【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及水产动物病原检测技术，具体是涉及对虾传染性皮下及造血组织坏死病毒的核酸等温扩增检测试剂盒及检测方法。
技术介绍
传染性皮下及造血组织坏死病毒(IHHNV)最初在夏威夷地区养殖的细角滨对虾 (Litopenaeus stylirostris)中被发现，分布广，危害严重，引起死亡率高达90%以上，而 且可感染世界各地养殖对虾，是国际兽疫局(0IE)划定的甲壳类其他重要疾病之一，对世 界对虫下养殖事业发展影响重大。在可感染南美白对虫下(Penaeus vannamei)的多种病毒中， IHHNV可导致慢性矮小残缺综合症(Runt-deformity syndrome,简称RDS)，虽不会导致对 虾大量死亡，但是病毒感染实际上会造成经济上的重大损失。感染IHHNV的南美白对虾，畸 形率高，个体成长差异性大，饵料效率差，商品价值低，产量偏低，整体养殖经济损失可能高 达50% 。研究发现感染传染性皮下及造血组织坏死病毒或患病后存活下来的南美白对虾会 终生带毒，并可通过垂直和水平传播方式把病毒传给下一代和其他种群。 目前，有关IHHNV的检测方法主要有五种，...
【技术保护点】
一种对虾ＩＨＨＮＶ核酸等温扩增检测试剂盒，其特征是该试剂盒包括： （１）、研磨液管：内装研磨液， （２）、核酸提取液Ａ管：内装乙酸钠溶液， （３）、核酸提取液Ｂ管：内装无水乙醇， （４）、核酸提取液Ｃ管：内装质量浓度７０％的乙醇溶液， （５）、ＴＥ缓冲液管：内装ＴＥ缓冲液； （６）、ＵＮＧ酶管：内装尿嘧啶ＤＮＡ糖基化酶； （７）、ＬＡＭＰ反应液管：内装ＬＡＭＰ反应液； （８）、Ｂｓｔ ＤＮＡ聚合酶管：内装Ｂｓｔ ＤＮＡ聚合酶； （９）、显色剂管：内装核酸染料ＳＹＢＲ Ｇｒｅｅｎ Ｉ； （１０）、阳性对照核酸管：内装对虾ＩＨＨＮＶ阳性ＤＮＡ； （１１）、...
【技术特征摘要】
一种对虾IHHNV核酸等温扩增检测试剂盒，其特征是该试剂盒包括(1)、研磨液管内装研磨液，(2)、核酸提取液A管内装乙酸钠溶液，(3)、核酸提取液B管内装无水乙醇，(4)、核酸提取液C管内装质量浓度70％的乙醇溶液，(5)、TE缓冲液管内装TE缓冲液；(6)、UNG酶管内装尿嘧啶DNA糖基化酶；(7)、LAMP反应液管内装LAMP反应液；(8)、Bst DNA聚合酶管内装Bst DNA聚合酶；(9)、显色剂管内装核酸染料SYBR Green I；(10)、阳性对照核酸管内装对虾IHHNV阳性DNA；(11)、阴性对照管内装灭菌的双蒸水。2. 根据权利要求书1所述的对虾IHHNV核酸等温扩增检测试剂盒，其特征在于所述研磨液是由以下体积份的组份组成1 2M的三羟甲基氨基甲烷溶液5 IO份，O. 25 l.OM的乙二胺四乙酸二钠溶液 0. 5 2. 0份，质量浓度5% 10%的十二烷基磺酸钠溶液5 10份，巯基乙醇0. 01 1. 0 份，8-羟基喹啉0. 01 0. 02份，平衡酚5 10份和氯仿5 10份，以双蒸水定容到100 份。3. 根据权利要求书2所述的对虾IHHNV核酸等温扩增检测试剂盒，其特征在于所述 LAMP反应液由以下组份组成LAMP引物IHHNV-FIP和IHHNV-BIP各1 4 ii M， LAMP引物 IHHNV-F3和IH丽-B3各0. 1 0. 5线dATP、 dGTP和dCTP各0. 5 2mM， dTTP、 dUTP各 0. 25 lmM，Tris-HC110 40mM，KC110 20mM， (NH4)2S045 15mM，MgS04l 4mM， Triton X-1000. 05% 1. 0%， Betaine 0. 8 1. 2M ;其余为双蒸水。4. 根据权利要求书3所述的对虾IHHNV核酸等温扩增检测试剂盒，其特征在于LAMP弓| 物的核酸序列如下IH丽-FIP :IH丽-BIP :5 z -GAAAATCTCTTACCATCGGTGCATTTTGAAGGTGTTTGAGTCTCCT ; I朋NV-F3 :5 z -CGACATCCGTGTACCAGA ; IH丽-B3 :5' -AGAGCGTAGGACTTTCCG 。5. 利用如权利要求书1 4中任意...
【专利技术属性】
技术研发人员：徐海圣，何琳，王美珍，戎华南，
申请(专利权)人：浙江大学，
类型：发明
国别省市：86[中国|杭州]
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