Composition for detecting duck source RPA primer, kit and detection method, the RPA primers including forward primer F and duck RPA RPA duck reverse primer R specific sequence follows RPA duck F:5'TGAATCCTGTTGCCGGTCTTGCGATGATTATC 3'; RPA duck R:5'TCTATCGCGTATTAAATGTATAATTGCGGGAC 3'. Using the RPA primers, accurate, rapid and simple detection by checking whether products contain components of duck origin, with high specificity, high sensitivity, fast detection, amplification results are intuitive and strong features, to achieve room temperature of animal meat and meat products are fast and convenient detection, satisfy the government regulation of the market routine monitoring and.
【技术实现步骤摘要】
一种检测鸭源性成分的RPA引物、试剂盒及检测方法
本专利技术属于畜产品安全生物
,具体涉及一种检测鸭源性成分的RPA引物、试剂盒及检测方法。
技术介绍
民以食为天,食以安为先,食品是人类社会赖以生存的第一物质基础。随着人民生活水平的提高,动物源性食品的消费量在逐年增加。食源性疾病和肉食品的潜在危险性不论在发达国家还是发展中国家都没有得到有效控制,畜禽类肉食品的质量与安全问题已经成为一个全球性的问题。从核酸分子水平上对动物进行物种鉴定、物种起源和多样性评估以及对动物源性食品进行检验研究,是目前动物源性成分研究的最有效手段。目前已颁布的标准只有3项地方标准是关于鸭源性成分的检测,主要采用的是常规定性PCR法和实时荧光PCR法对鸭动物源性的定性检测。其中,基于常规PCR-凝胶电泳法的鸭动物成分定性分析标准有地方标准DBS22/018-2013(畜肉中鸭源性成分)和DB22/T2049-2014(鸭源性成分),基于实时荧光PCR法的动物成分定性分析标准有地方标准DB64/T965-2014(鸡、鸭源性成分),但是,目前常规PCR和荧光PCR检测方法存在操作繁琐、成本 ...
【技术保护点】
用于检测鸭源性成分的RPA引物,包括正向引物RPA‑duck‑F和反向引物RPA‑duck‑R,具体序列如下:RPA‑duck‑F:5'‑TGAATCCTGTTGCCGGTCTTGCGATGATTATC‑3';RPA‑duck‑R:5'‑TCTATCGCGTATTAAATGTATAATTGCGGGAC‑3'。
【技术特征摘要】
1.用于检测鸭源性成分的RPA引物,包括正向引物RPA-duck-F和反向引物RPA-duck-R,具体序列如下:RPA-duck-F:5'-TGAATCCTGTTGCCGGTCTTGCGATGATTATC-3';RPA-duck-R:5'-TCTATCGCGTATTAAATGTATAATTGCGGGAC-3'。2.一种用于检测鸭源性成分的RPA试剂盒,其包括权利要求1所述的RPA引物。3.根据权利要求2所述用于检测鸭源性成分的RPA试剂盒,其特征在于,其包含RPA反应体系,该RPA反应体系中各成分的终浓度为:RPA引物的正、反向引物各为0.4-1μmol/L,且,正、反引物的比例为0.5-2:1,DNA模板0.4-1.2ng/μl,pH为6.9-7.1的磷酸缓冲液0.10-0.25M,磷酸镁15-25mmol/L。4.一种检测鸭源性成分的RPA方法,包括:1)提取待测样品的DNA作为模板;2)将权利要求1所述的RPA引物对加入到RPA扩增反应体系中,进行RPA扩增反应;3)然后通过琼脂糖凝胶电泳,若得到片段大小为220bp的条带,则证明所检样品中含有鸭源性成分。5.根据权利要求4所述检测鸭源性成分的RPA方法,其特征在于,所述RPA反应体系中,各成分的终浓度为:RPA引物的正、反向引物...
【专利技术属性】
技术研发人员:王金斌,唐雪明,王荣谈,李文,孙斌,白蓝,蒋玮,武国干,吴潇,吕贝贝,潘爱虎,李鹏,贾军伟,
申请(专利权)人:上海瑞丰农业科技有限公司,上海市农业科学院,
类型:发明
国别省市:上海,31
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