GnRH多肽‑甲氨蝶呤偶联物、其制备方法及用途技术

本发明专利技术公开了一种下式所示的GnRH‑甲氨蝶呤偶联物，其可由GnRH多肽或其类似物与甲氨蝶呤或其衍生物制得。本发明专利技术还提供了GnRH‑甲氨蝶呤偶联物的制备方法和其在制备抗肿瘤药物方面的用途，本发明专利技术的GnRH‑甲氨蝶呤偶联物制备工艺简单，产率高，易纯化，且在抗肿瘤方面具有良好的肿瘤靶向性，能够将药物浓集于肿瘤部位。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及药物化学领域，具体涉及一种GnRH多肽-甲氨蝶呤偶联物、其制备方 法及用途。
技术介绍
恶性肿瘤是一类严重危害人类身心健康、影响社会劳动力的疾病，给众多家庭及 社会带来了沉重的经济负担。据统计，2020年全世界癌症发病率将比现在增加50%，全球 每年新增癌症患者人数将达到1500万人。我国近20年来癌症发病率上升了 69%，死亡率 上升了 29%，每年癌症新发病例为220万，因癌症死亡人数为160万。每四五个死者中就 有一个死于癌症，癌症已成为威胁人类生命健康的主要杀手。而前列腺癌是男性生殖系统 最常见的恶性肿瘤，其发病率随年龄的增长而增加，已成为严重威胁人类健康的恶性疾病。 在美国癌症学会公布的统计报告中，2009年美国大约有19. 228万名男性被诊断为前列腺 癌，约有2. 736万前列腺癌患者死亡；2012年前列腺癌发病率在男性肿瘤中排名第一，死亡 率排名第二，仅次于肺癌；虽然我国前列腺癌发病率明显低于欧美发达国家，但近年来，随 着我们国家的发展，生产力水平的提高，我国人们的物质生活水平已明显提高、膳食结构发 生了重大改变、医疗水平有了很大的提高、诊断技术不断提高、生活方式和工作方式发生改 变、人均寿命延长以及人口老龄化等，我国前列腺癌发病率逐年上升。2012年中国肿瘤登记 年报的统计数据表明：中国前列腺癌发病率约为17. 35/10万，在男性泌尿生殖系统恶性肿 瘤中排名第一位。近十年来，前列腺癌在我国的发病率呈明显上升趋势，已经成为发病率增 长最快的肿瘤之一，前列腺癌已经严重影响人们的生活质量。如何研究特效药治疗恶性前 列腺癌、提高患者的生存质量和生存时间，已成为当前医药工作者研究的重点和热点。 目前,传统治疗前列腺癌的方法有手术治疗、放疗和化疗,但是手术治疗只能切除 外在的肿瘤，对于通过淋巴途径转移、血液途径转移或浸润的正常组织肿瘤细胞却无能为 力；放疗则是只能进行局部照射，而且在杀死肿瘤组织时也会对正常组织有影响；化学治 疗是全身治疗，但是对肿瘤细胞不具有肿瘤特异性，在杀死肿瘤细胞时也会杀死正常细胞， 而且对于潜伏期的肿瘤细胞无杀伤力。针对这些传统治疗癌症的方法存在的缺陷，一些 专家学者提出了祀向给药这一概念。其实早在1897年Paul Ehrlich's提出了 〃魔术子弹 〃 (magic bullet)的假说，S卩利用抗体进行靶向治疗，即药物只作用于肿瘤细胞而对正常 细胞没有损伤。但是由于受当时单克隆抗体制备极其困难以及各种条件的限制，靶向治疗 这一概念没有得到推广。直到1975年克勒（Kohler)和米尔斯坦（Milstein)提出杂交瘤 技术，即将骨髓瘤细胞与免疫的动物脾细胞融合，形成能分泌针对该抗原的均质的高特异 性的单克隆抗体。靶向药物才又再次引起了医药研发工作者的关注。随着后面几十年的发 展，靶向治疗已成为治疗肿瘤的一种重要手段。靶向治疗是在细胞分子水平上，针对已经明 确的致癌位点（该位点可以是肿瘤细胞内部的一个蛋白分子，也可以是一个基因片段），来 设计相应的治疗药物，药物进入体内会特异地选择致癌位点来相结合发生作用，使肿瘤细 胞特异性死亡，而不会波及肿瘤周围的正常组织细胞，所以分子靶向治疗又被称为生物导 弹。靶向给药系统不但能将治疗药物最大限度地运送到病变部位，使治疗药物在病灶区浓 集，病灶区的药物浓度超出常规制剂的数倍乃至数百倍，疗效显著提高；同时还可以减少药 物的用量，从而降低药物的不良反应，而且便于控制给药的速度和方式，达到高效低、毒的 治疗效果。因此近年来能提高疗效且大幅度减低患者毒副作用的肿瘤靶向药物的研发和临 床应用受到了广泛关注，肿瘤靶向药物开始逐渐成为临床新宠。 甲氨蝶呤（Methotrexate，MTX)是一种抗代谢性广谱抗肿瘤药，属细胞周期特异 性药物，主要作用于细胞周期的S期。