蝗虫微孢子虫实时荧光定量PCR检测方法及试剂盒技术

本发明专利技术公开了一种蝗虫微孢子虫实时荧光定量PCR检测方法及试剂盒。本发明专利技术提供了用于检测蝗虫微孢子虫的组合物，由一个引物对和一个探针组成；所述引物对为由序列表中序列1和序列2所示的两条单链DNA组成的引物对；所述探针为序列表中序列3所示的单链DNA探针(5’端标记有荧光基团FAM，3’端标记有淬灭基团MGB)。本发明专利技术具有灵敏度高，结果准确，重复性好，操作简单易被广泛应用的优势，MGB探针的淬灭基团采用非荧光淬灭基团，本身不产生荧光，可以大大的降低本底信号的强度，使检测结果更准确达到蝗虫微孢子虫快速、准确检测的目的。

Detection method and kit for real-time quantitative fluorescent quantitative PCR of grasshoppers

The invention discloses a real-time fluorescent quantitative PCR detection method and a kit for grasshoppers. The present invention provides compositions for detection of Nosema locustae, by a pair of primers and a probe; consisting of two monocatenarian DNA the primers by sequence 1 in the sequence table and the sequence shown by 2 primer pairs of single stranded DNA; the probe is a sequence 3 in a sequence table shown in. The needle (5 'end labeled with fluorescent groups FAM, 3' end labeled with quencher MGB). The invention has the advantages of high sensitivity, accurate, reproducible, simple and easy to operate and is widely used, MGB probe quencher quenching groups by non fluorescence quenching, itself does not produce fluorescence, can greatly reduce the signal strength, so that more accurate detection results of Nosema locustae rapid and accurate detection the purpose of.

【技术实现步骤摘要】
蝗虫微孢子虫实时荧光定量PCR检测方法及试剂盒
本专利技术属于生物
，涉及一种蝗虫微孢子虫实时荧光定量PCR检测方法及试剂盒，特别涉及一种蝗虫微孢子虫实时荧光定量PCRTaqMan-MGB探针检测方法及试剂盒与应用。
技术介绍
自二十世纪八十年代以来，蝗虫微孢子虫(Paranosemalocustae，P.L.)就被用来作为生物治蝗的重要生物制剂之一，世界各地都有使用且效果良好的报道。蝗虫感染微孢子虫的早期阶段没有明显的临床症状，喷洒微孢子制剂后，定期对蝗虫进行微孢子虫感染率检测，分析和掌握其扩散传播范围以及流行动态等十分必要。目前，微孢子虫检测常用的方法有显微镜观察检测法和PCR方法。在家蚕等其它昆虫微孢子虫检测方法还有免疫学检测方法，但由于微孢子表面具有多抗原决定簇，假阳性比例较高，导致免疫学检测技术难以推广应用。而传统的显微镜检测技术，操作繁琐，灵敏度差，容易带来主观误差。普通PCR方法虽然快捷灵敏度高，但是容易交叉污染出现假阳性结果，且无法对样品进行定量。荧光定量PCR技术是近年来发展起来的新型的核酸检测技术，该技术在普通PCR扩增时除了加入一对引物外还同时另外加入一个本文档来自技高网...

【技术保护点】
用于检测蝗虫微孢子虫的组合物，由一个引物对和一个探针组成；所述引物对由引物1和引物2组成，所述引物1为序列表中序列1所示的单链DNA，所述引物2为序列表中序列2所示的单链DNA；所述探针为序列表中序列3所示的单链DNA探针。

【技术特征摘要】
1.用于检测蝗虫微孢子虫的组合物，由一个引物对和一个探针组成；所述引物对由引物1和引物2组成，所述引物1为序列表中序列1所示的单链DNA，所述引物2为序列表中序列2所示的单链DNA；所述探针为序列表中序列3所示的单链DNA探针。2.用于检测蝗虫微孢子虫的引物对，其特征在于：所述引物对由引物1和引物2组成，所述引物1为序列表中序列1所示的单链DNA，所述引物2为序列表中序列2所示的单链DNA。3.用于检测蝗虫微孢子虫的探针，其特征在于：所述探针为序列表中序列3所示的单链DNA探针。4.根据权利要求1所述的组合物或权利要求3所述的探针，其特征在于：所述探针的5’端标记有荧光基团，3’端标记有淬灭基团。5.根据权利要求1、3或4所述的组合物或探针，其特征在于：所述荧光基团为FAM；所述淬灭基团为MGB。6.用于检测蝗虫微孢子虫的试剂盒，含有下述a)和b)：a)蝗虫微孢子虫质粒标准品；b)权利要求1-...

【专利技术属性】
技术研发人员：扈鸿霞，季荣，王晗，樊泰山，于非，段新华，
申请(专利权)人：新疆师范大学，
类型：发明
国别省市：新疆,65