一种苹果酸脱氢酶基因RKMDH2及其重组表达载体制造技术

技术编号:12815272 阅读:110 留言:0更新日期:2016-02-07 08:56
本发明专利技术公开了一种从红冬孢酵母YM25235中分离的编码苹果酸脱氢酶的核苷酸序列,其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示,该基因编码的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示,通过构建重组载体并在大肠杆菌中表达,表达产物具有苹果酸脱氢酶功能,能催化苹果酸转化成草酰乙酸。

【技术实现步骤摘要】

以红冬抱酵母kratochvilovae)YM25235 的总 RNA 反转录产物cDNA为模板,扩增得到编码苹果酸脱氢酶(MDH)的基因,将其克隆到大肠杆菌表达载体后诱导表达,亲和层析法纯化后得到纯酶,并对该酶进行了酶活测定及酶学性质的相关研究,属于基因工程和酶工程领域。
技术介绍
苹果酸脱氢酶(MDH)广泛分布于生物体内,是一种活性非常强的酶,它催化草酰乙酸盐和苹果酸盐的相互转化反应,与二核苷酸辅酶的氧化还原相关。草酰乙酸盐在许多代谢途径中都有重要作用,包括三羧酸循环、乙醛酸旁路、氨基酸合成、糖原异生等,并维持氧化还原平衡,还能促进胞质和亚细胞器代谢物的交换。依生物体的功能不同、组织差异、细胞内定位的不同其表达种类不同,MDH具有多种同工酶形式。胞质苹果酸脱氢酶(cMDH)存在于细胞胞质内,担负着将NADH转入线粒体的重任,并且还对调控三羧酸循环有作用,同时cMDH还是核酸通路(NACh)复合体的一个组成部分 苹果酸脱氢酶(MDH)广泛分布在动物组织、微生物和植物中。它是一种活性最强的酶,根据亚细胞定位,苹果酸脱氢酶可分为5种类型,存在于乙醛酸体、线粒体、过氧化物体、本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种苹果酸脱氢酶基因RKMDH2,其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示,该基因编码的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:张琦肖虎季秀玲魏云林林连兵
申请(专利权)人:昆明理工大学
类型:发明
国别省市:云南;53

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