由于四氢叶酸是在体内合成嘌呤核苷酸和嘧啶脱氧 核苷酸的重要辅酶，MTX作为一种叶酸还原酶抑制剂，主要抑制二氢叶酸还原酶而使二氢叶 酸不能被还原成具有生理活性的四氢叶酸，从而使嘌呤核苷酸和嘧啶核苷酸的生物合成过 程中一碳基团的转移受阻，导致DNA的生物合成受到明显抑制。此外，本药也可抑制胸腺核 苷酸合成酶，但抑制RNA与蛋白质合成的作用较弱。低剂量MTX(每天2. 5-5mg)即能明显 抑制增殖的淋巴样细胞，特别是激活的T淋巴细胞。MTX还有很强的抗炎作用。大剂量MTX 具有抗肿瘤作用。能选择性抑制增殖中的细胞，阻止免疫母细胞的分裂增殖，对细胞免疫及 体液免疫均有抑制作用。20世纪40年代即用于治疗儿童白血病，50年代始用于银屑病的 治疗。现在主要用于头颈部癌、肺癌、各种软组织肉瘤、银屑病、乳腺癌、卵巢癌、宫颈癌、恶 性葡萄胎、绒毛膜上皮癌、睾丸癌和前列腺癌等肿瘤的治疗，不良反应主要为骨髓抑制、肝 脏毒性和胃肠道毒性。 虽然甲氨蝶呤是临床上常用的抗肿瘤药物，但长期应用出现的耐药性及对正常组 织器官的毒副作用，限制了甲氨蝶呤在临床上的应用。
技术实现思路
促性腺激素释放激素 （Gonadotropin releasing hormone, GnRH)主要由下丘脑弓 状核分泌细胞产生的十肽激素，调控人体激素水平及生殖功能。有研究发现，肿瘤细胞表面 GnRH受体受到广泛关注。前列腺癌肿瘤细胞表面亦高表达GnRH受体，而正常前列腺组织则 是低表达或不表达GnRH受体。由此，为解决现有技术中存在的上述问题，本专利技术选择了临 床上常用广谱抗肿瘤药物MTX，与GnRH多肽通过共价键偶联，形成GnRH多肽-甲氨蝶呤偶 联物。 本专利技术一方面提供了一种GnRH多肽-甲氨蝶呤偶联物，其由GnRH多肽或其类似 物与甲氨蝶呤或其衍生物制得。 对所述GnRH多肽或其类似物没有特殊限定，只要其能够与甲氨蝶呤或其衍生物 发生偶联反应即可。例如，所述GnRH多肽或其类似物可以包含能够与甲氨蝶呤或其衍生物 发生偶联反应的活性基团。所述活性基团例如为氨基，例如，D-Lys单元中的氨基。 优选的，所述GnRH多肽或其类似物中至少包含一个D-Lys单元。 在一个优选实施方式中，所述GnRH多肽或其类似物可以指的是R1-His-Trp-Ser-Tyr-R-Leu-Arg-Pro-R 2，如下面结构式所示： 其中本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种GnRH多肽‑甲氨蝶呤偶联物，其特征在于，其由GnRH多肽或其类似物与甲氨蝶呤或其衍生物制得。

【技术特征摘要】
1. 一种GnRH多肽-甲氨蝶呤偶联物，其特征在于，其由GnRH多肽或其类似物与甲氨蝶 呤或其衍生物制得。2. 如权利要求1所述GnRH多肽-甲氨蝶呤偶联物，其特征在于，所述GnRH多肽或其类 似物包含能够与甲氨蝶呤或其衍生物发生偶联反应的活性基团；优选的，所述GnRH多肽或 其类似物中至少包含一个D-Lys单元； 进一步优选的，所述GnRH多肽或其类似物具有如下结构：其中， R1 为 P-Glu 或 AC ; R 为 D-Lys，D-Lys (Ahx)或 D-Lys (miniPEG); R2 为 NH2, NHEt, Gly-NH2 或 Gly-NHEt。3. 如权利要求1所述GnRH多肽-甲氨蝶呤偶联物，其特征在于，所述GnRH多肽或其类 似物为 pGlu-His-Trp-Ser-Tyr-D-Lys-Leu-Arg-Pr〇-NH2，其分子式为=C57H 81N17O12，其具有 如下的结构：4. 如权利要求1所述GnRH多肽-甲氨蝶呤偶联物，其特征在于：所述甲氨蝶呤或其衍 生物选自甲氨蝶呤、其药学上可接受的盐、酰卤和酯。5. 如权利要求1所述GnRH多肽-甲氨蝶呤偶联物，其特征在于：所述GnRH多肽-甲 氨蝶呤偶联物具有如下结构：6. 权利要求1所述的GnRH多肽-甲氨蝶呤偶联物的制备方法，其特征在于，所述方法 包括使GnRH多肽或其类似物与甲氨蝶呤或其衍生物发生偶联反应， 优选地，在GnRH多肽或其类似物含有D-Lys单元中的氨基的情况下，通过使甲氨蝶呤 活性酯与GnRH多肽或其类似物的D-Lys上的氨基发生酰胺化反应制备得到所述GnRH多 肽-甲氨蝶呤偶联物； 优选的，甲氨蝶呤活性酯与GnRH多...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙祖越，朱圣生，
申请(专利权)人：上海市计划生育科学研究所，
类型：发明
国别省市：上海;31