具有改进的基因表达能力的表达载体制造技术

本发明专利技术涉及具有改进的基因表达能力的表达载体、由所述表达载体转化的细胞，以及通过使用所述细胞来大量生产靶蛋白的方法。与典型的动物细胞表达载体相比，根据本发明专利技术的表达载体显示出更优异的基因表达能力，因此，可以显著提高异源基因的蛋白质表达。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及用于改进基因表达的表达载体、由所述表达载体转化的细胞以及通过使用所述经转化的细胞来大量生产靶蛋白的方法。
技术介绍
在大多数情况下，已经通过使用动物细胞进行了治疗性重组蛋白和抗体的生产，并且正在努力提高生产效率。例如，在无血清培养基中预适应的悬浮宿主细胞系已被用于快速选择高生产细胞系(producer cell line)。此外，已经不断开发高表达载体和高生产细胞系以消除或缩短基因扩增所需的时间。还在努力地开发一种通过在细胞系的初始选择中使用自动化的细胞选择装置的有效方法。高生产细胞系显示出30至80pcd的表达水平(甚至是在没有基因扩增时)，并且高生产细胞系可通过使用基于基质附着区(matrix attachment region，MAR)或类似于MAR的普遍存在的染色质开放元件(ubiquitous chromatin opening element，UCOE)的高表达载体而在4个月内制备。最近的研究表明，载体优化对于在六个月内实现3g/L至5g/L的抗体生产率是必需的。最近，对MAR元件(例如双-MAR、多-MAR、反式-MAR等)的优化暗示了生产率提高的可能性本文档来自技高网...

【技术保护点】
表达载体，其包含可操作地连接的猿猴病毒40(simian virus 40，SV40)启动子、支架附着区(scaffold attachment region，SAR)或基质附着区(matrix attachment region，MAR)元件以及嵌合内含子(chimeric intron)。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2013.12.27 KR 10-2013-01653401.表达载体，其包含可操作地连接的猿猴病毒40(simian virus 40，SV40)启动子、支架附着区(scaffold attachment region，SAR)或基质附着区(matrix attachmentregion，MAR)元件以及嵌合内含子(chimeric intron)。2.根据权利要求1所述的表达载体，其中所述SV40启动子由SEQ ID NO：12表示。3.根据权利要求1所述的表达载体，其中所述SAR元件由SEQ ID NO：39表示，并且所述MAR元件由SEQ ID NO：40或41表示。4.根据权利要求1所述的表达载体，其中所述嵌合内含子由SEQ ID NO：25表示。5.根据权利要求1所述的表达载体，其还包含由SEQ ID NO：15或16表示的基因座控制区(1ocus control region，LCR)元件。6.根据权利要求1所述的表达载体，其中表达受所述启动子调控的靶基因被插入到所述表达载体中。7.权利要求6所述的表达载体，其中所述靶基因选自：因子VII(factor VII，FVII)基因、...

【专利技术属性】
技术研发人员：金正燮，尹成泰，郭曦天，吴美淑，李秀珉，
申请(专利权)人：财团法人牧岩生命工学研究所，
类型：发明
国别省市：韩国;KR