超稳定免疫球蛋白可变结构域的筛选和改造方法及其应用技术

本发明专利技术涉及被称作Tat相关蛋白质改造工程(TAPE)的方法，通过将靶蛋白和抗生素抗性蛋白连接到Tat信号序列并在大肠杆菌内表达它，筛选具有更高的溶解性和优异的热稳定性的靶蛋白，特别是源自人生殖细胞的免疫球蛋白可变结构域(VH或VL)，以及由TAPE法筛选的、具有溶解性和优异的热稳定性的、人或改造的VH和VL结构域抗体和人或改造的VH和VL结构域抗体支架。还提供了在由TAPE法筛选的人或改造的VH或VL结构域抗体支架中包括随机CDR序列的文库，以及其制备方法。海通了使用该文库筛选的具有靶蛋白质结合能力的VH或VL结构域抗体，包括该结构域抗体的药物组合物。

【技术实现步骤摘要】
超稳定免疫球蛋白可变结构域的筛选和改造方法及其应用本申请为2012年8月22日递交的申请号为201610833668.3,专利技术名称为“超稳定免疫球蛋白可变结构域的筛选和改造方法及其应用”的专利技术专利申请的分案申请。申请号为201610833668.3的专利技术专利申请为申请号为201280076586.9的专利技术专利申请的分案申请。
以下公开涉及被称作Tat相关蛋白质改造工程(TAPE)的方法，通过将靶蛋白和抗生素抗性蛋白融合到Tat信号序列并在大肠杆菌内表达它，筛选具有更高的溶解性和优异的热稳定性的靶蛋白，特别是源自人种系的免疫球蛋白可变结构域(VH或VL)。本专利技术还涉及由TAPE法筛选的、具有优异的溶解性和热稳定性的、人重链可变结构域抗体(下文称为“VH结构域抗体”)和轻链可变结构域抗体(下文称为“VL结构域抗体”)和人或改造的VH和VL结构域抗体支架。此外，以下公开内容涉及VH和VL结构域抗体和抗体支架的氨基酸序列，以及编码所述氨基酸序列的多核苷酸。在含有根据本专利技术筛选的人或改造的VH或VL支架的VH或VL结构域抗体具有相应的本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种可溶性VH结构域抗体支架，其中所述VH结构域抗体支架为MG8-4，包含下面的FR1至FR4的氨基酸序列：/n

【技术特征摘要】
1.一种可溶性VH结构域抗体支架，其中所述VH结构域抗体支架为MG8-4，包含下面的FR1至FR4的氨基酸序列：





2.根据权利要求1的VH结构域抗体支架，其中所述VH结构域抗体支架包含SEQIDNO:140序列。


3.一种多核苷酸，编码权利要求1至2中任一项的VH结构域抗体支架。


4.一种VH结构域抗体，具有权利要求1至2中任一项的VH结构域抗体支架。


5.一种多核苷酸，编码权利要求4的VH结构域抗体。


6.一种VH结构域抗体文库，其中源自人的随机CDRH1、CDRH2和CDRH3插入到权利要求1至2中任一项的VH结构域抗体支架中。


7.根据权利要求6的VH结构域抗体文库，其中所插入的CDRH3具有5到15个氨基酸残基。


8.根据权利要求6的VH结构域抗体文库，其中所插入的CDRH3具有7至13个氨...

【专利技术属性】
技术研发人员：李滢权，金圣根，朴荣燮，南效廷，金董植，朴在燦，尹桦，
申请(专利权)人：财团法人牧岩生命工学研究所，
类型：发明
国别省市：韩国;KR