴坦钠的溶液，按照本专利以下描述的含量测定项下 高效液相色谱法试验，结果供试品峰与对照品峰一致。(试验方法见实施例二、三)2.检测试验试验样品酸度检査取试验样品加注射用水制成每ml含100mg的溶液，用酸度 计测定，结果试验样品的pH在6.0—8.0之间，为合格产品。试验样品溶液澄清度检査取试验样品5瓶，分别加水制成每lml中约含本品 O.lg的溶液，与1号浊度标准液进行比较，检査澄清度。结果试验样品为澄明液体， 未超过l号浊度标准液，澄清度符合相关规定，为合格样品。试验样品溶液颜色检査取试验样品5瓶，加水溶解，置于25ml的纳氏比色管中， 加水稀释至10ml，与黄色色调标准比色液比较。结果试验样品为澄明液体，颜色不深 于6号黄色或黄绿色标准比色液，符合相关规定，为合格样品。试验样品澄明度检査取试验样品本品五瓶，分别加水制成每ml中含100mg的溶 液，置光照度为1000 1500Lx的澄明度检査仪上检査，不合格率均小于5%，符合澄 明度检査细则和判断标准规定，为合格样品。试验样品水分检査取试验样品lg,按水分检测法测定，结果试验样品水分含量 均在9%左右符合标准，为合格样品。由于该制剂是由无菌原料直接分装的，所以，原料与制剂的成分、含量上完全一 样，没有差别，采用本专利的检测方法对复方的原料进行的检测，得到与制剂相同的 结果。实施例二、制剂的分析和质量控制方法为控制产品的质量，必须对产品中的有可能出现的杂质进行分析研究。之前由于 没有将两个物质混合在一起使用的经验，所以现有的资料也只有对单一头孢他啶(或 他唑巴坦钠)中有关杂质的检验方法。5这样的检验方法虽然是对单一物质检验有效，但是否能够检验混合物中的有关杂 质还不清楚，因为制备成混合制剂以后两种主要成分是否会相互影响对方的检测，两 种杂质是否也会影响对方的检测有很多不确定因素，需要进行大量的试验来验证。所 以，我们根据头孢他啶、他唑巴坦钠单一物质检测方法，建立了相应的对复方物质中 杂质的检测方法。1、有关杂质物质检测-由于HPLC方法已经能够很好地用于单一的两种成分检测，因此我们采用HPLC方 法建立复方的杂质检测方法。试验首先进行破坏性试验，1)、酸破坏分别取头孢他啶、他唑巴坦钠和注射 用头孢他啶他唑巴坦钠适量于10ral量瓶中，用0. lmol/1盐酸溶液溶解并稀释至刻度， 摇勾，备用；2)、碱破坏分别取头孢他啶、他唑巴坦钠和注射用头孢他啶他唑巴坦 钠适量，于10ml量瓶中，用O. lmol/1氢氧化钠溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，备用； 3)、水解取本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种新的用于头孢他啶与他唑巴坦钠复方原料和制剂的检测方法。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：王霆，邓桂兴，马宏强，孙明杰，
申请(专利权)人：广州威尔曼新药开发中心有限公司，湘北威尔曼制药有限公司，
类型：发明
国别省市：81[]